刘海鹏
- 作品数：11 被引量：41H指数：3
- 供职机构：沈阳农业大学畜牧兽医学院更多>>
- 发文基金：吉林省科委基金吉林省科委科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生自然科学总论更多>>
- 口蹄疫与经典猪瘟二联RT-PCR诊断方法的建立及其应用被引量：3
- 2004年
- 根据口蹄疫病毒 (FMDV)与猪瘟病毒 (CSFV)基因组序列高度保守区 ,设计合成 2对引物 ,以 CSFV和 FMDV培养物提取 RNA并反转录 ,进行 RT- PCR特异性片段扩增 ,扩增片段大小分别为 2 0 0 bp、14 1bp。结果表明 ,扩增产物与设计的2对引物之间的序列大小一致。通过特异性与敏感性试验 ,CSFV与 FMDV培养物均可扩增至 10 - 5倍稀释 ,最终建立的二联RT- PCR方法对上述 2种病毒的敏感性亦可达 10 - 4倍稀释 ,约 10 pg的总 RNA,证明本法对上述 2种病毒具有快速、特异和高度敏感的特点。
- 刘海鹏刘维全江禹夏平安王本旭王吉贵马兴元王萍赵玉军
- 关键词：口蹄疫猪瘟RT-PCRRNA病毒反转录
- 核酸疫苗的研究和应用被引量：12
- 2001年
- 刘海鹏赵玉军
- 关键词：动物用药核酸疫苗免疫效果
- 家蝇卵黄蛋白基因的克隆与结构序列分析被引量：3
- 2003年
- 家蝇卵黄蛋白基因编码的卵黄蛋白是家蝇胚胎发育的重要营养来源 .根据 3种家蝇卵黄蛋白cDNA保守序列设计引物 ,用PCR技术从家蝇基因组DNA中扩增到大小为 76 8bp的mdYP1基因的部分DNA片段 .经地高辛标记成特异性探针 ,从构建的家蝇基因组文库中筛选出一个阳性克隆 ,并从该克隆中分离到大小为 3991bp的mdYP1基因组基因 .序列分析显示 ,该基因组序列含有约1 6kb的 5′ 上游区和 1 0kb的 3′ 下游区 ,编码区由一个 6 1bp的内含子和大小分别为 2 2 2bp和10 2 8bp的 2个外显子组成 .5′ 上游区含有典型的CAAT TATA盒 .
- 夏平安刘维全江禹王本旭刘海鹏牛建强殷震
- 关键词：家蝇卵黄蛋白基因克隆基因组文库
- 在家蝇中表达人胰岛素基因的研究被引量：2
- 2003年
- 目的 研究人胰岛素基因在家蝇中的表达 ,建立家蝇生物反应器。方法 以家蝇作为实验动物 ,利用BAEKON6 0 0 0型基因转移仪将胰岛素基因组基因导入家蝇进行实验研究。收集家蝇新产卵 (1～ 1 5h内 ) ,将环状质粒pCMV_mINS、pCMV_ImINS、pEF1α_mINS、pEF1α_ImINS以 10 μg ml浓度分别与新采集的家蝇卵混合后进行电转移。经人工孵化发育为成虫 (F0 ) ,G4 18(3 0mg ml)筛选F1 代 ,待F1 代发育至成虫并产卵后 ,采用PCR、Tricine_SDS_PAGE和Western_blot技术对F2 代蝇蛆进行整合与表达水平检测。结果 四种质粒均能在家蝇中表达人胰岛素 ,表达量各占蝇蛆总蛋白 0 2 0 7%、0 35 7%、0 4 73%和 0 831%。结论 人胰岛素基因能够在蝇蛆中表达 ,即蝇蛆机体可对人胰岛素原进行翻译后加工。
- 李华刘维全刘海鹏王本旭王吉贵江禹
- 关键词：家蝇胰岛素电穿孔基因工程
- 禽流感病毒、新城疫病毒、古典猪瘟病毒和口蹄疫病毒多联RT-PCR诊断技术的建立及其初步应用
- 首先在GenBank中查出高致病性禽流感病毒（AIV）、新城疫病毒（NDV）、古典猪瘟病毒（CSFV）和口蹄疫病毒（FMDV）基因组的已知序列,对各病毒基因区域进行同源性分析,结合各病毒基因组的结构特点,比较并确定AIV...
