周文娟
- 作品数：13 被引量：355H指数：7
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划中国科学院知识创新工程国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 抗除草剂转基因小麦愈伤组织的获得
- 1992年
- 小麦是重要的粮食作物,但在植物基因工程的研究中其进展是较缓慢的。除 Lorz.H 在1985年报导获得转基因愈伤组织外,迄今未见有更多的报导.我们在1989—1991年先后将抗除草剂 Basta 的 Bar 基因和萤火虫荧光素酶（Luc）基因转入小麦悬浮细胞系徐州211和（中3×科冬58）F1的原生质体中,获得转基因的多细胞团和愈伤组织,并从（中3×科冬58）F1的转基因抗性愈伤组织中得到根的分化。
- 曾君祉杨书礼吴有强田文忠张健王东江朱小平周文娟
- 关键词：愈伤组织转基因小麦萤火虫荧光素酶基因转入染色体组
- 普通小麦中来自黑麦的抗白粉病Pm20基因的抗谱分析和AFLP定位被引量：22
- 2001年
- 用２４个在我国具有代表性的小麦白粉菌已知毒性菌株，对两个不同来源的小麦一黑麦６ＢＳ＿６ＲＬ易位系进行了抗病性鉴定，表明 Ｐｍ２０基因已发生抗谱分化．以这两个材料为亲本配制 ＴＡＭ１０４Ｒ×ＴＡＭ１０４Ｓ杂交组合获得 Ｆ２分离群体，对亲本和 Ｆ２分离群体进行 ＡＦＬＰ分析．亲本 ＤＮＡ经 ＰｓｔⅠ／ＴａｑⅠ双酶切消化，并接上各自的接头，然后以其接头为基础加１个或３个碱基，分别经过两次ＰＣＲ扩增，结果 １６对 ＰｓｔⅠ／ＴａｑⅠ引物组合（４个 ＰｓｔⅠ引物， ４个 ＴａｑⅠ引物）ＰＣＲ扩增出 ２２９０条带，共获得 ３个与该基因连锁的分子标记，分别位于 Ｐｍ２０基因的一端 ２．６和 １１．６ ｃＭ，另一端 ３．６ ｃＭ处，实现了对 Ｐｍ２０基因的连锁分析．
- 王新望王军丽段霞瑜周文娟盛宝钦朱立煌张文俊
- 关键词：小麦抗白粉病基因抗谱分析
- 用花粉管途径获得小麦转基因植株被引量：200
- 1993年
- 本文将带GUS标记基因的质粒pBI121用花粉管途径转化普通小麦(T. aestivum L)品种小山3号的小花。从结实的106粒种子中,经点杂交初步筛选,再经Southern分子杂交鉴定,选出5株转基因小麦,转化率为4.7％。同时用荧光法和X-Gluc染色法测试,检测到这些植株中有GUS基因的表达产物β-葡糖苷酸酶(GUS)存在,证明GUS基因已整合到小麦植株中,并能在植物体中表达。
- 曾君祉王东江吴有强张健周文娟朱小平徐乃正
- 关键词：小麦花粉管途径转基因植株
- 苏云金芽孢杆菌毒蛋白基因在小麦基因组中的甲基化修饰被引量：16
- 1997年
- 通过花粉管通道法将苏云金芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）毒蛋白基因（Ｂｔ．ｔｏｘｉｎｇｅｎｅ）转进了小麦品种京花５号与８６Ａｌ。利用点杂交、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和ＰＣＲ等技术鉴定了转化植株的当代和子代，证实了Ｂｔｔｏｘｉｎｇｅｎｅ的导入与对小麦染色体的整合。利用对腺嘌呤（Ａ）与胞嘧啶（Ｃ）甲基化敏感与否的限制性内切酶组（ｍｅｄｈｙｌａｔｉｏｎ－（ｕｎ）ｓｅｎｓｉｔｉｖｅｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｅｎｚｙｍｅｇｒｏｕｐ，ＭＲＥＧ）酶切和ＲＣＲ扩增（ＭＲＥＧ－ＰＣＲ），对转化子代中的Ｂｔ基因片段甲基化形式进行了研究。结果表明。
