孙迪 作品数:12 被引量:23 H指数:3 供职机构: 重庆医科大学基础医学院 更多>> 发文基金: 重庆市渝中区科技计划项目 重庆市软科学计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
FBW7蛋白的研究进展 2010年 泛素蛋白酶体系统介导的快速蛋白降解途径可以调节不同的细胞进程。这种蛋白水解系统通过泛素激活酶El、泛素载体蛋白E2和泛素连接酶E3的一系列泛素化作用,然后由26S蛋白酶体对底物进行快速降解。根据泛素连接酶结构的不同将其分为两大类:RING-指型蛋白和HECT-结构域型蛋白。含有cullin蛋白亚单位的RING-指型泛素连接酶,被称CRLs(cullin RINGubiquitin ligases)。 孙迪 沈宜关键词:泛素蛋白酶体系统 26S蛋白酶体 蛋白水解 结构域 UO-126对HeLa细胞增殖及对FBW7表达的影响 被引量:6 2010年 目的:观察UO-126对人类宫颈癌细胞株HeLa细胞增殖及对F-盒和含蛋白7的WD重复结构域FBW7表达的影响。方法:采用MTT法观察不同浓度的UO-126对HeLa细胞增殖的影响;免疫荧光法检测FBW7在HeLa细胞中的定位和表达;RT-PCR、Western blot检测FBW7 mRNA及蛋白在UO-126阻断丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein ki-nases,MAPK)信号通路前后的表达情况。结果:MTT结果显示各浓度UO-126具有抑制HeLa细胞增殖的作用,且具有剂量依赖性和时间依赖性(P<0.05)。免疫荧光检测显示UO-126处理HeLa细胞后FBW7阳性表达增强。RT-PCR及West-ern blot结果显示,UO-126作用后HeLa细胞FBW7 mRNA及蛋白表达水平较未处理HeLa细胞明显增高(P<0.05)。结论:MAPK信号通路阻断剂UO-126抑制HeLa细胞增殖,FBW7位于MAPK信号通路的下游。 孙迪 沈宜 汪少华 向自武 谢莹珊 姜歆关键词:MAPK 宫颈癌HeLa细胞抑癌蛋白FBW7调控机制研究 2010年 孙迪 沈宜关键词:癌蛋白 信号通路 阻断剂 结构域 宫颈癌HeLa细胞抑癌蛋白FBW7调控机制研究 <正>目的:观察MAPK信号通路阻断剂UO-126对人类宫颈癌细胞株HeLa细胞周期素E(cyclin E)及F-盒和含蛋白7的WD重复结构域FBW7表达的影响。方法:采用RT-PCR、Western blotting检... 孙迪 沈宜文献传递 宫颈癌HeLa细胞抑癌蛋白FBW7调控机制研究 2011年 目的:观察MAPK信号通路阻断剂UO-126对人类宫颈癌细胞株HeLa细胞周期素E(cyclinE)及F-盒和含蛋白7的WD重复结构域FBW7表达的影响。方法:采用RT-PCR、Western blot检测UO-126阻断MAPK信号通路前后cyclin E和FBW7 mRNA及蛋白表达情况。结果:RT-PCR及Western blot结果显示,UO-126作用后HeLa细胞cyclin E mRNA表达水平无明显变化,cyclin E蛋白表达水平明显下降,FBW7 mRNA及蛋白表达水平较未处理HeLa细胞均明显增高。结论:宫颈癌HeLa细胞中FBW7异常表达与MAPK信号通路激活密切相关。UO-126阻断MAPK信号通路可下调cyclin E表达,上调FBW7表达。 孙迪 沈宜 谢莹珊 隆霜关键词:MAPK 细胞周期素E 热应激小鼠肝癌细胞(H_(22))源Exosomes的抗肿瘤免疫机制 被引量:1 2009年 目的制备小鼠肝癌细胞(H22)源Exosomes及热应激小鼠肝癌细胞(H22)源HS-Exo(heat stressedExosomes,HS-Exo),研究其对小鼠可能的抗肿瘤免疫机制。方法用超速分级离心和蔗糖密度梯度离心纯化获得Exosomes及HS-Exo,透射电镜观察其形态。以Exosomes为对照,观察HS-Exo的蛋白组分、产量及其激发宿主抗肝癌免疫应答效应,用Western blot方法检测两者所含有的相关蛋白情况。用MTT法检测免疫小鼠脾细胞增殖和脾淋巴细胞的细胞毒活性。用免疫组化法检测经两者免疫后小鼠肿瘤组织中CD4+、CD8+淋巴细胞浸润情况。结果HS-Exo与Exosomes形态相似,HS-Exo所含的重要免疫蛋白表达增加(P<0.05),用HS-Exo免疫小鼠后比用Exosomes免疫小鼠能更有效地抑制肿瘤生长,更好地诱导淋巴细胞增殖,更显著增强小鼠脾淋巴细胞的细胞毒活性以及更明显的肿瘤治疗作用(P<0.05)。结论热应激制备HS-Exo的方法具有可行性,HS-Exo比Exosomes具有更强的免疫活性和肿瘤治疗作用。 孙迪 杨麟 沈宜 汪少华 向自武关键词:EXOSOMES 肿瘤免疫 Ras信号通路对HeLa细胞增殖及FBW7、cyclin E表达的影响 目的:
