常彩琴
- 作品数:55 被引量:130H指数:6
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- 鼠抗人转铁蛋白抗体轻链与重链可变区基因库的制备
- 2001年
- 以纯化的人转铁蛋白免疫小鼠,测其血清效价,合乎要求后杀鼠取脾脏并以异硫氰酸胍和酚的混合溶液将其匀浆,再以氯仿抽提、异丙醇沉淀和乙醇洗涤,所得总RNA以oligo(dT)纤维素离心柱分离纯化制备mRNA,使mRNA达到cDNA合成所需的浓度后,反转录制备出cDNA,在合成的cDNA中加入轻、重链引物,扩增制备出小鼠抗人转铁蛋白抗体的轻、重链可变区基因库。
- 李兆隆郭红玲常彩琴涂政肖卫民王明鑫王俭
- 关键词:基因工程抗体小鼠脾脏总RNA提取
- 6种特殊生物检材的DNA提取被引量:6
- 2002年
- 郭燕霞刘开会邱宁常彩琴王坚季安全
- 关键词:生物检材DNA检验案例分析
- 鼠抗人转铁蛋白单链抗体基因的表达被引量:1
- 2002年
- 目的 制备抗人转铁蛋白单链抗体。方法 拼装好并带有酶切位点粘性末端的鼠抗人转铁蛋白的单链抗体基因经凝胶电泳定量后,同载体pCANTAB 5E连接,以其转化E.coli TG1细胞,经辅助噬菌体M13K07挽救构建噬菌体抗体表面呈现文库、抗原包被固相材料富集选择阳性重组噬菌体克隆(Panning)。感染能产生可溶抗体片段的大肠杆菌菌株E.coli HB2151,制备可溶抗体,以Anti-E末端抗体进行Western blot、ELISA检验和分子量测定。结果 人转铁蛋白的单链抗体基因成功表达。结论 用基因工程抗体技术制备抗体是可行的。
- 李兆隆郭红玲常彩琴肖卫民涂政王明鑫王俭
- 关键词:噬菌体抗体库基因表达单链抗体基因法医物证
- 检验人精浆特异蛋白P_(30)免疫胶体金试剂条的研制被引量:10
- 2002年
- 目的制备用于检验人精浆特异蛋白P30—主要是来自法医学案件的免疫胶体金层析试剂条。方法选取针对不同抗原决定簇的抗P30单克隆抗体细胞株,并制备其小鼠腹水,分离纯化单克隆抗体。制备胶体金并以纯化抗体包被,制成免疫胶体金,以免疫胶体金浸泡玻璃纤维。选取适宜的硝酸纤维素膜并于其上不同位置以未金标的另一株P30单克隆抗体和羊抗鼠IgG包被。搭建试剂条并检测其灵敏度和特异性。结果所制成的试剂条灵敏度至少可达4ng/ml;对6人份混合的人精液物质在稀释20万倍后仍出阳性结果,且无非特异性反应。结论检验人精浆特异蛋白P30的免疫胶体金试剂条可对嫌疑人精物质做出排查,有利于法医物证检验。
- 李兆隆徐秀兰林涛张英兰常彩琴郭红玲吴博韬蒋之连涂政王俭
- 关键词:胶体金
- 鼠抗人转铁蛋白单链抗体基因序列测定及分析——人转铁蛋白基因工程抗体研制(6)
- <正>从携带人转铁蛋白单链抗体基因载体转化的大肠杆菌菌株中提取质粒,经电泳分析及筛选、纯化出线状质粒DNA,定量后以载体上人转铁蛋白单链抗体基因插入子两边的已知DNA序列经合成后作为引物进行测序扩增凝胶电泳,将得到的人转...
- 李兆隆郭红玲常彩琴涂政肖卫民王明鑫王俭
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- 鼠抗人转铁蛋白抗体轻、重链可变区基因的制备——人转铁蛋白基因工程抗体研制(3)
- <正>将以人转铁蛋白成功免疫的小鼠脾脏取出,以异硫氰酸胍和酚的混合溶液匀浆脾脏组织,再以氯仿抽提、异丙醇沉淀和乙醇洗涤,所得总RNA以oligo (dT)纤维素离心柱分离纯化制备mRNA,使mRNA
- 李兆隆郭红玲常彩琴涂政肖卫民王明鑫王俭
- 文献传递
- 北京地区汉族群体间-α-胰蛋白酶抑制因子重链H1基因的多态性研究
- 2002年
- 目的 研究间 -α-胰蛋白酶抑制因子重链 (inter-α- trypsin inhibitor,ITI) H1基因的多态性。方法 用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性方法 ,调查了北京地区汉族群体 ITI重链 H1基因多态性。结果 ITI重链 H1具有 3个等位基因 ,ITIH1* 1,ITIH1* 2和 ITIH1* 3,其基因型频率分别为 0 .5 6 41、0 .410 3和 0 .0 2 5 6。 ITI H1第 14外显子等位基因频率与蛋白水平上显示的等位基因频率一致。结论 ITI重链 H1基因多态性对法医学具有重要的应用价值和实际意义。
- 裴黎张世崇姜成涛邓华赵兴春常彩琴王俭
- 关键词:遗传多态性聚合酶链反应
- 特殊生物检材DNA提取方法的比较研究
- 刘开会王坚季安全邱宁常彩琴郭燕霞
- 该研究建立了C-有法、C-有一柱法及C-磁法等特殊生物检材DNA提取纯化方法及5ulPCR扩增体系。采用这些DNA提取纯化方法并通过增加循环圈数等参数的调整,系统的研究了荧光标记复合扩增毛干及多个肿瘤组织STR及Amel...
- 关键词:
- 关键词:法医物证生物检材DNA提取
- 人转铁蛋白免疫小鼠——人转铁蛋白基因工程抗体研制(2)
- <正>以分离纯化的人转铁蛋白免疫小白鼠,经含福氏完全及不完全佐剂的抗原及不含其它任何抗原类物质的纯抗原免疫Balb/c小鼠。采血以琼脂糖双向扩散法、ELISA法检测效价及特异性,结果表明以琼脂糖扩散法在抗血清稀释32×时...
- 李兆隆郭红玲常彩琴肖为民涂政王明鑫王俭
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- 3种DNA纯化方法及比较研究
- <正> 案发现场提取的大多数生物检材,用常规Chelex100法、有机法、SiO2法等往往都能成功检见DNA基因型,达到同一认定、个体识别及尸源认定的目的,但是对于微量、严重降解、疑难等特殊生物检材,常常得不能满意结果。...
- 刘开会郭燕霞季安全邱宁王坚常彩琴
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