曾慧君
- 作品数：12 被引量：9H指数：2
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 体外条件下不同形貌羟基磷灰石微粒对mBMSC与RAW264.7细胞的生物学特性影响
- 研究背景
外伤或病理性骨吸收导致的骨缺损已成为当前全球关注的健康问题之一,骨缺损的修复再生也引起了再生医学、组织工程及生物材料领域的广泛关注。目前骨假体移植修复作为骨缺损治疗重要手段之一,能够较好的对缺损部位进行...
- 曾慧君
- 关键词：羟基磷灰石微粒形貌生物学特性RAW264.7细胞
- 文献传递
- 转化生长因子β1-结缔组织生长因子(TGF-β1/CTGF)信号轴介导胶质瘤替莫唑胺化疗耐药机制研究
- 胶质母细胞瘤(Glioblastoma，GB)为颅内最常见原发性恶性肿瘤，尽管目前以手术联合放化疗的综合治疗方法已成为指南，但GB患者预后仍未改善，术后极易复发。替莫唑胺(Temozolomide，TMZ)是目前GB治疗...
- 曾慧君
- 关键词：胶质瘤替莫唑胺耐药机制结缔组织生长因子转化生长因子Β1
- 文献传递
- 神经元样细胞对体外培养成肌干细胞功能活性的影响
- 探讨神经元样褐家鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12)对C3H小鼠成肌干细胞(C2C12)增殖与分化的影响。利用Transwell建立PC12和C2C12共培养体系:实验分为3组:空白对照组:C2C12单独培养;实验组:C2C1...
- 刘幸卉黄维一陈荣冯利强廖华余磊曾慧君
- 周期性力学刺激对成肌细胞自身抗原表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的探讨周期性力学刺激对体外培养的成肌细胞自身抗原表达的影响。方法取C2C12细胞根据处理方法不同分为实验组及对照组,其中实验组分为4个亚组,即2、4、6 d周期性拉伸组(2、4、6 d拉伸组)及1 d拉伸组。2、4、6 d拉伸组:细胞置于Flexercell 5000柔性基底加载系统,以0.25 Hz拉伸频率、10%拉伸幅度进行每天2 h应力加载,连续加载2、4、6 d;1 d拉伸组:细胞置于Flexercell 5000柔性基底加载系统,以1 Hz拉伸频率、15%拉伸幅度拉伸1 h,23 h后收集细胞;对照组:细胞常规培养1、2、4、6 d。培养期间于倒置相差显微镜下观察细胞生长情况。采用流式细胞仪检测细胞增殖情况,Western blot检测自身抗原DNA依赖蛋白激酶催化亚基(Ku/the catalytic subunit of DNAdependent protein kinase,DNA-PKcs)、Mi-2(reconfigurable components deacetylase complexes of NuRD)、U1-70(A part of ATP-dependent DNA helicaseⅡ)、组氨酰-tRNA合成酶(histidyl tRNA synthetase,HRS)表达情况。结果经培养后,1 d拉伸组可见脱落细胞,对照组1 d时无细胞脱落;2 d拉伸组细胞增殖较对照组2 d时明显;4 d拉伸组细胞出现分化,6 d拉伸组细胞部分融合,与对照组4、6 d时情况一致。1 d拉伸组细胞经单次拉伸后出现凋亡,相对DNA增殖指数(relative DNA proliferation index,DPI)与对照组1 d时比较,差异无统计学意义(t=0.346,P=0.747)。经周期性拉伸后,2、4 d拉伸组DPI较对照组2、4 d时显著提高(P<0.05),6 d拉伸组与对照组6 d时比较差异无统计学意义(t=1.191,P=0.303)。2 d拉伸组DNA-PKcs、Mi-2、HRS和U1-70蛋白相对表达量均较对照组2 d时明显降低(P<0.05);4 d拉伸组与对照组4 d时比较差异均无统计学意义(P>0.05)。4 d拉伸组各抗原蛋白相对表达量均较2 d拉伸组显著增加(P<0.05),而对照组4 d时均较2 d时显著降低(P<0.05)。结论短期力学刺激可以抑制成肌细胞自身抗原表达,但随时间延长,细胞分化融合以及对力学刺激的�
- 陈荣刘幸卉黄维一曾慧君史丹丹曹标廖华
- 关键词：成肌细胞自身抗原特发性炎性肌病
- 损伤骨骼肌组织内CD8^+T细胞的功能特性被引量：2
- 2012年
- 目的分析骨骼肌损伤后CD8+T细胞的渗出及其功能特性。方法机械挤压法制备小鼠胫骨前肌(TA)损伤模型。免疫组化、免疫荧光检测损伤肌组织内CD8+T细胞的渗出及其可能的CTL功能。结果 HE染色证实机械挤压引发显著的TA肌纤维坏死、退变和再生。损伤肌组织内出现广泛的炎性渗出,损伤后7d(再生初期)可见较多的CD8+T细胞,少量CD8+T细胞共表达Perforin以及IFN-γ。结论与慢性肌炎的免疫反应相似,急性损伤同样会引发CD8a+T细胞的渗出、活化并具备CTL功能。但这种活化的CD8+CTL细胞仅短暂出现于肌组织的再生初期。
