史元敏
- 作品数:3 被引量:1H指数:1
- 供职机构:新疆农业大学林学与园艺学院更多>>
- 发文基金:霍英东教育基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 蟠桃磷脂酶D基因的克隆及功能分析
- 蟠桃是典型的跃变型果实,采收后极易腐烂变质,不耐储藏,其果实采后保鲜是生产实践中亟待解决的一个难题。李银等在前期研究中发现磷脂酶D(PLD)抑制剂处理有利于“英格尔”蟠桃(PrunuspersicaL.Bastchcv....
- 史元敏
- 关键词:蟠桃磷脂酶D基因克隆
- 文献传递
- 蟠桃果实总RNA提取方法的研究
- 2012年
- 【目的】筛选获得提取蟠桃果肉中总RNA的适宜方法。【方法】以盛花后100 d的蟠桃为材料,采用Transplant plus植物总RNA提取试剂提取法、RNAisoTM试剂盒法、改良SDS法、改良CTAB法等四种方法提取总RNA。【结果】两种试剂盒法提取的总RNA质量差,有严重的基因组污染;改良SDS法提取物中含有大量的多糖;采用改良CTAB法所得RNA完整性好,条带清晰无降解,无基因组污染。经过RT~PCR和Northern blot检测后,表明该RNA能够满足后续分子生物学操作的要求。【结论】蟠桃果实总RNA适宜提取方法-改良CTAR法的确定为后续果实发育分子生物学的研究奠定了基础。
- 史元敏何天明袁海英
- 关键词:总RNA改良CTAB法
- 蟠桃磷脂酶D基因RNAi表达载体构建被引量:1
- 2012年
- 【目的】构建蟠桃磷脂酶D基因的RNAi表达载体。【方法】以英格尔蟠桃为材料,将CTAB改良法提取的蟠桃总RNA反转录成cDNA作为模板,通过RT-PCR扩增约347 bp的保守片段,将目标片段插入到pSK-int中间表达载体中,获得pSK-PLD-RNAi中间表达载体,然后将其转入植物双元表达载体pCAMBI1301中,构建该基因的shRNAi表达载体pCAMBIA-PLD-RNAi。【结果】经限制性内切酶酶切和测序鉴定证明蟠桃磷脂酶D基因的RNAi表达载体pCAMBIA-PLD-RNAi已构建成功。【结论】蟠桃磷脂酶D基因的RNAi表达载体的构建为进一步通过RNAi技术延长蟠桃果实的贮藏寿命奠定了基础。
- 史元敏何天明袁海英
- 关键词:蟠桃磷脂酶DRNA干扰