李金莉
- 作品数：21 被引量：101H指数：5
- 供职机构：深圳市慢性病防治中心更多>>
- 发文基金：深圳市科技计划项目国家科技重大专项广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脓肿分枝杆菌经TLR2信号通路诱导人单核细胞株表达炎症细胞因子分析
- 2016年
- 目的了解脓肿分枝杆菌脓肿亚种和马赛亚种诱导人单核细胞株内TNF-α、IL-8和IL-10的表达变化及与TLR2信号途径的相关性。方法将脓肿分枝杆菌脓肿亚种和马赛亚种感染人单核细胞,感染复数(MOI)=3,采用荧光定量PCR检测人单核细胞被两细菌亚种感染6 h^18 h后胞内TNF-α、IL-8和IL-10的表达水平;采用AntiTLR2 Abs阻断TLR2受体,荧光定量PCR检测人单核细胞被感染6 h后胞内TNF-α、IL-8和IL-10的表达变化。结果脓肿亚种和马赛亚种作用人单核细胞6 h^18 h后,均可诱导人单核细胞内TNF-α、IL-8和IL-10的表达水平上调,以TNF-α表达水平上调明显,IL-10表达水平上调较低,差异有统计学意义(P<0.05);TLR2受体阻断后,脓肿亚种和马赛亚种感染人单核细胞上调胞内TNF-α、IL-8和IL-10表达均出现明显抑制,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论脓肿分枝杆菌脓肿亚种和马赛亚种均可经TLR2信号途径诱导人单核细胞内TNF-α、IL-8和IL-10表达水平上调,以TNF-α表达水平上调明显。
- 桂静李青李金莉洪创跃王峰
- 关键词：分枝杆菌人单核细胞TOLL受体
- 2013—2017年深圳市非结核分枝杆菌流行状况分析
- 目的分析深圳市非结核分枝杆菌(NTM)的流行状况,为NTM防控策略提供依据。方法搜集2013—2017年深圳市慢性病防治中心和各区慢性病防治院收治的9427例疑似肺结核患者,对上述患者进行痰分枝杆菌培养(BACTEC M...
- 洪创跃李金莉赵广录桂静朱玉梅杨争余卫业
- 关键词：疾病特征流行病学研究
- 文献传递
- 龟分枝杆菌和脓肿分枝杆菌药物敏感性分析及E试验法应用评价
- 目的：分析深圳地区龟、脓肿分枝杆菌耐药谱,评价E试验法检测龟分枝杆菌和脓肿分枝杆菌药物敏感性的临床适用性.
方法：用GenoType Mycobacterium CM分枝杆菌菌种鉴定系统筛选16株龟分枝杆菌临床...
- 桂静王峰洪创跃李金莉梁静
- 关键词：龟分枝杆菌脓肿分枝杆菌药物敏感性
- 文献传递
- 全基因组测序技术预测二线注射类抗结核药物耐药性的应用评价被引量：4
- 2021年
- 目的:评价全基因组测序(WGS)技术对耐多药结核病二线注射类抗结核药物耐药性检测的临床应用价值。方法:利用比例法药敏试验和WGS同时对2013至2017年深圳市慢性病防治中心结核病实验室菌株库保存的172株耐多药结核病(MDR)菌株进行卡那霉素、阿米卡星和卷曲霉素3种二线注射类抗结核药物耐药性检测。以比例法药敏试验为金标准,评价WGS的敏感度、特异度和一致性。两种方法有差异的样本用最低抑菌浓度(MIC)检测法进行比较。采用McNemer检验对两种方法的检出率进行统计分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果:共172株MDR菌株纳入本研究,WGS检测发现了2个突变基因:rrs和eis基因,rrs-A1401G是主要的突变位点,分别占阿米卡星、卡那霉素和卷曲霉素耐药菌株的58.3%、14/18和14/14。WGS预测阿米卡星的敏感度、特异度和一致性分别为14/15、93.6%和68.0%;卡那霉素的敏感度、特异度和一致性分别为15/15、98.1%和90.0%;卷曲霉素的敏感度、特异度和一致性分别为14/15、100%和96.0%。2种方法检测结果不一致的菌株共13株,MIC复检1株为耐药菌株,12株为敏感菌株。阿米卡星检测结果不一致的菌株11株,其中WGS检测结果显示8株发生rrs-514-A/C位点突变,而药敏试验和MIC检测均为敏感。结论:WGS诊断阿米卡星、卡那霉素和卷曲霉素具有较高的敏感度和特异度,一致性较强,表明WGS技术在实际应用中对MDR菌株二线注射类抗结核药物耐药检测具有较高的真实性,可广泛应用于临床。
- 洪创跃陈蓉李金莉李霜君吴利凯谭卫国
- 关键词：抗结核药全基因组测序抗药性基因
- 深圳地区结核分枝杆菌耐药分离株分子特征与表型特征相关性研究被引量：8