- 冯利强曾慧君刘幸卉陈荣黄维一廖华
- 关键词：CD8骨骼肌损伤炎性反应
- 不同形貌羟基磷灰石微粒对体外RAW264.7细胞凋亡的影响被引量：1
- 2015年
- 目的 探讨不同形貌羟基磷灰石（HA）微粒对体外RAW264.7细胞凋亡的影响. 方法 采用水热合成及pH调节的方法获取微棒与微球HA微粒.实验分为3组：空白对照组、微棒HA组和微球HA组.将微棒HA与微球HA分别与RAW264.7细胞共培养24 h后,应用细胞乳酸脱氢酶分泌量检测HA微粒对细胞毒性的影响,茜素红染色检测细胞-材料的相互关系,Hoechst凋亡染色及Western blot分析HA微粒对细胞凋亡的影响.结果 共培养24 h,除微棒HA微粒浓度为200 μg/mL时对RAW264.7细胞活性有轻微影响外,在其他浓度下微棒HA与微球HA均具有良好的生物相容性.微棒HA组茜素红染色强度（20.28 ±2.23）显著高于微球HA组（11.72±0.82）,差异有统计学意义（P＜0.05）.微棒HA组与微球HA组的阳性凋亡细胞荧光强度（0.59±0.08、0.55 ±0.03）高于空白对照组（0.46 ±0.07）,微棒HA组的阳性凋亡细胞荧光强度义高于微球HA组,差异均有统计学意义（P＜0.05）.微棒HA组Bcl-2蛋白表达（0.05 ±0.01）显著低于空白对照组（0.25±0.05）与微球HA组（0.21 ±0.04）,差异均有统计学意义（P＜0.05）.微棒HA组与微球HA组Caspase-3蛋白表达（0.32 ±0.04、0.27 ±0.06）较空白对照组（0.13±0.03）上调,差异均有统计学意义（P＜0.05）. 结论 相对于微球HA微粒,微棒HA微粒与RAW264.7细胞发生了更为密切的接触或内吞,从而诱发了更高程度的细胞损伤,表现为较高的细胞凋亡水平.
- 曾慧君术蓉刘幸卉史丹丹曹标欧阳钧廖华
- 关键词：羟基磷灰石类微粒体细胞凋亡
- Notexin对小鼠体内CD8＋T淋巴细胞活性的干扰作用被引量：1
- 2014年
- 目的探讨肌肉注射Notexin是否影响C57BL/6小鼠骨骼肌引流淋巴结内的外源性CD8+T细胞(OT-I细胞)的活性和增殖。方法分别采用Notexin注射或机械挤压法制备B6小鼠的胫骨前肌(TA)急性肌损伤模型,并获得性转移(adoptive transfer,i.v.)OVA特异的OT-I细胞(CFSE标记),随后肌注可溶性OVA蛋白。收集损伤侧TA引流淋巴结(腘、腹股沟淋巴结),流式分析OT-I细胞的增殖程度。OVA静脉内注射免疫B6鼠,收集激活的脾脏树突状细胞(cDCs),与CFSE标记的OT-I细胞体外联合培养,并添加不同稀释度的Notexin,流式检测OT-I细胞的活性和增殖。结果 CFSE的荧光递减结果证实,机械挤压损伤鼠TA引流淋巴结内OT-I细胞迅速活化增殖,但Notexin诱发的肌损伤小鼠引流淋巴结内OT-I细胞在4 d时无增殖反应,7 d的增殖率与非注射组无显著差异。与活化的cDCs细胞共培养的OT-I细胞活性良好,增殖显著,但即使添加高度稀释(1:1000)的Notexin也会严重干扰OT-I细胞的活性和增殖。结论肌内注射Notexin注射将干扰CD8+T细胞的活性,这表明蛇毒血清诱导的骨骼肌损伤模型不适用于肌损伤诱发的T细胞功能改变的相关研究。
- 马平术蓉刘幸卉史丹丹曾慧君曹标廖华
- 关键词：肌损伤
- 神经生长因子诱导后的神经元样PC12细胞与成肌干细胞共培养的实验研究
- 2012年
- 目的探讨神经元样PC12细胞对C3H小鼠成肌干细胞C2C12增殖与分化的影响。方法利用Transwell建立PC12细胞和C2C12细胞共培养体系，实验分为3组：空白对照组：C2C12细胞单独培养；实验组：C2C12细胞与已分化的PC12细胞共培养；阴性对照组：C2C12细胞与未分化的PC12细胞共培养。免疫荧光染色鉴定神经生长因子（NGF）对PC12细胞的促分化效应；流式细胞仪检测共培养条件下C2C12细胞的增殖情况；逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）和实时荧光定量核酸扩增（qPCR）检测与PC12细胞共培养3、7d后C2C12细胞生肌素、结蛋白基因的表达。结果体外条件下，NGF诱导PC12细胞呈现神经元样特征：具有细长的细胞突起，并阳性表达微管相关蛋白-2。流式细胞检测证实：已经分化的PC12细胞抑制C2C12细胞的增殖。实验组DNA合成前期的C2C12细胞所占百分比（77．2％±0．4％）较空白对照组（71．0％±0．6％）和阴性对照组（70。8％±0．8％）高，反应增殖活力的增殖指数（22．8％±0．4％）较空白对照组（29．0％±0．6％）和阴性对照组（29．2％±0．8％）低，差异均有统计学意义（P〈0．05）。实验组C2C12细胞生肌素、结蛋白基因的表达高于同一培养时间其他组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论神经化的PC12细胞抑制C2C12细胞的增殖，但促进其分化。
