张晋平
- 作品数:3 被引量:6H指数:1
- 供职机构:重庆医科大学实验动物中心更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- TRAIL在妊娠小鼠子宫内膜蜕膜化进程中的功能研究
- 胚胎着床是胎生哺乳动物及人类生殖的重要环节,胚胎着床的关键步骤是胚胎滋养层细胞对子宫内膜的侵入。滋养层细胞与子宫内膜上皮细胞和基质细胞之间的“对话”精确地调节滋养层细胞的增殖分化和子宫内膜的蜕膜化。蜕膜是子宫内膜基质受蜕...
- 张晋平
- 关键词:TRAIL子宫内膜蜕膜化
- 文献传递
- 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)基因抑制小鼠子宫基质细胞的蜕膜化被引量:6
- 2010年
- 为了观察肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因对体外培养的小鼠蜕膜基质细胞增殖及凋亡的作用,探讨TRAIL对小鼠子宫蜕膜化进程的影响,构建TRAIL过表达及干扰质粒,转染小鼠基质细胞后诱导蜕膜化发生.转染72h后,应用半定量RT-PCR和Western blotting检测蜕膜基质细胞中TRAILmRNA和蛋白质的表达情况、MTT法观察蜕膜基质细胞的生长和增殖能力、流式细胞术检测蜕膜基质细胞的细胞周期分布情况和凋亡率.经酶切和核苷酸测序证实,TRAIL基因正确克隆入真核表达载体且能够上调TRAIL的表达,干扰质粒能有效地抑制TRAIL基因的表达.TRAIL过表达和RNA干扰的结果表明:TRAIL具有将蜕膜基质细胞阻滞在G0/G1期、抑制蜕膜基质细胞增殖并促使其凋亡的功效,提示TRAIL可能参与调节胚胎植入后基质细胞的有序蜕膜化进程.
- 张晋平罗文萍张倩彭洪英谭冬梅王应雄谭毅
- 关键词:蜕膜化
- 小鼠MK基因siRNA重组腺病毒载体的构建及鉴定被引量:1
- 2010年
- 目的:构建小鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的死亡受体(Mouse killer,MK)基因干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA)重组腺病毒并在小鼠子宫基质细胞中鉴定其干扰作用。方法:人工合成靶向MK的siRNA干扰序列,将其克隆到穿梭载体pSES-HUS上,并与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在BJ5183细菌中进行同源重组,得到pAdeasy-SES-HUS-MKsiRNA,在HEK293细胞中包装并扩增腺病毒颗粒。用纯化后的腺病毒混合液感染原代培养的小鼠子宫内膜基质细胞,RT-PCR及Western Blot检测基质细胞中MK的mRNA及蛋白表达水平。结果:Adeasy-SES-HUS-MKsiRNA混合液均效价为6.8×10^(11)pfu/ml,感染原代培养的小鼠子宫内膜基质细胞48 h后,MK的mRNA及蛋白水平均显著下调。结论:构建的MK干扰表达腺病毒能有效地抑制MK基因的表达,为进一步研究MK在小鼠子宫基质细胞的功能提供了有效的工具。
- 杨根岭张晋平徐倩谭冬梅赖国旗谭毅
- 关键词:MOUSERNA干扰重组腺病毒