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雌激素受体αAF-2区在小鼠卯泡生长与排卵中的作用研究: 江中良孙秀柱王立强胡建宏李青旺

精原干细胞体外分离培养的研究进展被引量：2: 2017年; 为探索提高精原干细胞分离和体外培养效率的技术方法,以建立长期稳定的动物精原干细胞培养体系,对动物精原干细胞的分离纯化和体外培养的研究进展进行综述。以"Spermatogonial stem cell,Isolation,Culture,Enrichment,in vitro"和"精原干细胞、分离、培养和体外扩增"为检索词,查阅精原干细胞相关文献,并进行归纳整理。精原干细胞分离主要有机械分离法和酶消化法,纯化精原干细胞的方法有差速贴壁法、密度梯度离心法、免疫磁珠法、流式细胞法等,目前大动物精原干细胞的富集常使用酶消化法、差速贴壁法和Percoll梯度离心法相结合。精原干细胞体外培养需模拟体内生境,通常在基础培养基中添加血清、饲养层细胞和各类生长因子等,培养条件会影响精原干细胞培养的效果。小鼠精原干细胞已建立较完善的培养体系,而人和多数大动物还缺乏完善的精原干细胞体外培养体系。; 孙秀柱朱艳娇杜丽娟王立强康孟阳王淑辉; 关键词：精原干细胞纯化体外培养

供体细胞对猪体细胞克隆胚胎早期发育的影响被引量：12: 2006年; 以中国农业大学实验用小型猪香猪胎儿成纤维细胞、成年耳成纤维细胞和颗粒细胞3种细胞系为供体细胞进行核移植。比较了血清饥饿法和接触抑制法处理胎儿成纤维细胞诱导进入G0/G1期的效率,发现二者差异不显著(P>0.05),血清饥饿2d和4d差异不明显,同样接触抑制2d和4d差异也不显著(P>0.05)。系统研究了影响克隆胚胎发育的供体因素:血清饥饿与否、细胞形态、细胞类型及个体差异等,结果表明:血清饥饿处理对克隆胚的早期发育没有明显的促进作用;圆形光滑细胞有利于细胞融合,对早期发育无显著影响(P>0.05);不同个体、不同类型的供体细胞对克隆胚囊胚发育率有一定的影响。; 潘登科张运海孙秀柱李燕吴常信李宁; 关键词：胎儿成纤维细胞血清饥饿细胞类型克隆胚胎

猪体外受精胚胎、孤雌激活胚胎以及体细胞核移植胚胎的体外培养被引量：16: 2007年; 目的本研究系统比较了体外受精胚(IVFEs)、孤雌激活胚(PAEs)以及体细胞核移植胚(NTEs)的发育率和囊胚质量,同时还比较了PZM-3和NCSU-23两种培养基培养对PAEs以及NTEs发育的影响。方法利用体细胞核移植技术、体外受精技术和孤雌激活技术分别生产猪的NTEs、IVFEs和PAEs,开展体外培养。结果(1)IVFEs、PAEs和NTEs的卵裂率分别为72.0%,66.0%和63.5%,各组间没有显著差异(P>0.05);囊胚形成率分别为11.0%,22.6%和16.9%,也不存在明显不同(P>0.05);然而,在囊胚质量,即ICM细胞数/总细胞数的比例上,IVFEs和NTEs均优于PAEs(0.448%,0.356%vs 0.122%,P<0.05)。(2)对PAEs来讲,以PZM-3为基础培养基时囊胚率明显高于以NCSU-23为基础培养基时的处理组(35.4%vs.22.6%,P<0.05);而对NTEs而言,两种培养基在支持胚胎形成囊胚方面的效果相当(26.6%vs.21.1%,P>0.05),虽然PZM-3培养时胚胎卵裂率显著低于NCSU-23培养组(47.5%vs.63.5%,P<0.05)。结论(1)PAEs的囊胚质量在3种来源的胚胎中最差;(2)对PAEs理想的培养基,当用于NTEs培养时却不一定是最佳的选择。; 张运海潘登科孙国杰孙秀柱李燕戴蕴平李宁; 关键词：体外受精体细胞核移植孤雌激活体外培养

“后基因组”时代全球“人工授精”发展现状分析被引量：2: 2021年; 为了解全球人工授精(AI)研究现状,本文以Web of Science核心集合数据库为统计源,采用文献计量学方法,检索分析2003~2019年AI研究领域发表刊文量,根据刊文数量、发表年份、国家、期刊、机构及国家合作关系等信息,结果发现全球AI发表文献数量总体呈上升趋势,美国在AI研究领域优势明显且实力最强,全球AI主要研究方向为农学、兽医科学及繁殖生物学等,我国AI研究方向与国际接轨。本文通过对AI相关领域发文量进行统计分析,以期为研究者在国际期刊发表科研论文和开展国际合作提供参考,推动我国AI技术的进一步发展。; 潘赟唐晓琴李麒蓝贤勇孙秀柱胡沈荣; 关键词：人工授精文献计量学

