刘东尧
- 作品数:12 被引量:58H指数:4
- 供职机构:重庆医科大学附属儿童医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金重庆高校创新团队建设计划项目国家临床重点专科建设项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯诱导大鼠尿道下裂及对阴茎TGF-β1、TGF-βR3表达的影响被引量:7
- 2011年
- 目的:探讨诱导建立大鼠先天性尿道下裂,研究邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)及胎鼠阴茎内转化生长因子(TGF-β1,TGF-βR3)在尿道下裂发生机制中的意义。方法:SD孕鼠随机分为DEHP组(每日500 mg/kg)和大豆油对照组,每组20只。分别于母鼠孕12 d至19 d(GDl2~19)持续经口灌注给药。每组分别留取10只孕鼠让其正常分娩,出生第1日计数新生大鼠,并在解剖显微镜下测量雄性新生鼠的肛门生殖器距离(AGD)和称体质量;雄性仔鼠70日龄时逐个检查尿道下裂的发生情况。另10只孕鼠于孕第19日行剖宫产取仔鼠,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测胎鼠阴茎TGF-β1、TGF-βR3 mRNA的表达水平。结果:DEHP成功诱导出尿道下裂大鼠动物模型,DEHP组仔鼠体质量及AGD较对照组明显缩小(P<0.05)。DEHP组胎鼠阴茎TGF-β1、TGF-βR3 mRNA表达水平增加(P<0.05)。结论:DEHP成功诱导建立先天性尿道下裂大鼠模型,胎鼠阴茎内TGF-β1、TGF-βR3异常表达可能是尿道下裂的发生机制之一。
- 陈柏林刘星吴盛德袁心刚何昀徐明灯刘东尧温晟魏光辉
- 关键词:尿道下裂TGF-Β1
- 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯诱导隐睾对SD幼鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响被引量:5
- 2013年
- 目的探讨环境内分泌干扰物邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯[D(i2-ethylhexy1)phthalate,DEHP]作用于SD孕鼠后,对哺乳期雄性幼鼠睾丸组织中生殖细胞凋亡及凋亡基因Bax和Bcl-2表达的影响。方法将30只妊娠第12.5天的SD孕鼠随机分正常对照组、玉米油对照组和DEHP诱导隐睾组,每组10只。玉米油对照组和DEHP诱导隐睾组自妊娠第12.5~19.5天分别每日灌胃玉米油(2 ml)和DEHP(500 mg/kg),正常对照组不给药。取各组出生后第20天的雄性幼鼠睾丸组织,采用Q-PCR法检测睾丸组织中Bax和Bcl-2基因的水平,流式细胞术检测睾丸生殖细胞的凋亡情况。结果 DEHP诱导隐睾组幼鼠睾丸组织中Bax基因mRNA的水平显著高于两对照组(P<0.000 1),Bcl-2基因mRNA的水平显著低于两对照组(P<0.01);DEHP诱导隐睾组幼鼠睾丸生殖细胞凋亡百分率显著高于两对照组(P<0.000 1)。结论孕期暴露环境内分泌干扰物DEHP可引起雄性子代发生隐睾,且隐睾鼠睾丸生殖细胞凋亡率增加,隐睾子代睾丸组织中凋亡基因Bax和Bcl-2的表达有改变,推测其改变可能参与了生殖细胞的凋亡过程,并可能与隐睾继发的远期不育有关。
- 刘东尧吴盛德华燚何文飞何昀陈柏林龙春兰魏光辉
- 关键词:隐睾生殖细胞细胞凋亡BAX基因BCL-2基因
- 邻苯二甲酸二(2-乙基已基)酯致隐睾大鼠表皮生长因子受体表达的实验研究被引量:1
- 2012年
- 目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)在隐睾组织中是否存在改变及可能发挥的作用。方法:妊娠SD大鼠随机分为3组,即正常对照组、玉米油对照组和邻苯二甲酸二乙基已基酯(DEHP)实验组,每组10只。玉米油溶剂对照组和DEHP实验组自妊娠第12.5日到妊娠第19.5日分别持续每日经口给予玉米油或DEHP(500 mg/kg)1 ml灌胃,正常对照组不作任何处理。收集出生后20 d的雄性仔鼠睾丸,采用免疫组织化学及Western blotting方法检测EGFR在睾丸组织中的表达。结果:正常对照组和玉米油对照组EGFR的表达无统计学差异(P>0.05);DEHP诱导隐睾组隐睾睾丸组织中EGFR表达与2个对照组相比明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:孕期暴露环境内分泌干扰物DEHP可引起雄性子代发生隐睾,雄性隐睾子代睾丸组织中EGFR表达增加,可能与隐睾引起的远期不育有关。
