刘江莹
- 作品数:2 被引量:0H指数:0
- 供职机构:北京肿瘤医院更多>>
- 发文基金:北京市自然科学基金国家自然科学基金中华医学基金会基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 利用骨骼肌细胞高效表达人基质金属蛋白酶-9
- 2006年
- 为探讨利用培养的骨骼肌细胞表达人基质金属蛋白酶的可行性,利用PCR和DNA重组技术构建人mmp-9-myc-his/pcDNA3基因表达载体,转染成肌细胞QM-7,G418筛选阳性转染子.诱导细胞分化成肌管后,收集细胞培养上清.经Western印迹检测,表达产物分子量为93 kD,与蛋白标准品对照推测表达量约10~15 mg/L.利用Ni-NTA琼脂糖从1 L培养上清中纯化到4~6 mg MMP-9纯品,纯化效率约50%.经明胶酶谱检测,表达蛋白可以降解明胶.这些结果表明:所表达的MMP-9具有生物活性,为以MMP-9为靶分子的特异拮抗剂和/或药物的筛选、MMP-9定量检测试剂盒的开发以及MMP-9的功能研究奠定了基础;以鹌鹑成肌细胞QM-7作为外源蛋白脊椎动物细胞表达体系具有表达量高、经济等优点,有可能进一步研究开发成为新的外源重组蛋白脊椎动物细胞表达体系.
- 刘江莹赵威张志谦
- 关键词:骨骼肌细胞基因表达
- 基质金属蛋白酶-9基因克隆及其在骨骼肌细胞的高效表达
- 侵袭和转移是恶性肿瘤的主要生物学特征,也是肿瘤患者的主要死因.近年来,国内外许多学者对肿瘤浸润转移的机制进行了广泛的研究,发现细胞外基质(ECM)的降解是肿瘤侵袭和转移的关键步骤,而ECM的分解代谢与基质金属蛋白酶(MM...
- 刘江莹
- 关键词:骨骼肌细胞基因表达
- 文献传递