徐晓娟
- 作品数：64 被引量：233H指数：11
- 供职机构：华中农业大学更多>>
- 发文基金：湖北省科技攻关计划国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学医药卫生生物学更多>>
- RNA干扰抗A型流感病毒的研究
- 本研究选用流感病毒中高度保守的NP和M2基因作为RNA干扰的靶基因,针对NP基因保守区段设计了2对siRNA(NP749,NP1383),针对M2基因保守区段设计了3对siRNA (M48,M754,M949),通过载体...
- 周红波金梅林喻正军徐晓娟彭亚平刘金林伍海芽刘虎陈焕春
- 快速乳胶凝集试验检测禽流感病毒亚型H5N1血清抗体的研究
- 快速的检测禽流感亚型H5N1血清抗体的乳胶凝集试验被建立和评价.9-11日龄的SPF(special pathogen free)鸡胚增殖的禽流感病毒(Aian Influence Virus,AIV)灭活后,用超速离心...
- 徐晓娟金梅林喻正军李红超邱德新陈焕春
- 关键词：乳胶凝集试验禽流感抗体检测血清抗体
- 文献传递
- 副猪嗜血杆菌Apd-ELISA抗体检测试剂盒的制备和初步应用被引量：3
- 2020年
- 旨在对副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)的黏附素蛋白(autotransporter passenger domain,Apd)ELISA抗体检测方法进行参数优化、临界值确定和应用评价,获得性能稳定的副猪嗜血杆菌病抗体检测试剂盒。首先通过猪的免疫攻毒试验获得HPS阴、阳性对照血清,优化Apd-ELISA的反应参数;然后用背景确认的阴、阳性血清确定其临界值,并对封闭液及酶标板的包装方式进行选择;最后用Apd-ELISA试剂盒对临床样品进行检测并与荷兰Biocheck的OppA-ELISA试剂盒进行比较。结果表明,抗原包被质量浓度为0.5μg·mL^-1、被检血清以1:200倍稀释后反应45 min以及二抗稀释度为1:15000时,Apd-ELISA的反应背景下降,区分度提高。根据背景确认的27份阳性和40份阴性血清的OD630 nm值以及临界值计算公式(S-N)/(P-N),得到Apd-ELISA的阴阳性临界值是0.33。证实用封闭液K封闭和真空包装的酶标板可以在50℃保存4 d(相当于在4℃保存22个月)。用Apd-ELISA试剂盒检测1179份临床血清,表明母猪、后备和育肥猪以及仔猪的HPS血清阳性率分别为83.76%、61.09%和27.48%。与荷兰的Biocheck试剂盒进行比较,发现Apd-ELISA与Biocheck试剂盒(OppA-ELISA)对HPS临床阴性血清和疫苗免疫血清检测的符合率为100%,对HPS临床阳性血清的符合率仅为4.76%(6/126)。然而,Apd-ELISA与OppA Western blot的阳性符合率可达到73.02%(92/126)。本研究获得了能有效区分HPS阴、阳性血清和稳定保存的Apd-ELISA抗体检测试剂盒,可用于HPS灭活疫苗免疫后的抗体检测和副猪嗜血杆菌病的血清抗体检测。
- 田杨刘云宝马辉潘其聪肖静陈焕春蔡旭旺徐晓娟
- 关键词：副猪嗜血杆菌ELISA试剂盒抗体检测
- 论我国动物传染病学课程教学存在的问题及其对策被引量：12
- 2010年
- 动物传染病学是动物医学专业本科专业教学中的一门核心课程。保障动物传染病学课程的教学质量,提高动物医学专业学生在以后动物传染病防控中的综合能力,直接关系到我国兽医人才队伍建设和未来动物传染病防控的水平。在对我国当前动物传染病学课程教学中面临的形势与存在问题分析的基础上,提出了应对这些问题的主要对策。
- 曹胜波陈焕春金梅林吴斌蔡旭旺徐晓娟周红波张安定
- 关键词：动物传染病教学
- 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌apxⅡ^-/Amp^r突变株的构建被引量：5
- 2004年
- 根据已发表的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清5型核苷酸序列设计并合成了一对引物,从自行分离的APP菌株PCR扩增apxⅡCA基因,将该片段与pBluescriptSK(+)载体连接,得到质粒pSK CA。另外,从质粒pIC neo中得到的Ampr基因经XbaⅠ酶切消化后,克隆到pSK CA中的XbaⅠ位点,获得了重组转移质粒pSK CAmpr。pSK CAmprDNA通过电转化导入亲本菌,电转化后的产物涂布于TM平板,可获得突变株。提取突变株和亲本菌基因组DNA,用PCR检测含有apxⅡC基因的胸膜肺炎放线杆菌染色体区域。从突变株基因组DNA扩增得到的一条PCRDNA片段比从亲本菌基因组DNA扩增得到的一条DNA片段大1 3kb,增大的片段与所插入的Ampr基因大小相符合。用合成的Ampr基因引物从突变株基因组DNA中也能扩增到一条1 3kb的特异性DNA片段。同时South ernblot鉴定有特异性带。这表明我们所构建的突变株是成功的。测定了突变株的遗传稳定性及突变株对动物的安全性,为进一步研究用其它报告基因置换Ampr基因后,研制单基因工程疫苗及以APP毒力缺失突变菌株为载体,表达外源基因的APP基因工程菌的研究奠定了坚实的基础。
- 贝为成何启盖陈焕春徐晓娟洪文洲肖少波宋云峰刘建杰
- 关键词：传染性胸膜肺炎放线杆菌基因构建
- 乳胶凝集试验检测H5亚型禽流感病毒血凝素抗体的研究
- 利用原核表达并经过纯化的H5亚型禽流感病毒的血凝素蛋白做为抗原,经碳二亚胺(EDAC)将表达产物和羧基化的乳胶共价偶联,并对偶联乳胶的蛋白量和偶联时间进行合理选择,建立H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白乳胶凝集试验的方法。临床...