- 刘东尧吴盛德何文飞何昀陈柏林龙春兰魏光辉
- 关键词:隐睾不育
- Notch1在隐睾SD幼鼠睾丸组织中的表达及其意义被引量:1
- 2013年
- 目的探讨环境内分泌干扰物邻苯二甲酸二(2-乙基)已酯(Di-2-ethylhexy1 phthalate,DEHP)作用于SD孕鼠后,对哺乳期雄性幼鼠睾丸组织中Notch1的表达及其在隐睾所致不育症中可能发挥的作用。方法将30只妊娠第12.5天的SD孕鼠随机分为正常对照组、玉米油对照组和DEHP诱导隐睾组,每组10只。玉米油对照组和DEHP诱导隐睾组SD孕鼠自妊娠第12.5~19.5天,分别每日灌胃玉米油(2 ml)和DEHP(500 mg/kg),正常对照组不给药。取各组出生后第20天的雄性幼鼠,镜下观察睾丸位置,并统计隐睾发生情况。采用RT-PCR及Western blot法检测各组雄性幼鼠睾丸组织中Notch1基因mRNA和蛋白的表达水平。结果与正常对照组和玉米油对照组相比,DEHP诱导隐睾组雄性幼鼠的隐睾发生率明显上升(P<0.05);DEHP诱导隐睾组雄性幼鼠睾丸组织中Notch1基因mRNA和蛋白表达水平均明显低于正常对照组和玉米油对照组(P<0.05)。结论孕期暴露环境内分泌干扰物DEHP可引起雄性子代发生隐睾,隐睾子代睾丸组织中Notch1表达有改变,并可能与隐睾导致的不育有关。
- 刘东尧吴盛德华燚何文飞何昀陈柏林龙春兰魏光辉
- 关键词:NOTCH1隐睾
- 汽车尾气来源PM2.5颗粒物长期暴露导致SD雄鼠生殖功能损害被引量:18
- 2016年
- 目的:建立Sprague Dawley(SD)大鼠空气细颗粒物(PM2.5)长期暴露模型,研究PM2.5长期暴露对SD大鼠生殖功能的损伤及其机制。方法:45只SD大鼠(80~94 g,28日龄)随机分配成3组:生理盐水对照组,低剂量组[2μg/(100 g·d)],高剂量组[16μg/(100 g·d)]。每天分别给予0.9%的生理盐水或PM2.5颗粒,连续暴露60 d,最后一次暴露24 h后各实验组选取10只与正常雌鼠合笼,统计雌鼠受孕率,剩余实验鼠取材,进行精子计数和畸形率测定、睾丸组织病理学检测以及睾丸组织Connexin43蛋白表达检测。结果:与对照组雌鼠受孕率(100%)相比,PM2.5暴露组正常雌鼠受孕率(高剂量组50%,低剂量组70%)明显降低,精子数量和质量明显下降,生精小管结构紊乱,管腔精子数减少,部分次级精母细胞脱落至管腔。睾丸组织中Connexin43蛋白表达下降,血睾屏障破坏。结论:汽车尾气来源PM2.5长期暴露影响SD大鼠生殖功能。
- 严超曹希宁沈炼桔刘东尧彭金普陈进军周玥龙春兰林涛何大维李旭良魏光辉
- 关键词:空气细颗粒物汽车尾气生殖功能
- 超声微泡介导ABCB1a基因siRNA质粒转染的效率及对ABCB1a和P-gp表达的影响
- 2012年
- 目的研究超声微泡介导ABCB1a基因siRNA质粒转染L2RYC细胞的效率以及对ABCB1a水平和P-糖蛋白(P glycoprotein,P-gp)表达的影响。方法制备脂质微泡;设计4对siABCB1a序列,并构建4种真核表达质粒pSES-siABCB1a;转染L2RYC细胞(单纯质粒组、质粒+微泡组、质粒+超声组、质粒+微泡+超声组),另设空白对照组。采用流式细胞术检测质粒的转染效率;实时荧光定量PCR及Western blot检测转染后L2RYC细胞中ABCB1a基因及P-gp的表达。结果 4种pSES-siABCB1a质粒经PCR、双酶切及测序证实构建正确;质粒+微泡+超声组pSES-siABCB1a质粒可高效转染L2RYC细胞,可见荧光表达,转染效率为(49.35±5.89)%;转染后ABCB1a基因mRNA及P-gp的表达均明显降低(P<0.05)。结论超声微泡可促进外源基因体外转染L2RYC细胞,siABCB1a能有效抑制ABCB1a基因和P-gp的表达。
- 何昀李奇林温晟刘东尧李明勇王强魏光辉
- 关键词:超声微泡转染P-糖蛋白
- 邻苯二甲酸二(2—乙基)己酯诱导大鼠尿道下裂及对阴茎TGF-β1、TGF-β R3表达的影响
- 目的邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)诱导建立先天性尿道下裂大鼠模型,研究DEHP对胎鼠阴茎内转化生长因子(TGF-β1,TGF-βR3)表达的影响,探讨尿道下裂发生机制。方法SD孕鼠随机分为2组,每组20只:DE...