- 刘幸卉黄维一陈荣冯利强廖华余磊曾慧君
- 关键词：成肌细胞PC12细胞细胞增殖细胞分化
- 不同频率周期性应力加载对体外多层肌管极性及分化的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨不同频率的周期性应力加载对体外培养多层肌管极性与分化的影响,筛选优化的肌组织体外应力加载培养条件。方法体外培养C2C12成肌细胞于Sylgard 184铸型凹槽诱导分化形成多层肌管组织,采用自制体外细胞拉伸仪,对培养并分化的肌管进行间歇性应力加载:加载幅度10%,加载频率分别为0(A组)、0.25(B组)、0.50(C组)、1.00 Hz(D组),加载时间3次/d,每次1 h。连续加载5、7、10 d时,观察各组肌管形态;RT-PCR和实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,QRT-PCR)分析检测成肌相关基因成肌分化抗原(myogenic differentiationantigen,MyoD)、肌细胞生成素(Myogenin)、结蛋白(Desmin)、肌球重链蛋白(myosin heavy chain,MyHC)mRNA的表达差异。结果倒置相差显微镜观察示,应力加载促进各组肌管的极性融合及数量增加,其中B组加载培养7 d时,多层肌管排列紧密,极性显著。加载条件能促进成肌相关基因mRNA的表达:组内随加载时间延长,各组MyoD的mRNA表达逐渐下降,7、10 d与5 d比较差异均有统计学意义(P<0.05);Myogenin、Desmin、MyHC的mRNA表达呈先升高后降低趋势,以7 d表达量最高;B组除7 d与10 d Desmin的mRNA表达比较差异无统计学意义(P>0.05)外,其余各时间点比较差异均有统计学意义(P<0.05)。同时间点随加载频率增加,MyoD、Myogenin、Desmin、MyHC的mRNA表达呈先升高后降低趋势,以B组表达量最高;除5 d B、C组Desmin和10 d A、B组MyHC的mRNA表达比较差异无统计学意义(P>0.05)外,其余各组与B组各相关基因mRNA表达比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论低频(0.25 Hz)、适时(7 d)的周期性应力加载有利于生长于Sylgard 184弹性材料表面的多层肌管极性分化,但随着应力加载时间延长,肌管的老化加速。
- 黄维一刘幸卉陈荣冯利强廖华余磊曾慧君
- 关键词：分化肌管体外实验
- 力学信号的拮抗剂或激动剂对体外培养的C2C12成肌细胞自身抗原相关因子表达的影响被引量：1
- 2014年
- 目的探讨力学信号的拮抗剂或激动剂对体外培养的C2C12成肌细胞自身抗原表达的影响。方法根据不同的处理方法将C2C12细胞分成对照组、EGTA、A23187、钙调蛋白抑制剂calmidazolium chloride、钙调蛋白(calmodulin)、一氧化氮合成酶抑制剂NG-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)、硝普钠(SNP)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-2抑制剂1、重组肝细胞生长因子(HGF)、抗HGF抗体、肝细胞生长因子受体C-met和抗C-met处理组。用Western blot法检测不同处理条件下NuRD脱乙酰酶复合物可重构成分(Mi-2)、组氨酰-tRNA合成酶(HRS)、DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)和Ku-70蛋白的表达变化。结果与对照组相比,A23187、calmodulin组、SNP、重组HGF组、重组C-met处理后,自身抗原表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),EGTA、calmidazolium chloride、L-NAME、抗HGF兔多克隆抗体、抗C-met兔多克隆抗体处理后,自身抗原蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。MMP-2组的自身抗原蛋白水平表达与对照组相比无显著性差异(P>0.05)。结论细胞外钙离子和钙调蛋白、L-NAME和SNP、HGF、C-met参与介导成肌细胞自身抗原的表达。
- 刘幸卉陈荣曾慧君史丹丹曹标廖华
- 关键词：自身抗原力学信号
