李子健
- 作品数：88 被引量：224H指数：8
- 供职机构：北京大学第三医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家杰出青年科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学历史地理更多>>
- 共表达中国株HIV-1gp120与hIL-6的重组鸡痘病毒研究被引量：2
- 2003年
- 目的 构建共表达中国株HIV 1gp12 0与人白细胞介素 6 (IL 6 )的重组鸡痘病毒。方法分别将HIV 1gp12 0基因和hIL 6基因插入到鸡痘病毒表达载体pUTAL复合启动子ATI P7.5和P7.5串联启动子下游 ,构建重组鸡痘病毒表达质粒pUTA GP IL6。利用脂质体法将重组质粒和鸡痘病毒2 82E4株共转染鸡胚成纤维细胞。经BUdR加压筛选 3次后 ,重组病毒分别用PCR、间接免疫荧光试验和Westernblot进行鉴定 ,并进行小鼠免疫研究。结果 重组病毒基因组中可扩增出 1.4kb大小片段 ,重组病毒感染细胞表面有绿色荧光物质 ,表达产物的Westernblot分析表明重组病毒可表达gp12 0和hIL 6蛋白。重组病毒可刺激小鼠产生特异性体液免疫应答。结论 成功构建了共表达中国株HIV 1gp12 0与hIL 6的重组鸡痘病毒 ,为研制HIV 1基因工程活载体疫苗提供有益的资料。
- 江文正金宁一李子健张立树王宏金洪涛
- 关键词：重组鸡痘病毒
- 人免疫缺陷病毒Ⅱ型(HIV-2)gag蛋白基因在毕赤酵母中的克隆表达被引量：2
- 2003年
- 目的:实现HIV-2ROD gag重组蛋白的分泌表达,为研究HIV-2ROD gag蛋白结构与功能及亚单位蛋白疫苗研究打下基础。方法:将HIV-2ROD gag蛋白基因片段,与分泌型毕赤酵母表达载体pPIC9重组,构建了相应的重组表达质粒pPIC9-gag,转化GS115酵母菌,经MD/MM表型筛选、PCR扩增筛选阳性克隆,以甲醇诱导表达后进行SDS-PAGE分析及Western blot证实。结果:获得了HIV-2ROD gag重组蛋白在巴斯德毕赤酵母系统中的分泌表达,表达产物可被HIV-2抗血清识别,分子量约为57kD。结论:pPIC9-gag重组质粒在甲醇营养型酵母菌中可经甲醇诱导产生HIV-2ROD gag蛋白,该蛋白具有强免疫学活性。
- 李子健金宁一江文正张应玖张立树孙兆增
- 关键词：HIV-2毕赤酵母
- 鉴定新的14-3-3结合蛋白HIP-55负调控HPK1激酶活性
- ＜正＞14-3-3通过调控与之相互作用的蛋白质调节细胞生存,在心血管疾病、肿瘤等重大疾病中起着非常重要的作用。我们应用蛋白质组学的方法发现了新的14-3-3相互作用蛋白质HIP-55。HIP-55（HPK1-intera...
- 李子健张幼怡Haian Fu
- 文献传递
- HIV-1外膜蛋白与IFNα在重组鸡痘病毒中的共表达及特性分析被引量：1
- 2004年
- 江文正金宁一李子健张立树韩文瑜
- 关键词：IFNΑ重组鸡痘病毒共表达
- MiRNA-214介导异丙基肾上腺素诱导的心脏成纤维细胞增殖及胶原合成增加
- 目的 β-肾上腺素受体持续过度激活引起的心脏成纤维细胞增殖及胶原合成增加是多种疾病导致心脏纤维化的共同通路.近年研究发现,在多种心脏纤维化病理模型中,microRNA-214(miR-214)表达升高,但其在心脏纤维化中...
- 孙敏于海奕张幼怡李子健高炜
- 关键词：异丙基肾上腺素心脏纤维化线粒体融合蛋白2
- 鼠层粘蛋白α5链G结构域E3和E8基因在毕赤酵母中的表达
- 2006年
- 为探索层粘连蛋白G结构域在甲醇型酵母(Pichia Yeast)中的表达,用PCR的方法获得了鼠层粘蛋白α5链G结构域的E3(LG4-5)和E8(LG1-3)基因片段,并将其克隆到P.pastoris分泌型表达载体pPIC9中,构建了pPIC9-E3和pPIC9-E8等2个毕赤酵母重组质粒。将测序正确的质粒用电转化的方法转化酵母表达受体菌GS115,通过表型和PCR的方法筛选出P.pastoris重组子。用甲醇诱导表达后,进行SDS-PAGE和Western-blot鉴定。结果表明,鼠层粘蛋白α5链G结构域的E3和E8片段在毕赤酵母中获得了成功的表达。
- 孙兆增张玉静李子健张艳宇连继勤
- 关键词：层粘蛋白毕赤酵母
- HIP-55蛋白在开发抑制肿瘤药物中的应用
- 本发明公开了一种HIP-55蛋白的新用途。本发明提供的重组载体，为将编码干扰HIP-55蛋白表达siRNA的DNA分子插入表达载体，得到重组载体；所述HIP-55蛋白的氨基酸序列为序列表中的序列2。还提供了HIP-55蛋...
- 李子健付海安石智李增刚
- 文献传递
- 肾上腺素受体信号调控新机制及在心脏重塑中的功能-从受体网络调控到单细胞/单分子机制
- 肾上腺素受体对心血管系统的调控起着非常重要作用.正因如此,2012年度诺贝尔化学奖授予了美国科学家罗伯特·莱夫科维茨(Robert J.Lefkowitz)和布莱恩·克比尔卡(Brian K.Kobilka),以表彰他们...
- 李子健
- G蛋白偶联受体信号新调控机制
- G 蛋白偶联受体(GPCR)与心血管疾病病、肿瘤、免疫和感染性疾病等重要疾病的发生、发展密切相关.同时,约50％药物都是以受体为靶点.但目前对受体精密调控机制尚不清楚.利用蛋白质组学、活细胞单分子荧光成像等方法,我们研究...
- 李子健
- 人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)gag基因疫苗的免疫原性被引量：1
- 2004年
- 目的 :检测人免疫缺陷病毒 1型 (HIV 1)gag基因疫苗的免疫原性。方法 :分别以ELISA、荧光抗体染色和乳酸脱氢酶释放法 ,检测免疫小鼠血清抗体滴度、脾T细胞亚群的数量和淋巴细胞杀伤效应。结果 :血清抗体滴度、脾T细胞亚群的数量及淋巴细胞杀伤效应 ,重组质粒pVAXGAG免疫组与空载体pVAX1对照组相比较差异显著(分别为P <0 .0 5和P <0 .0 1)。结论 :HIV 1DNA疫苗质粒pVAXGAG在BALB/c小鼠中不仅可诱导特异性体液免疫 ,而且可诱导特异性细胞免疫。
- 江文正金宁一李子健张立树
- 关键词：人免疫缺陷病毒1型GAG核酸疫苗免疫原性
