周鹏 作品数:12 被引量:114 H指数:6 供职机构: 浙江中医药大学 更多>> 发文基金: 浙江省自然科学基金 国家自然科学基金 浙江省卫生高层次创新人才培养工程项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
丹红注射液及其主要有效成分配伍对缺氧损伤乳鼠脑微血管内皮细胞的保护机制研究 目的本研究采用体外培养的原代脑微血管内皮细胞(rBMEC)模拟血脑屏障模型,以丹红注射液及其主要有效成分丹参素、原儿茶醛、羟基红花黄色素A和丹酚酸B配伍为研究对象,从细胞水平和分子水平探讨其对缺氧缺血损伤脑微血管内皮细胞... 周鹏关键词:丹红注射液 脑微血管内皮细胞 缺氧模型 文献传递 川芎、黄芪有效成分配伍对缺氧脑微血管内皮细胞的影响 被引量:40 2015年 目的观察黄芪、川芎中的有效成分黄芪甲苷、川芎嗪、阿魏酸、毛蕊异黄酮、藁本内酯的正交组合配伍对SD乳鼠脑微血管内皮细胞(rBMVECs)缺氧损伤的保护作用,并找出较优组合。方法 rBMVECs原代传代培养,并建立缺氧模型,4h后观察细胞形态,MTT法测定各成分的最大耐药质量浓度,以L_(18)(3~5)正交表设计安排成分配伍给药,采用黄嘌呤氧化酶显色法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期,RT-PCR法测定caspase-3与caspase-8基因在细胞中的表达。采用极差分析法分析正交试验结果。结果药物正交配伍组合可显著改善缺氧rBMVECs的形态,有效增强SOD活性,有效抑制缺氧诱导的rBMVECs发生Gl/S期阻滞,明显减少了细胞的凋亡,减弱细胞中caspase-3和caspase-8基因表达。正交试验结果分析显示其较优组合为藁本内酯5μg/mL、川芎嗪10μg/mL、阿魏酸20μg/mL、毛蕊异黄酮10μg/mL、黄芪甲苷10μg/mL。结论黄芪、川芎有效成分组合配伍对内皮细胞缺氧损伤有明显的保护作用。 杨珍 周惠芬 周鹏 杨洁红 万海同 管敏国 张宇燕关键词:川芎 脑微血管内皮细胞 缺氧 超氧化物歧化酶 细胞凋亡 羟基红花黄色素A在Caco-2细胞单层模型的转运研究 被引量:7 2014年 目的研究丹红注射液中主要成分羟基红花黄色素A(HSYA)在Caco-2细胞单层模型的转运特征。方法MTT法确定HSYA对Caco-2细胞单层模型作用的安全浓度范围;采用Caco-2细胞单层模型考察转运时间、药物质量浓度、温度、pH值以及P-糖蛋白(P-gP)抑制剂维拉帕米和能量代谢抑制剂叠氮化钠对HSYA转运的影响;RT-PCR法检测HSYA及维拉帕米对多药耐药基因(MDR1)表达的影响。结果从顶侧(AP)到底侧(BL)(AP→BL),HSYA的表观渗透系数(Papp)在2×10-6-5×10-6cm/s,表明其吸收性中等;HSYA的转运与其质量浓度和时间呈正相关,37℃下HSYA的Papp与4、25℃下的Papp有显著差异(P〈0.01),pH值为9.0时的Papp与pH值为5.0、7.4时的Papp值也有明显差异(P〈0.01)。维拉帕米能明显下调MDR1基因的表达,但HSYA的转运不受维拉帕米的影响;叠氮化钠影响细胞能量代谢,但HSYA的转运不受能量代谢异常的影响,且Papp(BL→AP)/app(AP→BL)在1-1.5,HSYA的吸收过程基本符合被动扩散。结论HSYA在Caco-2细胞模型的转运方式为被动扩散,且不受P-gP和能量代谢的影响,低温和碱性环境下不利于HSYA的吸收。 周鹏 周惠芬 何昱 张宇燕 杨洁红 戴柳玲 汪兴宇 王泽锋 万海同关键词:丹红注射液 羟基红花黄色素A CACO-2细胞单层模型 3088例动脉粥样硬化性脑梗死患者中医证候特征回顾性研究 2023年 目的探讨动脉粥样硬化性脑梗死(ATCI)不同阶段中医证候特征及病机演变规律。方法通过检索医院信息系统,回顾性收集2015年1月1日—2019年12月31日来自6个地区8家医院的ATCI患者临床资料,经分期及临床症状统计后,使用因子分析中主成分分析法提取公因子,在因子分析的基础上进行聚类分析,结合证素辨证、聚类分析及专家讨论结果探讨动ATCI不同分期的证候情况。