- 郭亮文玉香梁玉梅周文娟胡含苏红魏荣
- 关键词：小麦甲基化苏云金芽孢杆菌
- 小麦锌指蛋白基因的克隆、序列与表达分析(英文)被引量：11
- 2004年
- 根据R基因及其调控基因保守序列设计简并性引物 ,对白粉菌接种和未接种处理的一对抗病和感病的小麦 黑麦等位突变易位系TAM10 4R和TAM10 4S总RNA进行RT PCR扩增 ,得到一个诱导表达的cDNA片段。序列分析表明 ,该片段全长 2 4 74bp ,其中含有一个 82 2bp的完整开放阅读框 ,推测其编码一个有 2 73个氨基酸残基、分子量约 31kD的蛋白质分子。蛋白质的氨基酸序列比对显示 ,该蛋白质分子具有C2 HC锌结合motifCX2CX4HX4C结构和锌指domain ,可见克隆的cDNA是一个锌指蛋白基因 ,命名为TaZF。Southern杂交表明 ,TaZF在抗病易位系TAM10 4R的基因组中是多拷贝的。半定量RT PCR分析显示 ,TaZF基因属组成型表达、但受白粉菌诱导表达上调的基因 ,推测其与白粉病菌的侵染过程相关。基因组DNA专化扩增、克隆和测序揭示TaZF基因无内含子。
- 万平令利军周文娟张文俊凌宏清朱立煌张相岐
- 关键词：小麦锌指蛋白基因克隆
- 小麦A,B和D基因组同源DNA序列在进化过程中的演变研究被引量：3
- 2001年
- 选取已定位的大麦１Ｈ染色体的ＳＴＳ标记ＭＷＧ ９１３为引物，在普通小麦（Ｔｒｉｔｉｕｍａｅｓｔｉｖｕｍ Ｌ．）及其４个可能的起源种乌拉尔图小麦（Ｔ． ｕｒａｒｔｕ Ｔ．）、栽培一粒小麦（Ｔ．ｍｏｎｏｃｏｃｃｕｍ Ｌ．）栽培二粒小麦（Ｔ． ｄｉｃｏｃｃｕｍ Ｓ．）、方穗山羊草（Ａｅ． ｓｑｕａｒｒｏｓａ Ｌ．）上特异性扩增。扩增产物克隆测序后对其进行序列分析，由序列差异的程度来确定这几个物种之间的亲缘关系。实验结果表明，普通小麦（Ｔｒｉｔｉｕｍ ａｅｓｔｉｖｕｍ Ｌ．）的Ａ基因组此段序列和乌拉尔图小麦（Ｔ． ｕｒａｒｔｕ Ｔ．）、栽培一粒小麦（Ｔ． ｍｏｎｏｃｏｃｃｕｍ Ｌ．）、栽培二粒小麦（Ｔ．ｄｉｃｏｃｃｕｍ Ｓ．）Ａ基因组此段序列完全相同；普通小麦的Ｄ基因组此段序列与方穗山羊草（Ａｅ． ｓｑｕａｒｒｏｓａ Ｌ．）也完全相同；普通小麦的Ｂ基因组此段序列和栽培二粒小麦Ｂ基因组此段序列有０．６１％的差异。研究结果一方面对现有的普通小麦Ａ、Ｂ、Ｄ基因组起源和进化理论给予了分子水平上的证明，同时也揭示了同一物种不同的基因组进化速度存在差异。
- 余波澜黄朝峰周文娟张文俊
- 关键词：小麦基因组STS进化
- 慈菇蛋白酶抑制剂通过花粉管途径对小麦的导入及转基因植株分析被引量：67
- 1999年
