徐秋芳
- 作品数：42 被引量：97H指数：5
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项江苏省农业科技自主创新基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学航空宇航科学技术交通运输工程更多>>
- 水稻幼苗酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定被引量：13
- 2018年
- 为解析水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)与寄主水稻的互作机制,筛选水稻中与病毒互作的蛋白,以易感RBSDV的水稻品种日本晴3~4叶期的组织样品为材料,通过提取总RNA后分离获得m RNA,合成cDNA双链后连入pDONR222载体,获得初级文库。初级文库的滴度为6.6×10~6CFU/mL,库容为1.9×10~7CFU,重组率>95%,插入片段平均长度>1 kb。提取初级文库质粒,通过重组反应将水稻cDNA文库转移至pGADT7-DEST载体,构建获得水稻幼苗的酵母双杂交cDNA文库,文库的滴度为4.5×10~6CFU/mL,库容为1.3×10~7CFU,重组率>95%,cDNA插入片段平均长度>1 kb。采用RBSDV候选基因进行文库筛选,结果表明所构建的酵母文库可用于筛选病毒互作蛋白。
- 朱佳慧徐秋芳袁平平倪海平周益军蒋选利杜何为
- 关键词：水稻酵母双杂交水稻黑条矮缩病毒滴度库容重组率
- 利用RT-LAMP方法快速检测飞虱体内水稻黑条矮缩病毒
- 本发明提供了一种飞虱体内水稻黑条矮缩病毒的快速检测技术及其在病害诊断和预测预报上的应用方法。利用这一方法可以排除南方水稻黑条矮缩病的干扰，快速鉴定出飞虱体内是否携带水稻黑条矮缩病毒，进而采取针对性的防治策略，减少病害带来...
- 周彤周益军杜琳琳兰莹徐秋芳孙枫范永坚
- 一种调控昆虫体内病毒增殖的方法
- 本发明公开了一种调控昆虫体内病毒增殖的方法，即通过靶向调控昆虫体内3，5‑二磷酸磷脂酰肌醇(PI(3，5)P<Sub>2</Sub>)的含量控制昆虫体内病毒增殖。通过显微注射等方式施加PI(3，5)P<Sub>2</Su...
- 徐秋芳王海涛董岩
- 利用RT-LAMP方法快速检测植株中南方水稻黑条矮缩病毒
- 本发明提供了一种水稻和玉米等植株上南方水稻黑条矮缩病毒的快速检测技术及其在病害诊断上的应用方法。利用这一方法可以排除水稻黑条矮缩病的干扰，快速鉴定出南方水稻黑条矮缩病毒植株样品，进而采取针对性的防治策略，减少病害带来的损...
- 周彤周益军杜琳琳兰莹徐秋芳孙枫程兆榜
- 灰飞虱actin基因的克隆及原核表达
- 2014年
- 通过生物信息学分析获得了灰飞虱actin基因的序列信息,采用RT-PCR方法从灰飞虱中克隆了actin基因的开放阅读框,并将其在大肠杆菌BL21(DE3)中进行原核表达。序列分析结果表明,该基因开放阅读框长1 131 bp,编码377个氨基酸,蛋白质理论分子量为4.17×104,理论等电点为5.28。将此序列登录GenBank数据库,登录号为KC683802。序列比对发现,该基因序列在多个物种间保守,与褐飞虱actin基因的同源性高达95%。构建的原核表达载体pET32a-actin,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行获得表达,SDS-PAGE分析结果表明,表达的蛋白质主要存在于包涵体中。
- 陈晴晴李艳舞倪海平徐秋芳张金凤李硕周益军
- 关键词：灰飞虱肌动蛋白基因克隆原核表达
- 灰飞虱蛋白与RBSDV P10的互作分析
- 黑条矮缩病毒(rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)为呼肠孤病毒科(Reoviri-dae)斐济病毒属(Fijivirus)的成员,可侵染水稻、玉米等禾本科植物,引起水稻黑条矮缩病、...
- 徐秋芳周益军陈晴晴倪海平李硕
- 关键词：灰飞虱酵母双杂交多克隆抗体
- 利用RT-LAMP方法快速检测植株中南方水稻黑条矮缩病毒
- 本发明提供了一种水稻和玉米等植株上南方水稻黑条矮缩病毒的快速检测技术及其在病害诊断上的应用方法。利用这一方法可以排除水稻黑条矮缩病的干扰，快速鉴定出南方水稻黑条矮缩病毒植株样品，进而采取针对性的防治策略，减少病害带来的损...
- 周彤周益军杜琳琳兰莹徐秋芳孙枫程兆榜
- 一种昆虫解剖皿的制备方法及应用
- 一种昆虫解剖皿的制备方法及其应用，是将环氧树脂AB混合型水晶软胶的A胶和B胶按照重量3∶1的比例混合，搅拌均匀后倒入洁净的培养皿中，然后将培养皿放入真空泵中去除气泡，水平静止放置，待胶体凝固后得到昆虫解剖皿。采用本发明方...
- 徐秋芳吴薇周益军
- 一种快速检测单头灰飞虱体内水稻黑条矮缩病毒的方法
- 本发明提供一种快速检测单头灰飞虱体内水稻黑条矮缩病毒的方法，属于农业科学技术领域。水稻黑条矮缩病毒主要通过介体昆虫灰飞虱进行传播。采用常规RT-PCR方法检测单头灰飞虱体内水稻黑条矮缩病毒需提取单头灰飞虱RNA，之后再进...
- 徐秋芳周益军周彤季英华程兆榜
- 一种用RBSDV粗提液进行病毒覆盖蛋白结合实验的方法
- 本发明公开了一种用RBSDV粗提液进行病毒覆盖蛋白结合实验的方法。本发明的实质是通过研磨RBSDV病样释放出病毒粒子，离心获得病毒的粗提液，以RBSDV的粗提液而不是提纯的病毒粒子进行病毒覆盖蛋白结合实验。本发明这个方法...
- 徐秋芳陈晴晴周益军倪海平