- 2010年
- 目的 研究深圳地区2007-2008年分离的结核分枝杆菌耐药株分子特征与表型特征的相关性.方法 参照WHO/IUATLD标准,使用L-J药敏培养基,1%比例法药敏试验筛选针对异烟肼、利福平、链霉素、氧氟沙星、卡那霉素5种药物耐药或敏感的临床分离株,通过PCR扩增经筛选菌株的rpoB、katG、rpsL、rrs1、gyrAB、rrs2基因的相关序列,运用DNAStar和BLASTN进行序列分析,应用二倍稀释法测定其表型最低抑菌浓度（MIC）值.结果 筛得实验菌株123株,其中耐药株73株,全敏感株50株.异烟肼耐药株katG基因突变率为84.6%,突变位点全部为S315T或S315N.利福平耐药株rpoB基因突变率为93.6%,突变位点主要集中在S531L（30/44,68.2%）和H526D（9/44,20.5%）或H526R（1/44,2.3%）.链霉素耐药株以rpsl基因突变为主,突变位点为K43R（19/27,70.4%）和K88Q（6/27,22.2%）;rrs1基因突变较少见,仅491C→T（2/27,7.4%）及513A→C（1/27,3.7%）;2个基因突变率合计为65.9%.氧氟沙星耐药株突变率为100%,以gyrA基因突变为主,突变位点包括D94A（2/11,18.2%）、S91P（4/11,36.4%）和A90V（3/11,27.3%）,3个突变位点总突变率为81.8%（9/11）;S95T存在于所有氧氟沙星耐药株及部分全敏感株gyrA基因中;gyrB未发现突变.卡那霉索耐药株rrs2基因突变率为61.1%;突变位点为1400 A→C（9/11,81.8%）和1483 G→T（2/11,18.2%）.其他突变位点在全敏感株中未发现.临床耐药株同一耐药组别所包含耐药类型不同,相关耐药基因的突变位点相同,其MIC值基本一致;相关耐药基因突变位点不同,其MIC值存在明显差异.结论 结核分枝杆菌耐药基因突变存在一定的地域特性,表型特征因耐药基因突变位点不同存在耐药程度差异.
- 桂静王峰李金莉罗道泉姚立泰
- 关键词：结核分枝杆菌耐药聚合酶链反应分子特征
- 脓肿分枝杆菌复合群亚种鉴定的方法学研究被引量：4
- 2014年
- 目的 研究脓肿分枝杆菌复合群亚种鉴定的有效方法.方法 将19株克拉霉素敏感的脓肿分枝杆菌临床分离株扩增hsp65和rpoB基因相关序列,分别用Mega软件和PhyML软件单独及联合对其构建系统进化树以鉴定其亚种,对鉴定结果不一致的菌株进行16S-23S间隔序列测序加以判定.扩增分析rrl和erm（41）基因特征,采用微量肉汤稀释法对菌株进行克拉霉素诱导耐药检测,分析各亚种的基因表型模式.结果 19株脓肿分枝杆菌复合群中,hsp65和rpoB基因鉴定结果一致的有Mycobacterium massiliense（M.massiliense）亚种10株、Mycobacterium abscessus（M.abscessus）亚种4株和Mycobacterium bolletii（M.bolletii亚种1株,其余4株采用hsp65基因分类为M.massiliense,采用rpoB基因分类为M.abscessus,最终采用间隔序列测序鉴定为M.massiliense.rrl基因分析19株均未发现与克拉霉素耐药相关的突变.erm（41）基因分析结果表明,M.abscessus的-35位启动子序列与M.bolletii和M.massiliense不同,第28位碱基存在多态性（T28或C28）,M.bolletii和M.massiliense的-35位启动子序列及第28位碱基分子特征一致.14株M.massiliense菌株均存在erm（41）基因276 bp长片段和2 bp短片段缺失,4株M.abscessus和1株M.bolletii均携带完整的erm （41）基因.克拉霉素诱导耐药试验结果显示,3株携带T28的M.abscessus（菌株号：CI02、CI04和CI12）和1株M.bolletii均可诱导产生克拉霉素高水平耐药,其余14株M.massiliense和1株携带C28多态性的M.abscessus（菌株号：CI17）对克拉霉素始终保持敏感.暂未发现-35位启动子序列差异与克拉霉素诱导耐药相关.结论 hsp65基因适用于脓肿分枝杆菌复合群亚种分子鉴定,且脓肿分枝杆菌复合群的erm（41）基因分子特征及相关克拉霉素诱导耐药表型特征均有亚种特异性,hsp65基因和erm（41）基因检测可用于脓肿分枝杆菌复合群亚种鉴定.