结果纳入3088例ATCI患者,其中急性期2290例,非急性期798例。除去中风主要症状(肢体麻木、无力及活动不利,言语不利,头晕),对84项四诊信息变量中出现频率≥5%的指标进行统计,急性期为36项,非急性期35项,经因子分析各提取出14项公因子,选取载荷系数>0.3的公因子进行证素判定,再将14个公因子组作为变量进行聚类,最终急性期、非急性期各聚为5类,结合临床实际和专家意见,急性期证候为气阴两虚、风痰瘀阻证(36.07%),气虚血瘀证(20.74%),风火上扰证(15.15%),阴虚风动证(9.43%),脾虚肝亢证(3.80%);非急性期证候为气阴两虚、瘀血阻络证(45.49%),气阴两虚证(20.05%),气滞血瘀证(16.42%),脾肾亏虚证(8.52%),肝阳上亢证(4.89%)。结论ATCI急性期证素以血瘀、火、内风、阳亢、气虚、阴虚等为主,非急性期以阴虚、气虚、血瘀、气滞等为主。ATCI的主要病机特征为气阴两虚,痰浊、血瘀阻络,根本病机为气阴两虚。 曹依兰 万海同 韩进 徐彬 周惠芬 虞立 周鹏 杨洁红 何昱关键词:动脉粥样硬化性脑梗死 证候特征 证素 丹红注射液对乳鼠脑微血管内皮细胞缺氧损伤的保护作用 目的 研究丹红注射液对缺氧致原代培养的乳鼠脑微血管内皮细胞(rBMECs)损伤的保护作用.方法 原代培养rBMECs,并对其进行兔抗鼠Ⅷ因子鉴定.实验设对照组,缺氧模型组,丹红注射液低、中、高剂量(25、50、100 μ... 周鹏 周惠芬 何昱 张宇燕 杨洁红 赵涛 付巍 邢攀科 万海同关键词:丹红注射液 缺氧 抗氧化 丹参川芎有效成分配伍对缺氧损伤大鼠脑内皮细胞的影响 被引量:17 2014年 目的研究丹参川芎有效成分不同配伍对缺氧损伤大鼠脑微血管内皮细胞(rat brain microvascular endothelial cells,rBMECs)的影响,并找出较优组合。方法采用体外培养的rBMECs,并进行兔抗鼠Ⅷ因子鉴定,建立体外细胞缺氧模型。对参芎有效成分丹参素(A)、丹参酮Ⅱa(B)、川芎嗪(C)、藁本内酯(D)、阿魏酸(E),以3个剂量水平进行正交实验,另设正常组、模型组,观察不同配伍对细胞中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、细胞上清液乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、细胞凋亡率及细胞周期的影响。采用正交方差分析、直观综合分析对实验结果进行多指标优化。结果与模型组比较,各配伍样品均可提高SOD活性,降低LDH含量,减少细胞早期凋亡,抑制缺氧诱导的rBMECs发生G1/S期阻滞的作用。正交方差分析表明:A2B1C3D2E1为SOD的较优组合,A3B1C1D2E3为LDH的较优组合,A2B1C2D3E2为早期凋亡的较优组合,A2B3C3D3E2为G1期的较优组合,A2B3C3D2E2为S期的较优组合;综合分析结果显示A2B1C1D3E2为多指标的较优组合。结论丹参川芎有效成分不同配伍可在一定程度上保护缺氧对rBMEC的损伤,不同配伍作用方式的侧重不同。 管敏国 张宇燕 万海同 周鹏 杨珍 杨洁红关键词:缺血性脑血管病 正交试验 丹红有效成分配伍对缺氧损伤脑微血管内皮细胞的保护作用 被引量:5 2014年 为研究丹红有效成分配伍对缺氧致原代培养的乳鼠脑微血管内皮细胞(r BMECs)损伤的保护作用。原代培养乳鼠脑微血管内皮细胞并对细胞进行缺氧4 h损伤模型的同时,丹红有效成分(原儿茶醛、丹酚酸B、羟基红花黄色素A、丹参素)配伍作用于r BMECs,MTT确定细胞非毒性剂量,采用比色法测定LDH,SOD活性和MDA水平,RT-PCR法检测ICAM-1,MMP-9,P53 mRNA表达,流式细胞术检测r BMECs细胞周期及早期凋亡的变化。