利用MMCT技术生产转染色体牛: MMCT是微细胞介导的染色体转移法(Microcel lmediated chromosome transfer)的简称。MMCT是一种将只含单条或数条染色体的微细胞与完整的受体细胞进行融合后,用相应的方法筛选出融合有目...; 何祖勇孙秀柱李宁; 文献传递

肺泡表面活性物质内稳态相关基因的异常与肺部疾病被引量：8: 2016年; 肺泡表面活性物质（pulmonarysurfactant，PS）是由肺泡Ⅱ型上皮细胞合成和分泌的一类蛋白质和脂质的复合物，具有降低肺泡表面张力、保持肺泡内液体平衡、维持肺泡正常形态及防御功能。PS内稳态相关基因的遗传紊乱会造成PS缺乏或细胞毒性，引起新生儿、儿童及成年人的多种肺部疾病，包括新生儿呼吸窘迫综合征、间质性肺炎、蛋白沉积症和肺泡纤维化等，严重时会致死。本文简要综述了PS的功能及其内稳态相关基因遗传紊乱与肺部疾病的关系。; 姜晓静孙秀柱杜卫华郝海生赵学明王栋朱化彬刘岩; 关键词：肺泡表面活性物质肺泡表面张力肺部疾病内稳态遗传代谢病

CRISPR/Cas9技术在表观基因组中应用的探讨: 2018年; 成簇规律间隔短回文重复序列/成簇规律间隔短回文重复序列关联蛋白9(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated proteins,CRISPR/Cas9)技术是近5年来在生物基因改造中应用最广泛的新型编辑工具,具有成本低、效率高、多位点打靶以及脱靶效应可预测等优点,正在成为不同生物体中设计基因组的有力工具。表观遗传的不断发展对分子生物学的中心法则提出挑战,包括DNA中碱基和组蛋白的修饰、非编码RNA对基因组和染色质结构的调节中都起到至关重要的作用。对CRISPR/Cas9系统的改造可以对表观基因组进行修饰。对CRISPR/Cas9系统在表观基因组中进行修饰的应用进行概述,讨论了定向修饰基因组存在的问题,以期为CRISPR/Cas9系统在基因组编辑领域的应用提供参考。; 贺帅王淑辉孙秀柱

绵羊FRZB基因InDel检测及其与生长性状的关联分析被引量：1: 2020年; 本研究以卷曲相关同源蛋白(FRZB)基因作为候选基因,以同羊、小尾寒羊、兰州大尾羊和湖羊4个品种共计582只绵羊个体为试验材料,利用琼脂糖凝胶电泳结合DNA测序技术对FRZB基因的InDel进行筛查,旨在寻找与4个品种绵羊生长性状相关的InDel位点。结果表明,绵羊FRZB基因第1内含子上检测到一段14 bp的InDel突变;FRZB基因内含子区InDel突变位点在同羊、小尾寒羊、兰州大尾羊和湖羊群体中均存在II、ID、DD 3种基因型;关联分析表明,FRZB基因中检测到的InDel突变对同羊生长性状有显著影响(P<0.05),其中II基因型的体长、背高、荐高、距骨宽度、尾长和尾宽在同羊群体中显著优于DD基因型,可以作为候选分子标记用于同羊分子标记辅助选择。这些结果提示,绵羊FRZB基因第1内含子上一个14 bp的插入突变可显著影响同羊生长性状,可以作为绵羊育种中生长性状的潜在分子标记。; 陈平博赵海东邬明丽韦燕佩孙秀柱王淑辉; 关键词：绵羊生长性状

冷冻保护剂和胎牛血清对牛成纤维细胞冷冻效果的影响被引量：8: 2006年; 以甘油与DMSO为冷冻保护剂,添加5%-20%胎牛血清的DMEM为基础冻存液,对鲁西黄牛皮肤成纤维细胞进行冷冻保存,结果表明:①同浓度DMSO为冷冻保护剂效果优于同浓度的甘油(P<0.05),但添加50%血清时并不明显(P>0.05),可能与较高血清浓度有关,血清对冻存细胞的影响高于冷冻保护剂的作用。②血清浓度一定时,DMSO和甘油浓度在10%-15%时,冻存效果较好。③当甘油与DMSO浓度一定时,血清浓度越高冷冻保存效果越好。④甘油与DMSO浓度一定时(DMSO浓度5%除外),添加10%和20%血清效果无差异(P>0.05)。因此,在实际应用中,考虑成本等因素,血清浓度达到10%时就已经能达到一般试验要求。; 程金华朱化彬孙秀柱王栋郝海生; 关键词：畜牧学细胞培养胎牛血清鲁西黄牛

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孙秀柱

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