- 桂静李金莉洪创跃王峰
- 关键词：分枝杆菌属热休克蛋白质类克拉霉素诱导耐药
- MTBDR plus线性探针技术快速检测深圳地区结核分枝杆菌耐药性研究
- 目的评价MTBDR plus线性探针技术(简称"Hain技术")检测深圳地区结核分枝杆菌菌株耐药性的临床应用能力。方法采用Hain技术检测2014—2016年深圳市耐药监测项目的 1140株临床菌株的耐药性,以传统药敏比...
- 洪创跃李金莉赵广录桂静朱玉梅王峰
- 关键词：结核分枝杆菌利福平异烟肼耐药
- 文献传递
- 2013-2017年深圳市非结核分枝杆菌流行状况分析被引量：27
- 2019年
- 目的分析深圳市非结核分枝杆菌(NTM)的流行状况.为NTM病防控策略提供依据。方法搜集2013 2017年深圳市慢性病防治中心和各区慢性病防治院收治的37 630例疑似肺结核患者.对上述患者进行痰分枝杆菌培养(BACTEC MGIT 960和改良罗氏法)检出阳性菌株8850株.采用MPB64免疫胶体金法和对硝基苯甲酸生长试验进行结核分枝杆菌复合群和NTM的初步菌种鉴定,对初步菌种鉴定为NTM的菌株应用HAIN基因分型鉴定法进行NTM菌种鉴定。分析NTM菌株在不同年度、性别、年龄、感染类型、地区来源、户籍来源,以及NTM不同种类菌株的分布特征。率的比较采用x^2检验.以P<0. 05为差异有统计学意义。结果8850株分枝杆菌培养阳性菌株中.初步菌种鉴定获得366株NTM菌株.检出率为4. 14%(366/8850);HAIN基因分型鉴定法确定293株NTM菌株的菌种.鉴定率为80. 05%(293/366)。2013-2017年深圳市NTM的检出率呈轻微上升趋势[3.81%(71/1864)~4.50%(82/1821)],但各年度间差异无统计学意义(x^2趋势= l.159.P=0. 885). 366 例 NTM感染患者中,女性患者的检出率[4. 87%( 144/2957)]明显高于男性患者[3. 77%(222/5893)](x^2=6.038,P =0.014);感染的高峰年龄均为25~34岁,分别占2& 83%(64/222)和23. 61%(34/144),差异无统计学意义(x^2=1.213,P=0.271).初治患者、郊区患者、流动人口患者、郊区流动人口患者的NTM检岀率[分别为2.31%(187/8104).1.77%(105/5909),3.89%(324/8323)、1.61%(91/5663)]明显低于复治患者[23.99%(179/746)]、市中心患者[8.87%(261/2941)]、户籍人口患者[7.97%(42/527)]、城区流动人口患者[8.77%(235/2681 )(x^2 =810. 400.249.512,20.778,248.418.P值均=0. 000)0 293株NTM分离株中,构成比占前3位者依次为脓肿分枝杆菌[41.64%(122/293)]、鸟-胞内分枝杆菌[22. 18%(65/293)]、堪萨斯分枝杆菌口6. 04%(47/293)];另外,发现7例[2.39%(7/293刀混合感染类型。结论深圳市近几年NTM检出率稳定,分布种类多样.以脓肿分枝杆菌、�
- 洪创跃李金莉赵广录桂静朱玉梅杨争余卫业
- 关键词：疾病特征流行病学研究
- 脓肿分枝杆菌诱导巨噬细胞产生TNF-α和IL-8的相关分子机制被引量：2
- 2018年