丹红有效成分配伍1,2,3,7,8,9组方显著抑制缺氧细胞上清液中LDH的增加;1,2,4,6,7组方显著增强缺氧细胞内SOD活性;1,2,3,8,9组方显著降低MDA水平;1,2,6,7,9组方显著抑制缺氧诱导的r BMECs早期凋亡,缺氧后细胞P53 mRNA表达明显上调的后果是能引起G1期阻滞和促进细胞凋亡,证实P53基因的调节功能体现在G1期校正点的监测;1,2,5,6,7,8,9组方显著下调P53 mRNA表达;1,4,7,8,9组方显著下调ICAM-1 mRNA表达;1,3,6,9组方显著下调MMP-9 mRNA表达。丹红有效成分配伍对缺氧所致原代培养的r BMECs损伤具有明显的保护作用,其机制与增强细胞抗氧化能力,抑制炎症反应和细胞凋亡有关。为研究方剂配伍规律提供思路,指导临床用药。 周惠芬 何昱 张宇燕 杨洁红 赵涛 付巍 周鹏 万海同关键词:抗炎症 羟基红花黄色素A在Caco-2细胞单层模型的转运研究 目的 研究丹红注射液中主要成分羟基红花黄色素A(HSYA)在Caco-2细胞单层模型的转运特征。方法 MTT法确定HSYA对Caco-2细胞单层模型作用的安全浓度范围;采用Caco-2细胞单层模型考察转运时间、药物质量浓... 周鹏 周惠芬 何昱 张宇燕 杨洁红 戴柳玲 汪兴宇 王泽锋 万海同关键词:丹红注射液 羟基红花黄色素A CACO-2细胞单层模型 丹红注射液对缺氧损伤脑微血管内皮细胞的保护机制 被引量:20 2014年 为研究丹红注射液对缺氧损伤脑微血管内皮细胞(r BMECs)的保护机制。该实验采用原代培养乳鼠脑微血管内皮细胞并进行Ⅷ因子鉴定,建立缺氧4 h损伤模型的同时,丹红注射液(25,50,100 m L·L-1)作用于r BMECs,生化法检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平,RT-PCR法检测细胞MMP-9,ICAM-1,P53 mRNA表达水平,透射电镜观察细胞超显微结构变化。结果表明缺氧使原代培养的r BMECs受到明显损伤,与模型组比较,丹红注射液(50,100 m L·L-1)可显著对抗缺氧造成的损伤,增强SOD活性,降低MDA水平,明显下调MMP-9,ICAM-1,P53 mRNA的表达,丹红注射液100 m L·L-1能够保护细胞正常的形态、显微结构、维持细胞间紧密连接,抑制缺氧诱导的细胞凋亡。从结果中可以得出丹红注射液对缺氧损伤r BMECs具有明显的保护作用,其机制与增强细胞抗氧化能力,抑制炎症反应及细胞凋亡有关。 周鹏 何昱 杨洁红 张宇燕 周惠芬 赵涛 付巍 万海同关键词:丹红注射液 缺氧 炎症 参芎注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用 被引量:16 2014年 目的:研究参芎注射液对老龄大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:108只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫通组、参芎注射液高、中、低剂量组(36.4,18.2,9.1 mL·kg-1·d-1)。采用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型,观察参芎注射液对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能评分、脑梗死体积的影响,检测脑组织中一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量,ELISA法检测对脑组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平的影响。结果:参芎注射液可显著降低脑缺血再灌注大鼠的神经功能评分,减轻脑组织损伤程度,减少脑梗死范围,提高SOD活力,降低MDA,NO,NOS,LDH水平,抑制IL-1β和TNF-α的表达。结论:参芎注射液对大鼠缺血再灌注损伤具有明显的保护作用,其机制可能与改善神经功能、减少自由基损伤和抑制炎症因子表达有关。 汪兴宇 张宇燕 万海同 赵涛 付巍 周惠芬 周鹏 王泽锋 杨洁红关键词:参芎注射液 脑缺血再灌注损伤 自由基 炎症因子 神经功能