- 喻正军金梅林徐晓娟张瑞华陈焕春
- 文献传递
- 鸡沙门菌SifA蛋白在制备用于检测鸡沙门菌抗体的ELISA抗体检测试剂盒中的应用
- 本发明公开了一种鸡沙门菌SifA蛋白在制备用于检测鸡沙门菌抗体的ELISA抗体检测试剂盒中的应用，本发明表达并纯化了鸡沙门菌SifA蛋白作为ELISA的包被抗原，对试剂盒工作程序进行了优化，用SPF鸡制备了鸡白痢沙门菌、...
- 蔡旭旺高东阳于江旭田艳红焦宇洲王迪轩徐晓娟
- 文献传递
- 细胞致死膨胀毒素的结构,功能及应用前景被引量：1
- 2012年
- 细胞致死膨胀毒素（Cytolethaldistendingtoxin，CDT）是细菌毒素家族最新发现的一员^[1]，它是目前发现的唯一能够引起真核细胞分裂前期和静止期DNA双链断裂的细菌毒素，可导致真核细胞周期的不可逆性阻滞或者靶细胞凋亡^[2-4]。该毒素是由Johnson和Lior首先发现于大肠杆菌（Eschenchiacoli）的培养液上清，
- 陈西申果张舒吴玉丛徐晓娟蔡旭旺
- 关键词：细菌毒素细胞分裂DNA双链断裂细胞凋亡
- 禽流感病毒A/duck/Hubei/W1/2004(H9N2)的基因组序列分析及其分子进化
- 合成8对引物,通过RT-PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction)扩增了禽流感病毒A/duck/Hubei/W1/2004(H9N2)(Dk/Hub/W1/0...
- 徐晓娟徐高原周红波宋云峰金梅林陈焕春
- 华中地区鸡源沙门菌分离鉴定及耐药性分析被引量：22
- 2019年
- 为了探明华中地区种鸡场沙门菌(Salmonella)的优势血清型和耐药情况,本研究从湖北、河南、湖南等省市22个规模化鸡场采集病鸡、死胚及弱雏组织样品3 724份,通过分离培养、生化试验、PCR鉴定及血清型试验确定分离菌种属及其血清型,并采用Kirby-Bauer法对分离菌株进行了耐药性分析。结果显示,本试验从3 724份病料中共分离鉴定出124株沙门菌,其中79株为D群肠炎沙门菌(63.71%,79/124),34株为D群鸡白痢沙门菌(27.42%,34/124),8株为B群鼠伤寒沙门菌(6.45%,8/124),有3株沙门菌未能确定血清型。O抗原鉴定79株肠炎沙门菌和34株鸡白痢沙门菌为O9,8株鼠伤寒沙门菌为O4。H抗原鉴定79株肠炎沙门菌为Hg,m,8株鼠伤寒沙门菌为Hi。药敏试验结果显示,124株分离菌株对萘啶酸、氨苄青霉素、四环素和多西环素耐药率分别为95.97%(119/124)、91.94%(114/124)、57.26%(71/124)和70.16%(87/124);对复方新诺明和红霉素耐药率分别为25.81%(32/124)和12.10%(15/124);对氯霉素、庆大霉素、头孢噻肟和卡那霉素耐药率分别为6.45%(8/124)、1.61%(2/124)、1.61%(2/124)和0.81%(1/124);对左氧氟沙星、阿米卡星和多黏菌素B完全敏感。99.19%(123/124)的分离株至少对一种药物耐药,87.10%(108/124)的分离株表现多重耐药。本研究为华中地区养鸡场沙门菌的诊断及防控提供了数据支撑。
- 王迪轩高东阳张天姿刘维周祖涛徐晓娟蔡旭旺
- 关键词：沙门菌血清型耐药性
