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刘伟忠

作品数：7 被引量：66H指数：4
供职机构：扬州大学农学院动物医学系更多>>
发文基金：江苏省自然科学基金江苏省教委自然科学基金“九五”国家科技攻关计划更多>>
相关领域：农业科学生物学更多>>

合作作者

题名
作者

文献类型

  • 6篇中文期刊文章

领域

  • 6篇农业科学
  • 2篇生物学

主题

  • 6篇疫病
  • 6篇新城疫
  • 6篇新城疫病
  • 6篇新城疫病毒
  • 6篇病毒
  • 4篇F
  • 3篇蛋白
  • 3篇基因
  • 2篇融合蛋白
  • 2篇克隆
  • 2篇基因克隆
  • 1篇蛋白基因
  • 1篇痘病
  • 1篇痘病毒
  • 1篇毒株
  • 1篇血凝
  • 1篇血凝素
  • 1篇衣壳
  • 1篇衣壳蛋白
  • 1篇衣壳蛋白基因

机构

  • 6篇扬州大学

作者

  • 6篇刘伟忠
  • 6篇吴艳涛
  • 6篇刘秀梵
  • 6篇张如宽
  • 4篇姜焱
  • 1篇彭大新
  • 1篇文其乙

传媒

  • 2篇畜牧兽医学报
  • 1篇中国兽医学报
  • 1篇微生物学报
  • 1篇中国兽医科技
  • 1篇扬州大学学报...

