周佽想
- 作品数：4 被引量：16H指数：2
- 供职机构：上海交通大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR-129在乳腺癌中表达下调及其对乳腺癌细胞迁移运动的影响被引量：7
- 2012年
- 本文旨在寻找抑制乳腺癌转移的microRNA (miRNA)。综合利用miRNA靶基因预测软件和目前已知与肿瘤转移相关基因的对比分析,寻找出5个可能靶向乳腺癌转移相关基因的miRNA。以高转移乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞为模型,体外瞬时转染上述5个miRNA模拟物,用Transwell迁移实验筛选出能抑制细胞迁移运动的miRNA,并用Western blot检测分析了5个miRNA对E-cadherin蛋白表达的影响。筛选结果显示,miR-101、miR-129、miR-130、miR-133a和miR-144可以抑制乳腺癌细胞的迁移运动能力,其中miR101、miR129、miR-133a和miR144能不同程度地上调E-cadherin表达。划痕实验结果显示,miR-129能抑制其它两株高转移乳腺癌细胞系BT549和MDA-MB-435s的迁移运动。更为重要的是,Real-time RT-PCR结果显示,miR-129在大部分乳腺癌患者的癌组织样本和乳腺癌细胞系中表达下调。以上结果提示,过表达miR-129可以显著抑制乳腺癌细胞的迁移运动能力,而miR-129的低表达可能参与了乳腺癌的发生、发展和转移。
- 王球玉唐珺周佽想赵倩
- 关键词：乳腺癌迁移
- 支原体污染对重组逆转录病毒的产生和感染靶细胞的影响
- 2009年
- 目的探讨细胞支原体污染对重组逆转录病毒的产生和靶细胞感染效率的影响。方法利用倒置荧光显微镜或流式细胞仪检测绿色荧光蛋白（GFP）表达，确定细胞转染效率及病毒感染效率。PCR方法扩增支原体特异性核酸片段以检测培养细胞293T、NIH3T3及32D有无支原体污染。结果支原体抗生素Plasmocin有效清除了培养细胞内及上清中所污染的支原体；通过对细胞支原体的清除明显提高了逆转录病毒重组表达质粒在包装细胞中的转染效率及病毒感染靶细胞的效率。结论细胞受支原体污染后不仅影响了逆转录病毒重组表达质粒在包装细胞中的转染，而且严重影响了重组逆转录病毒对靶细胞的感染效率；Plasmocin是清除细胞支原体污染的理想抗生素。
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- 关键词：重组逆转录病毒细胞感染靶细胞流式细胞仪检测重组表达质粒转染效率
- 支原体污染对重组逆转录病毒的产生和感染靶细胞的影响被引量：2
- 2008年
- 目的探讨细胞支原体污染对重组逆转录病毒的产生和靶细胞感染效率的影响。方法利用倒置荧光显微镜或流式细胞仪检测绿色荧光蛋白(GFP)表达,确定细胞转染效率及病毒感染效率。PCR方法扩增支原体特异性核酸片段以检测培养细胞293T、NIH3T3及32D有无支原体污染。结果支原体抗生素Plasmocin有效清除了培养细胞内及上清中所污染的支原体;通过对细胞支原体的清除明显提高了逆转录病毒重组表达质粒在包装细胞中的转染效率及病毒感染靶细胞的效率。结论细胞受支原体污染后不仅影响了逆转录病毒重组表达质粒在包装细胞中的转染,而且严重影响了重组逆转录病毒对靶细胞的感染效率;Plasmocin是清除细胞支原体污染的理想抗生素。
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- 关键词：支原体病毒载体基因转染转染效率
- miR-506通过靶向Slug调节上皮间充质转化对乳腺癌细胞侵袭和转移的抑制作用被引量：7
- 2012年
- 目的探讨miR-506通过靶向Slug调节上皮间充质转化对乳腺癌细胞侵袭和转移的抑制作用。方法采用实时荧光定量PCR检测8株乳腺癌细胞系(MCF7、BT474、SK-BR-3、MDA-MB-453、MDA-MB-468、HCC1937、BT549和MDA-MB-231)中miR-506的表达量,以正常乳腺上皮细胞MCF10A为对照。通过脂质体转染的方法在MDA-MB-231和BT549细胞系中瞬时过表达miR-506模拟物(设阴性对照),通过划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验观察细胞运动能力的变化;观察MDA-MB-231和BT549细胞系转染miR-506前后细胞形态学变化;Western blotting法检测E-cadherin、Vimentin和Slug蛋白表达的变化。荧光素酶报告基因分析实验检测MDA-MB-231细胞中miR-506过表达对野生型荧光素酶活性的影响。结果 miR-506在各乳腺癌细胞中的表达量相对于正常乳腺上皮细胞MCF10A显著降低(P<0.01)。miR-506过表达显著抑制MDA-MB-231和BT549细胞的迁移和侵袭能力,与阴性对照的差异有统计学意义(P<0.01)。MDA-MB-231和BT549细胞瞬时转染miR-506 48 h后发生明显的形态学改变;Western blotting结果显示miR-506过表达在MDA-MB-231和BT549细胞中均上调E-cadherin的表达,下调Vimentin的表达。Western blotting检测结果显示MDA-MB-231细胞转染miR-506后Slug蛋白水平明显低于阴性对照;荧光素酶报告基因分析结果显示miR-506过表达显著抑制野生型荧光素酶的活性。结论在乳腺癌中,miR-506可以通过靶向转录因子Slug诱导细胞发生上皮间充质转化,进而抑制细胞的侵袭和转移能力,这是miR-506参与乳腺癌发生和发展的可能途径之一。
- 梁永俊周佽想宇小婷赵倩
- 关键词：乳腺癌上皮间充质转化SLUG