- 目的探索脓肿分枝杆菌脓肿亚种和马赛亚种诱导THP-1巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素8(IL-8)的相关分子机制。方法将脓肿分枝杆菌脓肿亚种和马赛亚种感染THP-1巨噬细胞,ELISA检测THP-1巨噬细胞被感染6、18、24、48、72 h内分泌TNF-α和IL-8情况,及分别抑制TLR2受体、MAPKs中3种信号分子(JNK信号蛋白、ERK信号蛋白和P38 MAPK)和NF-κB后,THP-1巨噬细胞被感染48 h后分泌TNF-α和IL-8情况。结果脓肿亚种和马赛亚种致TNF-α和IL-8分泌呈时间依赖性,在作用THP-1巨噬细胞48 h后致TNF-α和IL-8分泌达高峰,脓肿亚种所致TNF-α分泌量高于马赛亚种,差异有统计学意义(P <0.01);分别抑制相应信号分子后,脓肿亚种和马赛亚种所致的TNF-α和IL-8分泌水平均出现明显抑制,与感染阳性对照差异均有统计学意义(均P <0.05)。结论脓肿分枝杆菌脓肿亚种和马赛亚种均可经TLR2信号途径、MAPKs信号途径和NF-κB信号途径诱导TNF-α和IL-8的分泌,脓肿亚种对TNF-α的诱导作用较强于马赛亚种。
- 桂静王峰李金莉刘涛彭毅
- 关键词：分枝杆菌白介素8酶联免疫吸附测定
- 采用GenoType MTBDR plus检测技术快速检测结核分枝杆菌耐药性的研究被引量：3
- 2018年
- 目的评价GenoType MTBDR plus方法[线性探针杂交技术（HAIN技术）中的一种方法，以下简称“HAIN技术”]检测深圳地区结核分枝杆菌菌株耐药性的临床应用能力。方法采用HAIN技术检测2014-2016年深圳市耐药监测项目（来自于深圳市慢性病防治中心及深圳市各区慢性病防治院）的1140株临床菌株的耐药性，以传统药物敏感性试验（简称“药敏试验”）的比例法（简称“比例法药敏试验”）作为对照，评价HAIN技术检测耐药的能力。分别利用McNemar检验对检测效果进行评价，敏感度和特异度对检测结果真实性进行评价，阳性预测值和阴性预测值对检测方法应用价值进行评价，以及利用Kappa检验对两种方法检测结果的一致性进行评价。结果比例法药敏试验检测结果为异烟肼耐药123例，利福平耐药75例，耐多药52例；HAIN技术检测异烟肼耐药120例、利福平耐药79例、耐多药52例，两种检测方法比较差异均无统计学意义（McNemar检验，P值分别为0．250、0．219、1．000）。以比例法药敏试验结果为标准，HAIN技术检测异烟肼耐药的敏感度和特异度分别为97．6％（120／123）和100．0％（1017／1017），阳性预测值和阴性预测值分别为100．0％（120／120）和99．7％（1017／1020），Kappa值为0．986；检测利福平耐药的敏感度和特异度分别为98．7％（74／75）和99．5％（1060／1065），阳性预测值和阴性预测值分别为93．7％（74／79）和99．9％（1060／1061），Kappa值为0．958；检测耐多药的敏感度和特异度分别为96．2％（50／52）和99．8％（1086／1088），阳性预测值和阴性预测值分别为96．2％（50／52）和99．8％（1086／1088），Kappa值为0．960。HAIN技术检测利福平耐药基因rpoB出发生频率最高的突变是野生型条带8缺失及S531L位点突变（58．7％，44／75），其次是野生型条带7缺失及H526Y位点突变（
- 洪创跃李金莉赵广录桂静朱玉梅王峰
- 关键词：分子探针技术
