李敏超
- 作品数：12 被引量：13H指数：2
- 供职机构：华东理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重大科学仪器设备开发专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程理学化学工程医药卫生更多>>
- ^(13)C辅助的超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用方法精确分析毕赤酵母胞内代谢物浓度被引量：2
- 2016年
- 毕赤酵母作为一种高效的外源蛋白表达平台,其蛋白表达水平与胞内代谢物浓度紧密相关。但胞内代谢物种类多、物化性质差异大、浓度低、周转快,对其绝对浓度的精确检测一直难于实现。本研究将超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用分析方法与13C同位素标记技术相结合,探索解决该难题的方法。首先,优化了超高效液相色谱的操作条件,利用3种色谱柱实现了64种常见中间代谢物的分离;对三重四极杆质谱仪的检测离子对和碰撞电压等操作条件进行优化,找到了对各种物质具有专一性的检测离子对。然后,利用全标记13C标记底物培养细胞,收集胞内的全标记代谢物用作定量内标物,建立了53种中间代谢物的标准曲线。实验结果表明,本方法不但精确性高,标准曲线相关系数达到0.99以上,而且重现性好,受实验条件和仪器操作条件的影响很小。将本方法应用于毕赤酵母胞内代谢物浓度的绝对定量分析,成功获得了胞内各种代谢物的浓度水平,为后续深入研究毕赤酵母代谢调控机理,实现外源蛋白的高效生产奠定了基础。
- 郭孟磊刘晓云黄明志李敏超储炬庄英萍张嗣良
- 关键词：代谢物浓度毕赤酵母
- 一种合成培养基及其制备方法和用途
- 本发明公开了一种合成培养基及其制备和用途，其特征在于，所述合成培养基包含如下成分及其质量浓度：葡萄糖·H<Sub>2</Sub>O 10～30g/L、木糖0.2～1.0g/L、硫酸铵3～10g/L、硝酸钠2～5g/L、氯...
- 黄明志陈腾飞李敏超
- 文献传递
- 一种可精确定时、定量并在位灭活的全自动快速取样设备
- 本发明涉及一种可精确定时、定量并在位灭活的全自动快速取样设备，该设备包括机械传动装置、取样装置及控制装置，控制装置联动控制取样装置及机械传动装置，机械传动装置包括电机、传动轴、取样转盘及储液槽，电机通过传动轴驱动取样转盘...
- 黄明志李敏超王泽建刘玉伟储炬庄英萍张嗣良
- 文献传递
- 气相色谱-质谱联用选择离子监测方法定量分析低浓度胞内游离氨基酸的^(13)C同位素丰度被引量：9
- 2014年
- 胞内游离氨基酸具有周转快的特点,其13C同位素丰度能快速反映胞内代谢状态的变化。但胞内游离氨基酸的浓度很低,现有的基于气相色谱-质谱联用全扫描模式的13C同位素丰度检测方法不能满足要求。本研究考察理论上检测精度更高的选择离子监测方法在胞内游离氨基酸13C同位素丰度分析中应用的可能性。首先在全扫描模式下分析了不同氨基酸的断裂规律,找出与每种氨基酸对应的特征碎片,建立起包含有16种胞内游离氨基酸的特征碎片库。利用此特征碎片库,在样品分析时只需检测特定m/z处的信号,从而实现选择离子监测,提高信号质量。对标准品的检测结果表明,与全扫描模式相比,本方法的信噪比、测量精度和准确性分别提高了17倍、2倍和3.8倍。在对辅酶Q10生产菌株样品的分析中,本方法成功检测出8种胞内游离氨基酸的同位素丰度。
- 李敏超黄明志刘玉伟储炬庄英萍张嗣良
- 关键词：气相色谱-质谱联用游离氨基酸
- 发酵过程的工程学研究与先进仪器仪表技术进展
- 随着生命科学和生物技术的发展，对发酵过程中的细胞代谢生理特性和微观过程越来越清楚了，但又面临在如此众多的微观过程中寻找过程全局优化关键点的困难。因此，传统或经典的发酵工程内容在概念和内涵上已经发生很大的变化，新的发酵工程...
- 王泽建李兰张鑫李敏超黄明志
- 关键词：发酵
- 一种可精确定时、定量并在位灭活的全自动快速取样设备
- 本发明涉及一种可精确定时、定量并在位灭活的全自动快速取样设备，该设备包括机械传动装置、取样装置及控制装置，控制装置联动控制取样装置及机械传动装置，机械传动装置包括电机、传动轴、取样转盘及储液槽，电机通过传动轴驱动取样转盘...
- 黄明志李敏超王泽建刘玉伟储炬庄英萍张嗣良
- 文献传递
- 发酵过程的工程学研究与先进仪器仪表技术进展
- 随着生命科学和生物技术的发展,对发酵过程中的细胞代谢生理特性和微观过程越来越清楚了,但又面临在如此众多的微观过程中寻找过程全局优化关键点的困难。因此,传统或经典的发酵工程内容在概念和内涵上已经发生很大的变化,新的发酵工程...
- 王泽建李兰张鑫李敏超黄明志
- 文献传递
- 一种合成培养基及其制备方法和用途
- 本发明公开了一种合成培养基及其制备和用途，其特征在于，所述合成培养基包含如下成分及其质量浓度：葡萄糖·H<Sub>2</Sub>O 10～30g/L、木糖0.2～1.0g/L、硫酸铵3～10g/L、硝酸钠2～5g/L、氯...
- 黄明志陈腾飞李敏超
- 文献传递
- 紫外分光光度法快速测定庆大霉素C_(1a)含量在高通量筛选中的应用被引量：3
- 2019年
- 目的探索庆大霉素C_(1a)含量的快速检测方法,实现诱变菌株的高通量筛选。方法以紫外分光光度法作为检测庆大霉素C_(1a)含量的手段,对庆大霉素C_(1a)单组分生产菌株进行ARTP、LiCl、微波和ARTP+LiCl诱变,通过高通量筛选获得高产菌株,并在5L发酵罐中对高产稳定性菌株进行验证。结果紫外分光光度法和高效液相色谱法对发酵液中庆大霉素C_(1a)含量进行测定,最大相对误差为3.98%;筛选获得了10株高产菌株,其中AL324菌株与出发菌株相比,摇瓶效价提高了52%;通过稳定性传代实验,获得了4株高产稳定性菌株。5L发酵罐验证实验表明AL324与出发菌株相比效价提高了81.3%。结论紫外分光光度法可以快速检测发酵液中庆大霉素C_(1a)含量,该方法应用于高通量筛选中,获得了高产菌株,筛选结果表明ARTP+LiCl复合诱变方法的正突变率较高,是一种有效的庆大霉素C_(1a)高产菌株诱变方式。
- 田江涛李敏超杭海峰郭美锦储炬庄英萍
- 关键词：分光光度法高通量筛选
- 胞内代谢物同位素丰度的GC-MS选择离子监测模式分析方法及其在辅酶Q10发酵过程中的应用
- 在各种组学数据中，代谢通量组最能反映细胞代谢特性，而13C标记实验是准确获得代谢通量组的可靠方法。当前的13C代谢通量分析主要依赖于菌体蛋白水解氨基酸丰度的测定，只适用于与菌体生长密切关联的生物过程的研究。与蛋白水解氨基...
- 李敏超
- 关键词：辅酶Q10发酵过程