- 慈菇蛋白酶抑制剂（ArrowheadProteinaseInhbitor，API）是来源于慈菇（Sagittariatrifolia）储藏器官（根茎）的一种天然抗虫物质，属于丝氨酸蛋白酶抑制剂类，能抑制胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和激肽释放酶，对某些鳞翅目、双翅目以及鞘翅目等昆虫有毒杀作用。通过花粉管途径，将构建的含抗虫基因API－A、API－B和选择性标记基因NPT－Ⅱ的质粒pBLAH－A（B）导入3个冬小麦品种（JD-1、8866、866554），通过卡那霉素抗性的筛选和聚合酶链反应（PCR）技术分析表明，Kmr绿苗中有3株为PCR阳性株（866554有2株，JD-1有1株），阳性率为0．29％。用API基因的片段为探针，对Kmr绿苗分别进行基因组DNA的Southern杂交分析，在3株PCR阳性株中都检测出了API基因片段的存在，说明了外源目的基因已整合到小麦基因组中。对转化阳性植株899554-3的自交后代进行了PCR分析和Southern杂交分析，部分植株表现为PCR和Southern杂交阳性，这表明整合到基因组中的外源基因能稳定遗传给后代。用ELISA的方法检测与API基因融合的NPT－Ⅱ基因的表达含量，发现在PCR和Southern杂交分析为阳性反应的3植株中都显示出NPT－Ⅱ的高含量，为杀虫基因API在转基因小麦中的整合提供了进一步证据。
- 牟红梅刘树俊周文娟文玉香张文俊魏荣瑄
- 关键词：慈菇抗虫基因小麦遗传转化API
- 大麦6H染色体特异性标记的筛选和鉴定被引量：17
- 2000年
- 从大麦、小麦和小麦－大麦６Ｈ染色体附加系ＲＡＰＤ分析筛选出对６Ｈ染色体特异的２个 ＲＡＰＤ标记，转换为特异性ＰＣＲ标记，利用该标记对不同植物材料进行ＰＣＲ扩增鉴定。表明凡 含有大麦６Ｈ染色体的材料（Ｂｅｔｚｅｓ、Ｉｇｒｉ、ＣＳ ６Ｈ附加系）均能扩增出特异带；而不含６Ｈ染色体的 材料，包括小麦、黑麦、长穗偃麦草、中间偃麦草、簇毛麦以及含有其他大麦染色体的小麦附加系 均没有扩增出特异带。可见，２对ＰＣＲ引物具有大麦６Ｈ染色体特异性，表明用ＲＡＰＤ标记转换 为ＰＣＲ标记鉴定大麦特定染色体的方法可行。并通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证明这２个克隆片段分属 于大麦基因组特异的多拷贝重复序列和小麦与大麦基因组共有的寡拷贝序列。
- 黄朝峰张文俊余波澜周文娟李鸣李安生
- 关键词：大麦
- 小麦锌指蛋白基因的克隆、序列与表达分析
- 根据R基因及其调控基因保守序列设计简并性引物,对白粉菌接种和未接种处理的一对抗病和感病的小麦-黑麦等位突变易位系TAM104R和TAM104S总RNA进行RT-PCR扩增,得到一个诱导表达cDNA片段.序列分析表明,该片...
- 万平令利军周文娟张文俊凌宏清朱立煌张相岐
- 关键词：锌指蛋白基因克隆小麦
- 文献传递
- 免疫白粉病的小麦种内易位系的创制被引量：4
- 1997年
- 以普通小麦Ａ５５２为父本、ＩＲＳ／ＩＢＬ黑麦和小麦易位系早抗为母本的杂种Ｓ３０６３，经Ｃ－分带和原位杂交鉴定，发现丢失了母本的黑麦成分，同时又发生了小麦种内易位，变成了５ＢＳ／７ＢＳ、５ＢＬ／７ＢＬ臂间双易位系。与此同时，白粉病抗性和一些农艺性状也发生了变化，此已己连续３年对白粉病免疫，且免疫条锈、叶锈和高抗黄矮病，每公顷５５２３千克。
- 文玉香吴海珊周文娟王二明王二明魏荣薛民生孙家柱薛民生孙家柱向齐君段霞瑜
- 关键词：小麦C-分带白粉病抗性
