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刘丽
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H指数:9
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1993
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血小板生成素糖基化与其体内生物学活性关系的研究
被引量:3
1999年
为探讨血小板生成素(TPO)糖基化与其体内生物学活性的关系,给血小板缺乏症小鼠模型腹腔分别注射相同活性单位酵母系统表达的人TPO成熟肽或大肠杆菌表达的人TPON-端结构域蛋白,连续给药5d,每天一次,末次给药后3d,比较两种TPO组动物外周血血小板数量、骨髓巨核细胞培养单位(CFU-Meg)、骨髓有核细胞DNA含量。结果高、中、低剂量的TPO成熟肽组动物的血小板数、巨核细胞集落数和骨髓DNA含量均明显高于TPON-端结构域蛋白的相应组(P<0.01)。显示酵母系统表达的TPO成熟肽比大肠杆菌表达的TPON-端结构域有明显的生物学活性,这可能与它们的糖基化程度及半衰期有关。
刘丽
王颖
王颖
田生礼
孟岩
芦兴武
孟岩
冷爱军
关键词:
血小板生成素
糖基化
生物学活性
rhTNFα D11a对S180肉瘤的体内抗肿瘤作用
被引量:8
1997年
rhTNFαD11a是利用基因工程技术制备的一种新型TNF。体外在极低浓度下对多种人源性和鼠源性肿瘤细胞均有明显的细胞毒作用,与原型rhTNFα相比,其活性高10倍以上;在小鼠和猴子体内进行的急性毒性和慢性毒性试验表明:其毒性比原型rhTNFα低约7倍。本文研究了rhTNFαD11a在荷瘤小鼠体内的抗肿瘤作用,结果表明:瘤内注射1×104U的rhTNFαD11a,70%的动物肿瘤完全消失,其余动物肿瘤极显著减小,且发生组织重度坏死;注射1×103U,10%的动物肿瘤完全消失,90%的肿瘤不同程度地减小,肿瘤组织坏死程度以轻、中度为主;注射1×102U的动物肿瘤无明显减小,但生长率均显著低于对照组。
刘丽
赵建增
谢宝书
冷爱军
占志
关键词:
肿瘤坏死因子
抗肿瘤作用
RHTNF
利用RT-PCR从人胎肝获得血小板生成素cDNA
1997年
采用反转录-PCR(RT-PCR)技术,成功地从人胎肝细胞mRNA中获得了血小板生成素(TPO)信号肽和成熟肽编码区cDNA。序列分析表明,该cDNA序列与DeSauveg等报道的人TPO相应的核苷酸序列完全一致,为TPO基因工程的进一步研究打下基础。
田生礼
冯彪
刘及
刘丽
关键词:
血小板生成素
基因克隆
RT-PCR
CDNA
胎肝
原位杂交检测增生和癌变前列腺组织中前列腺分泌蛋白94mRNA的表达
2000年
根据前列腺分泌蛋白 94(PSP94)和PSP5 7的基因结构特点 ,设计并合成了以地高辛标记的两条探针 ,利用组织原位杂交的方法 ,对增生和癌变前列腺组织中PSP94mRNA的表达量进行了比较。结果显示 ,2 0例增生前列腺组织 ,有 1 0例PSP94和PSP5 7共同探针的杂交信号比PSP94特异探针杂交信号强 ,1 0例相反。它们的共同点是均以腺体增生为主。而 7例前列腺癌组织中除 1例外 ,其余 6例PSP94特异探针的杂交信号均比PSP94和PSP5 7共同探针的杂交信号强。增生和癌变前列腺组织杂交结果比较 ,癌变前列腺组织PSP94特异探针杂交信号均比增生前列腺组织强。
刘立忠
刘丽
谢宝树
冷爱军
曹颖
关键词:
原位杂交
前列腺肿瘤
利用双顺反子结构提高人GM-CSF在大肠杆菌中的表达水平
被引量:3
1996年
作者设计并构建了人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)双顺反子原核表达质粒,使hGM-CSF在大肠杆菌中的表达量从原来的5%提高到30%。
刘丽
郑莉
谢宝树
王国志
关键词:
巨噬细胞
集落刺激因子
双顺反子
血小板生成素基因注射促血小板生成作用的实验研究
被引量:3
1998年
目的:研究血小板生成素(TPO)基因注射法对健康小鼠血小板的促生成作用。方法:将带有hTPOcD-NA的pcDNA3质粒按60μg/只剂量注射到175只昆明小鼠后肢内侧肌肉内,每天断尾采血计数白细胞和血小板,观察不同时间的骨髓和脾脏组织学变化。周期未注射小鼠做为对照组。结果:在基因注入后的3d起即出现血小板和巨核细胞增多。在所观察的27d内,血小板有一可持续1周的高水平期,平均约为同期对照的184%,最高可达3倍以上。计数高峰后血小板在高于对照水平上呈波动状态。小鼠脾脏出现以巨细胞增生和内皮细胞活化为特点的组织学变化。结论:TPO基因注射可刺激血小板和巨核细胞增殖,同时提示TPO具有刺激免疫功能的作用。
赵建增
刘丽
李奕
王艳华
梅英杰
芦兴武
关键词:
血小板生成素
血小板生成
一种重组双顺反子表达质粒及其制备方法和用途
本发明公开了一种重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的双顺反子高效表达质粒及其制备方法和用途。本发明设计了一个带起始和终止密码子的寡核苷酸片段,并将它连接到带起始和终止密码子的编码GM-CSF成熟肽cDNA的5′端,构建了...
刘丽
冯彪
王国志
谢宝树
冷爱军
文献传递
一种重组双顺反子表达质粒及其制备方法和用途
本发明公开了一种重组人粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子的双顺反子高效表达质粒及其制备方法和用途。本发明设计了一个带起始和终止密码子的寡核苷酸片段,并将它连接到带起始和终止密码子的编码GM-CSF成熟肽cDNA的5′端,构建了...
刘丽
冯彪
王国志
谢宝树
冷爱军
文献传递
血小板生成素突变体融合蛋白表达及纯化研究
被引量:2
1998年
目的:用大肠杆菌融合蛋白表达载体pMAL—c2构建人血小板生成素突变体融合蛋白表达质粒pMAL-TPOM。方法:采用基因重组和表达、SD-聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白纯化技术。结果:SDS-PAGE分析表明,IPTG诱导5h后大肠杆菌JM109表达到最高水平,约占大肠杆菌菌体总体蛋白的36.6%。除了大肠杆菌RR1不表达以外,大肠杆菌DH5a、H101均有较高水平的表达,表达产物血小板生成素突变体融合蛋白经SephacyIS-200和DEAE-SepharoseFF层析纯化后,蛋白纯度约为87.6%。结论:人血小板生成素突变体融合蛋白在大肠杆菌JM109、DH5a和H101中均获得高效表达。
田生礼
冯彪
刘及
刘丽
关键词:
血小板生成素
突变体
融合蛋白
纯化
血小板生成素N端结构域及全长分子的生物学活性分析
1997年
以构建的人血小板生成素(TPO)真核和原核表达质粒为基础,对其表达产物即TPO全长分子及以融合蛋白形式表达的人TPON端结构域,通过给Babl/c小鼠腹腔注射进行了生物活学性分析。结果表明,两种蛋白均具有明显促进血小板生成的作用。为进一步研究TPO的糖基化与其生物学活性及半衰期关系打下基础。
刘丽
李景泰
田生礼
谢宝树
冷爱军
关键词:
血小板生成素
结构域
生物学活性
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