研究Ras及其下游PI3K和MAPK信号通路对人类宫颈癌细胞株HeLa细胞增殖及细胞周期素E(cyclin E)表达的影响。在此基础上,进一步探讨介导cyclin E泛素化降解的抑癌蛋白F-盒和含蛋白7的W... 孙迪关键词:信号通路 细胞增殖 宫颈癌 流式细胞术 文献传递 Ras信号通路阻断剂FTI-277抑制HeLa细胞增殖及对cyclin E表达的影响 被引量:3 2010年 目的:观察Ras信号通路阻断剂(FTI-277)在人类宫颈癌细胞株HeLa细胞中对细胞周期素E(cyclin E)表达及对HeLa增殖、凋亡的影响情况。方法:采用MTT法观察不同浓度的FTI-277对HeLa细胞的生长抑制作用;流式细胞术(FCM)观察Hela细胞的细胞周期变化;RT-PCR、Western blot法检测FTI-277阻断Ras信号通路前后HeLa细胞cyclin E mRNA及蛋白表达。结果:各浓度范围FTI-277均能抑制HeLa细胞的增殖,且具有剂量依赖性和时间依赖性。流式细胞术分析显示,FTI-277作用后的HeLa细胞明显滞留于G1/S期,且具有时间依赖性。RT-PCR及Western blot结果显示,FTI-277作用前后HeLa细胞cyclin E mRNA表达无明显变化,而蛋白表达水平明显降低。结论:FTI-277可以抑制细胞增殖,Ras信号转导通路可能是通过影响HeLa细胞cyclin E转录后的翻译环节减少其表达。 孙迪 沈宜 汪少华 向自武 谢莹珊 姜歆关键词:CYCLINE RAS H_(22)源exosomes瘤苗在小鼠体内的抗肿瘤及免疫调节作用 被引量:4 2009年 目的:探讨exosomes瘤苗对小鼠免疫功能及肝癌移植瘤生长的影响。方法:从培养的小鼠肝癌H22细胞上清中分离exosomes瘤苗,以H22细胞接种BALB/c小鼠建立动物模型,随机分为exosomes瘤苗接种组及PBS对照组。15d后处死小鼠,测量移植瘤体重量,计算抑瘤率;分别称取脾重、胸腺重,检测荷瘤小鼠脾脏指数和胸腺指数;用MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖情况和细胞毒活性;酶连免疫吸附试验(Enzyme-linked immunoabsorbent assay,ELISA)检测脾淋巴细胞产生IL-2、INF-γ的能力。结果:接种exosomes瘤苗能显著抑制肿瘤生长,抑瘤率达42.26%;与对照组比较,实验组荷瘤鼠胸腺指数、脾指数显著提高(P<0.05);exosomes促进脾淋巴细胞增殖并增强其细胞毒活性,同时脾淋巴细胞培养上清中IL-2、INF-γ的水平升高。结论:exosomes瘤苗可能通过增强小鼠的免疫功能抑制小鼠肝癌移植瘤生长。 汪少华 沈宜 李静 向自武 范维珂 孙迪关键词:EXOSOMES 抗肿瘤免疫 肿瘤疫苗 乳腺癌细胞exosomes对人脐静脉内皮作用的实验研究 被引量:1 2011年 目的:观察人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞源exosomes对人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)增殖、迁移能力及血管样结构形成的影响。方法:超速离心及密度梯度离心法提取exosomes;MTT法检测MDA-MB-231细胞源exosomes对HUVECs增殖的影响;Transwell小室法检测HUVECs与exosomes混合培养24h后迁移能力的影响;观察HUVECs与exosomes混合培养24h后管腔样结构形成变化。结果:各浓度exosomes均具有促进HUVECs细胞增殖作用,且以时间剂量依赖性促进HUVEC细胞增殖(P<0.01);200μg/ml exosomes处理HUVECs细胞24小时,HUVEC细胞的迁移能力提高,差异具有显著性(P<0.01),且能显著提高HUVECs体外管腔形成能力,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:MDA-MB-231细胞源exosomes以时间剂量依赖的方式促进HUVECs增殖,且可显著增强HUVECs的迁移能力及其体外管腔形成能力。 谢莹珊 沈宜 隆霜 孙迪 姜蓉 陈黎关键词:乳腺癌细胞株 EXOSOMES 脐静脉内皮细胞株 管腔形成