- 魏光辉陈柏林刘星昊盛德袁心刚刘东尧徐明灯
- 文献传递
- 维生素E拮抗邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯尿道发育毒性的实验研究被引量:3
- 2011年
- 目的探寻维生素E(VitaminE,VitE)对邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯[-Di(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP]所致大鼠尿道发育毒性的拮抗作用及其可能机制。方法GD12(gestationday12)SD孕鼠随机分为4组,每组20只:玉米油对照组、DEHP组(500mg·kg^-1·d^-1)、DEHP(500mg·kg^-1·d^-1)+VitE(200mg·kg^-1·d^-1)组和VitE组(200mg·kg^-1·d^-1)。各组分别于母鼠孕期12~19d(GDl2~19)持续经口灌注给药。各组分别留取10只孕鼠让其正常分娩,出生第一天,即对新生大鼠计数,并在解剖显微镜下测量雄性新生鼠的肛门生殖器距离(anal genital distance,AGD)并称体重;雄性仔鼠70日龄时逐个检查尿道下裂的发生情况。余孕鼠在GD19d行破宫产取仔代鼠,应用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测胎鼠阴茎TGF-β1,TGF-βR3mRNA的表达水平。DNA末端原位标记染色法(TuNEL法)检测胎鼠阴茎尿道上皮细胞凋亡情况。结果各组TGF-β1mRNA表达水平分别为:正常组为0.63±0.07、DEHP组为0.96±0.12、DEHP+VitE组为0.65±0.07、VitE组为0.62±0.06,DEHP组表达明显较其他各组增高(P〈0.05)。各组TGF-13R3mRNA表达水平分别为:正常组为0.47±0.10、DEHP组为0.75±0.10、DEHP+VitE组为0.49±0.09、VitE组为0.46±0.09,DEHP组表达明显较其他各组增高(P〈0.05)。各组胎鼠阴茎凋亡指数分别为:正常组为(30±2.O)%、DEHP组为(8.8±1.1)%、DEHP+VitE组为(28.9±1.6)%、VitE组为(29.6±2.0)O,DEHP组凋亡细胞数较其他各组相比明显减少,差异有统计学意义(P〈0.01)。导致大鼠尿道下裂的发生。VitE可降低DEHP上调的胎鼠阴茎TGF-β,TGF-β3 mRNA表达水平,恢复胎鼠阴茎尿道上皮细胞的凋亡水平。结论VitE对DEHP所致尿道发育毒性具有拮抗作用,其机制可能与调控TGF-βs及胎鼠阴茎尿道上皮
- 陈柏林刘星吴盛德袁心刚何昀徐明灯刘东尧温晟魏光辉
- 关键词:尿道下裂维生素E转化生长因子Β
- c—Jun氨基末端激酶在尿道下裂发病机制中的作用被引量:2
- 2013年
- 目的研究c—Jun氨基末端激酶(c—JunN—terminalkinase,JNK)1/2在正常和尿道下裂患儿包皮组织中的表达,探讨其在尿道下裂发病机制的作用。方法收集尿道下裂尿道修复术和选择性包皮环切术中切除的包皮组织,分为轻中型尿道下裂组14例,重型尿道下裂组14例和正常对照组14例,采用实时定量聚合酶链反应(qPCR)和免疫组织化学方法检测JNKl/2mRNA和蛋白质磷酸化水平的表达,并比较其差异。结果轻中型和重型尿道下裂患儿包皮组织中JNKlmRNA表达分别为1.53±0.46和1.67±0.07,较正常对照的0.84±0.36差异有统计学意义(P〈0.05),尿道下裂组约为正常对照的1.9倍;但其在轻中型和重型尿道下裂之间的表达差异不显著。JNKl/2蛋白磷酸化水平在尿道下裂患儿包皮组织较正常表达呈升高趋势。结论JNK在尿道的发育以及尿道下裂发生中扮演一定角色。
- 李明勇刘星吴盛德邱林袁心刚何昀刘东尧龙春兰魏光辉
- 关键词:尿道下裂丝裂原活化蛋白激酶包皮
- 汽车尾气来源PM_(2.5)长期暴露导致大鼠多器官损害被引量:24
- 2015年
- 目的:建立Sprague Dawley(SD)大鼠空气细颗粒物(particulate matter 2.5,PM2.5)长期暴露模型,观察PM2.5长期暴露对SD大鼠全身主要脏器的影响。方法:40只SD大鼠(80~94 g,28日龄)随机分配成3组:生理盐水对照组10只,低剂量组[2μg/100(g·d)]15只,高剂量组[16μg/100(g·d)]15只。每天分别给予0.9%的生理盐水或PM2.5颗粒,连续暴露60 d,最后一次暴露24 h后取标本,对肺、心、肝、脾和肾5个主要脏器进行大体观察以及病理学检测。结果:与正常组相比,PM2.5暴露组的体重明显降低(P〈0.05),且肺部外观改变明显,肺脏及心脏组织结构受损,炎症反应明显,肝脏、脾脏及肾脏亦有炎症表现。结论:长期暴露在汽车尾气来源PM2.5污染环境中引起大鼠肺、心、肝、脾、肾炎性损害,肺脏及心脏损害明显。
- 严超曹希宁沈炼桔刘东尧彭金普陈进军周玥龙春兰林涛何大维李旭良魏光辉
- 关键词:PM2.5炎症损害