- 刘海鹏
- 关键词：禽流感病毒新城疫病毒口蹄疫病毒
- 文献传递
- 禽流感与新城疫二联RT-PCR诊断方法的建立及其应用被引量：12
- 2003年
- 根据禽流感病毒 (AIV)、新城疫病毒 (NDV)基因组序列高度保守区 ,设计合成了 2对引物 ,以AIV、NDV培养物提取RNA并反转录 ,进行RT PCR特异性片段扩增 ,扩增的片段大小分别为4 70和 32 0bp。结果 ,扩增产物与设计的 2对引物之间的序列大小一致。通过特异性与敏感性试验 ,AIV、NDV培养物均可扩增至 1 0 - 4,表明本方法对 2种病毒具有快速。
- 刘海鹏刘维全江禹夏平安王本旭王吉贵马兴元王萍李晓燕赵玉军
- 关键词：禽流感新城疫RT-PCR
- 人胰岛素基因重组杆状病毒在家蝇中表达的研究
- 目的:利用杆状病毒表达系统进行人胰岛素基因在家蝇中表达的研究。方法:用携带有人胰岛素基因的重组杆状病毒感染家蝇幼虫,用放射免疫技术、Tricine-SDS-PAGE和Western-blot技术对蝇蛆胰岛素表达水平进行检...
- 李华董婉维刘维全刘海鹏王本旭王吉贵江禹
- 关键词：杆状病毒表达系统人胰岛素基因家蝇
- 人胰岛素基因重组杆状病毒在家蝇中表达的研究
- 2003年
- 目的 利用杆状病毒表达系统进行人胰岛素基因在家蝇中表达的研究。方法 用携带有人胰岛素基因的重组杆状病毒感染家蝇幼虫 ,用放射免疫技术、Tricine SDS PAGE和Western blot技术对蝇蛆胰岛素表达水平进行检测。结果 重组的杆状病毒感染家蝇幼虫后 ,蝇蛆中有人胰岛素的表达 ,表达量为 37.4 0 1μIU mL ,占蝇蛆总蛋白的0 .5 83%。
- 李华董婉维刘维全刘海鹏王本旭王吉贵江禹
- 关键词：杆状病毒表达系统人胰岛素基因家蝇
- 人胰岛素基因重组杆状病毒在家蝇中表达的研究被引量：1
- 2004年
- 目的 :利用杆状病毒表达系统进行人胰岛素基因在家蝇中表达的研究。方法 :用携带有人胰岛素基因的重组杆状病毒感染家蝇幼虫 ,用放射免疫技术、Tricine SDS PAGE和Western blot技术对蝇蛆胰岛素表达水平进行检测。结果 :重组的杆状病毒感染家蝇幼虫后 ,蝇蛆中有人胰岛素的表达 ,表达量为 37.4 0 1μIU/ml,占蝇蛆总蛋白的 0 .5 83%。结论 :利用杆状病毒表达系统可以在家蝇蝇蛆中表达人胰岛素。
- 李华刘维全刘海鹏王本旭王吉贵江禹
- 关键词：杆状病毒表达系统人胰岛素基因家蝇
- 猪瘟病毒辽宁株E2蛋白部分基因片段的序列分析被引量：1
- 2002年
- 应用RT-PCR方法对辽宁地区8份猪瘟临床病料进行了E2蛋白部分基因片段扩增,其中有5份病料扩增产物经2％的琼脂糖凝胶电泳获得大小约为210bp的目的基因片段。经对目的基因片段回收纯化后进行核苷酸序列测定,并与国内外发表的18株猪瘟病毒株的核苷酸序列和氨基酸序列进行同源性比较表明,所分离的5株猪瘟病毒株核苷酸序列及氨基酸序列与C1W、C2W等8个毒株的同源性较高,而与国内的疫苗株和强毒株的同源性则较低,基因型差异比较明显,并不归属于同一个基因亚群。本研究通过对E2基因片段扩增以及相应的核苷酸序列和氨基酸序列分析,揭示了本地区猪瘟病毒的分子流行病学背景。
- 张洪勇李雪梅刘海鹏吕宗吉涂长春
- 关键词：基因片段RT-PCR猪瘟病毒
