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DNA疫苗的作用机制及新型免疫策略的研究进展被引量：3: 2007年; 疫苗是预防和控制严重传染病的重要手段,将基因工程用于疫苗生产已经成为生物技术的热点内容之一。治疗性基因工程疫苗是近些年研究的重点,并迅速从治疗传染性疾病的研究扩展到非传染性疾病的研究,如治疗性乙肝疫苗、治疗性肿瘤疫苗等。本文针对这一热点阐述基因工程DNA疫苗的作用机制及新型免疫策略研究的进展。; 颜凯张倩赵宝华; 关键词：DNA疫苗

真菌来源的组织蛋白酶B抑制剂F04ZA-1203A的研究: 2009年; 目的组织蛋白酶B(cathepsin B,CatB)是一种主要存在于溶酶体的半胱氨酸蛋白水解酶,具有广谱蛋白水解酶活性,能够降解多种基底膜蛋白,为癌细胞的转移打开通道,促进肿瘤细胞向深部组织浸润。因此,研究CatB抑制剂在抗肿瘤转移方面具有潜在的应用价值。本研究筛选CatB抑制剂,发现潜在的抗癌药物先导化合物。方法利用自建的快速、高效的组织蛋白酶B抑制剂的高通量筛选方法,从大量真菌菌库及其来源的代谢产物中筛选能够产生CatB抑制活性产物的菌株,对其发酵产物进行有机溶剂提取、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱及HPLC制备分离获得活性化合物,经紫外、质谱、核磁等理化数据的分析进行结构鉴定。结果筛选分离得到一个活性化合物F04ZA-1203A,结构解析确定了其为已知化合物thielavin B,该化合物对CatB的抑制IC50为1.85μg/ml。结论F04ZA-1203A(thielavin B)对CatB有强的抑制活性,国内外未见报道。; 郝伟丽林洁郑智慧李业英张倩范玉玲石英崔晓兰赵宝华路新华张华

我国家畜猝死症的研究进展被引量：6: 2007年; 家畜猝死症又称暴死症或急性死亡综合症,它的病因是多方面的,但普遍认为魏氏梭菌感染或与其他病原混合感染是其致病的主要原因。目前,国外对魏氏梭菌外毒素的结构和生物活性研究比较透彻,对魏氏梭菌外毒素的防治研究主要集中在免疫预防方面;国内的研究工作主要是借鉴国外的研究技术和方法,从基因水平上研究了魏氏梭菌主要致死性毒素保护性抗原基因的克隆和表达。综述了我国家畜猝死症的研究进展。; 张倩高志清刘晶芝赵宝华; 关键词：猝死症魏氏梭菌发病机理

基于哺乳动物单杂交技术ERα调节剂高通量筛选模型的建立及应用被引量：1: 2009年; 雌激素受体α(Estrogen receptor α,ERα)是一种类固醇核受体,在机体的多种生理功能中起关键作用。为了筛选新的ERα调节剂,本研究建立一个基于哺乳动物单杂交的报告基因技术的高通量ERα调节剂筛选模型。利用RT-PCR技术从脂肪组织总RNA中扩增ERα配体结合区(Ligand binding domain,ERαLBD)基因序列,并插入含GAL4DNA结合域的pBIND-GAL4表达质粒构建pBIND-GAL4-ERα(LBD)的嵌合表达质粒。该质粒与本室已构建好的含GAL4响应元件和荧光素酶的报告质粒pGL3-GAL4共转染,通过测定荧光素酶的活性评价ER调节剂的转录调剂的活性。经过多种条件优化,激动剂阳性药对照雌二醇可以剂量依赖地诱导荧光素酶的表达,最大上调倍增数可达28.1倍,EC50为0.17μmol/L。拮抗剂阳性对照它莫昔芬可以有效地拮抗雌二醇的活性,最大下调倍数为6.3倍,EC50为0.1μmol/L。该筛选模型可微量化于384孔板,且Z'因子均大于0.5。利用该模型从2000多个微生物和植物来源的天然产物以及合成化合物中筛选得到4个ERα激动剂。该模型灵敏、稳定,可以快速进行多种来源的ERα调节剂的筛选和活性评价。; 张倩水小溪范玉玲郝伟丽郑智慧路新华赵宝华张华贺建功; 关键词：ERΑ 激动剂拮抗剂共转染高通量筛选

致病性鸡大肠杆菌pilA基因和外膜蛋白C基因的克隆、表达及其免疫原性被引量：7: 2008年; 根据GenBank公布的致病性鸡大肠杆菌的Ⅰ型菌毛pilA基因和外膜蛋白C基因序列,分别设计了两对引物,并以分离的致病性鸡大肠杆菌基因组为模板,经PCR特异性扩增出pilA基因和ompC基因,基因产物大小为别为549bp和1104bp,与GenBank报道的参考菌株的两个基因序列的同源性为高达98.18%和97.28%。将扩增得到的两个基因分别定向克隆到原核表达载体pET-28a中,得到两个重组质粒pETpilA和pETompC,转化大肠杆菌BL21(DE3)中,得到重组菌株BL21(pETpilA)和BL21(pETompC),经IPTG诱导后,SDS-PAGE分析分别可见表达的20kD和40.9kD的特异条带;Westernblotting结果表明,两种蛋白可与抗体发生特异性结合,说明其具有良好的免疫原性。将表达的菌毛蛋白和外膜蛋白的菌株分别制成基因工程疫苗,免疫小鼠后,具有很好的保护能力,表明这两株基因工程菌株有望作为鸡致病性大肠杆菌基因工程疫苗的候选生产菌株。; 于珊张倩水小溪于宙亮赵宝华; 关键词：鸡致病性大肠杆菌 I型菌毛外膜蛋白免疫原性

ERα调节剂高通量筛选模型的建立: 目的：建立一个基于哺乳动物单杂交的报告基因的细胞瞬时转染的ER调节剂高通量筛选模型。方法：利用RT-PCR技术从脂肪的总RNA中扩增Erα基因配体结合区(ligand bingding domain Erα ...; 张倩郑智慧路新华范玉玲水小溪赵宝华张华贺建功; 关键词：高通量筛选药物筛选调节活性; 文献传递

ERα调节剂高通量筛选模型的建立: 目的建立一个基于哺乳动物单杂交的报告基因的细胞瞬时转染的ER调节剂高通量筛选模型。方法利用RT-PCR技术从脂肪的总RNA中扩增ERα基因配体结合区（ligand bingding domain ERα LBD）序列,构...; 张倩郑智慧路新华范玉玲水小溪赵宝华张华贺建功; 关键词：ERΑ 激动剂拮抗剂共转染高通量筛选; 文献传递

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张倩