年份

  • 1篇1999
  • 3篇1998
  • 2篇1997
共 7 条 记 录，以下是 1-6
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新城疫病毒F_(48)E_8株血凝素-神经氨酸酶基因的克隆与鉴定被引量：36
1997年
应用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）获取新城疫病毒Ｆ４８Ｅ８株的血凝素－神经氨酸酶基因。扩增反应产物经琼脂糖凝胶电泳分析，长约１．９３ｋｂ，与预期结果相符。将其克隆入质粒载体ｐＧＥＭ－３Ｚｆ（＋）中。
刘伟忠吴艳涛刘秀梵张如宽彭大新姜焱
关键词：新城疫病毒血凝素神经氨酸酶基因克隆杂交
新城疫病毒F_(48)E_(8)株融合蛋白基因的克隆被引量：5
1997年
以提纯的我国标准ＮＤＶＦ４８Ｅ８强毒株基因组ＲＮＡ为模板、化学合成的融合蛋白（Ｆ）基因特异寡核苷酸为引物，反转录合成Ｆ基因ｃＤＮＡ，并采用同聚物加尾的方法克隆到细菌质粒ｐＧＥＭ３Ｚｆ（－）。经ＡＩＸ平板筛选和酶切分析，并用Ｆ基因片段核酸探针作ｄｏｔ－ｂｌｏｔ检测，共获得插入片段长度在０．６～２．８ｋｂ之间的阳性克隆３４个，其中插入片段大于１．５ｋｂ的阳性克隆８个。用多种限制性内切酶对阳性克隆ｐＦ７（１．８ｋｂ）作酶切分析，其结果与国外报道的几株Ｆ基因相符。
吴艳涛刘秀梵张如宽刘伟忠
关键词：新城疫病毒融合蛋白基因克隆
新城疫病毒F_(48)E_8株核衣壳蛋白基因的克隆及其酶切分析被引量：4
1998年
根据已发表的新城疫病毒（ＮＤＶ）核衣壳蛋白（ＮＰ）基因序列，设计合成１对长度为３２ｍｅｒ的引物。ＲＴ－ＰＣＲ扩增ＮＤＶＦ４８Ｅ８株、Ｕｌｓｔｅｒ株、ＬａＳｏｔａ株的ＮＰ基因，产物经琼脂糖凝胶电泳分析，均呈现１条长１．５ｋｂ左右的特异性带。将Ｆ４８Ｅ８株扩增产物克隆入ｐＵＣ１８载体，经限制性内切酶分析证实为ＮＰ基因。
姜焱吴艳涛刘伟忠刘秀梵张如宽
关键词：新城疫病毒核衣壳蛋白基因RT-PCR技术
表达新城疫病毒F48E8株血凝素-神经氨酸酶的重组鸡痘病毒的构建和鉴定被引量：10
1998年
在克隆和鉴定新城疫病毒（NDV）F48E8株血凝素－神经氨酸酶（HN）基因的基础上，应用分子克隆技术将HN基因导入鸡痘病毒插入载体pFG1175－1中启动子P7．5的下游，得到携带NDV-HN基因的质粒pFGHN1175－1。将此质粒pFGHN1175－1以脂质体转染中国鸡痘病毒疫苗株282E4株感染3～4h的鸡胚成纤维细胞，采用蓝斑筛选方法纯化3次，得到稳定的重组鸡痘病毒。用NDV—HN基因特异性探针进行斑点杂交试验以及用HN基因特异性引物作PCR检测，表明NDV—HN基因已插入鸡痘病毒基因组中。以NDV－HN蛋白特异性单克隆抗体进行间接免疫荧光试验，证实重组鸡痘病毒在感染细胞中表达了HN糖蛋白，从而成功建立了表达新城疫病毒F48E8株血凝素-神经氨酸酶的重组鸡痘病毒。
刘伟忠吴艳涛姜焱张如宽刘秀梵
关键词：重组鸡痘病毒新城疫病毒
新城疫病毒中国标准强毒F_(48)E_8株融合蛋白的结构被引量：2
1998年
对新城疫病毒（ＮＤＶ）中国标准强毒Ｆ４８Ｅ８株融合蛋白的结构进行了分析．该融合蛋白的前体Ｆ０由５５３个氨基酸组成，在第１１６和１１７位氨基酸处被酶切成Ｆ１和Ｆ２亚单位．酶切激活部位序列为ＲＲＱＲＲ↓Ｆ，第１１７位氨基酸为Ｆ，具有ＮＤＶ强毒的特征．Ｆ０上有３个疏水区，其功能分别代表信号肽区、融合诱导区和跨膜结构区．Ｆ０的可糖基化部位有６个．并比较了Ｆ４８Ｅ８株和国外强毒株的氨基酸同源性，与Ｍｉｙａｄｅｒａ株、ＴｅｘａｓＧＢ株的同源性分别为９３．６４％和９２．４１％．
吴艳涛刘秀梵刘伟忠文其乙张如宽
关键词：融合蛋白新城疫病毒强毒株氨基酸
新城疫病毒特异性糖蛋白基因探针的制备及应用被引量：9
1999年
应用ＲＴ－ＰＣＲ获取新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｆ４８Ｅ８株的部分囊膜糖蛋白基因片段。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分析，长为９２６ｂｐ，与预期结果相符；将该基因片段定向克隆入质粒载体ｐＵＣ１９中，得到重组质粒ｐ９２６，酶切分析结果与已发表的ＮＤＶ毒株酶切位点一致。随后将该基因片段标记成为地高辛探针，该探针能检测出三株ＮＤＶ（Ｆ４８Ｅ８株、ＬａＳｏｔａ株、Ｕｌｓｔｅｒ株）基因组ＲＮＡ，不能检测出ＩＢＤＶ和ＩＢＶ基因组ＲＮＡ，表明其特异性良好。应用该探针进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交试验鉴定ＮＤＶＦ４８Ｅ８株的Ｆ和ＨＮ基因克隆，结果质粒ｐＦ内１．７ｋｂ片段和质粒ｐＨＮ内１．９３ｋｂ片段为阳性，从而进一步证实ＮＤＶＦ４８Ｅ８株的囊膜糖蛋白基因均已成功克隆。
刘伟忠姜焱吴艳涛张如宽刘秀梵
关键词：新城疫病毒糖蛋白基因探针
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