周龙
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：湖南师范大学化学化工学院更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 基于核酸识体的滚环DNA扩增反应用于PDGF-BB的检测被引量：2
- 2006年
- 该文提出了一种新颖的、高灵敏的基于抗体-抗原-核酸识体夹心法和DNA滚环扩增(RCA)的方法用于血小板源生长因子BB(PDGF-BB)的检测。在核酸识体的3'端连接RCA反应的引物,在29DNA聚合酶、脱氧核糖核苷酸及环形模板存在下,经过滚环扩增反应后,可得到一条与环形DNA模板互补的重复序列的DNA单链,利用生物素标记的互补寡核苷酸探针与扩增产物杂交,再用亲和素标记的碱性磷酸酶与之反应,将反应后的产物在底物溶液中进行银沉积反应,最后用电化学方法检测电极表面沉积的银量,通过检测银量来达到检测PDGF-BB的目的。考察了抗体固定化浓度、RCA反应时间和其它蛋白质对测定信号的影响。结果表明,RCA扩增反应能显著的提高检测的灵敏度,降低检测下限。PDGF-BB在0.5pg/mL～8000pg/mL范围内呈良好的线性关系,检测下限为0.2pg/mL。该方法在蛋白质的检测和医学诊断等方面有很大的应用前景。
- 周龙欧丽娟陈珂
- 关键词：核酸识体
