余枫华
- 作品数：54 被引量：223H指数：8
- 供职机构：宜昌市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：湖北省卫生厅科研基金国家自然科学基金宜昌市科学技术研究与开发项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HIV-1 p15(Gag)基因的克隆、蛋白表达及抗体制备被引量：1
- 2008年
- 目的为了研究HIV-1p15(Gag)的生物学活性,制备HIV-1p15(Gag)蛋白及其特异性抗体。方法用PCR的方法扩增编码p15(Gag)基因序列,将其克隆到原核表达载体pET28a(+)中表达HIV-1p15蛋白,分别用His抗体和HIV阳性血清做western blot鉴定目的蛋白。以纯化目的蛋白为抗原免疫日本大耳白兔,制备多克隆抗体。通过酶联免疫吸附实验(ELISA),免疫细胞化学法检测抗体滴度及其特异性。结果原核表达载体pET28a(+)-p15(Gag)成功构建,可在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,得到相对分子质量约20000的p15(Gag)蛋白经western blot鉴定正确。纯化蛋白免疫家兔,制备的多克隆抗体具有较强免疫特异性。结论得到纯化的HIV-1p15蛋白,制备的多克隆抗体能够检测自然状态下病毒蛋白p15(Gag),为进一步研究HIV-1奠定了实验基础。
- 柳发勇刘朝奇史继静杨凡余枫华杨春秀韩莉任东明韩钰
- 关键词：HIV-1原核表达免疫原性多克隆抗体
- 五子衍宗方对H22荷瘤小鼠环磷酰胺化疗的减毒作用被引量：6
- 2012年
- 目的研究五子衍宗方对H22荷瘤小鼠环磷酰胺(环磷酰胺)化疗的减毒作用。方法建立H22荷瘤小鼠模型,实验小鼠接种H22后,随机分为4组,即荷瘤对照组、环磷酰胺组、环磷酰胺加五子衍宗方高剂量组(840mg/kg)、环磷酰胺加五子衍宗方低剂量组(420 mg/kg)。检测各组小鼠外周血红细胞、白细胞、血小板数量和骨髓有核细胞数量变化,观察各组荷瘤小鼠瘤质量的变化以及抑瘤率,流式细胞术分析小鼠脾脏中CD4+、CD8+、CD19+、CD69+CD4+绝对数量和CD4+/CD8+比例变化。结果环磷酰胺化疗小鼠出现红细胞、白细胞、血小板数量下降,脾脏淋巴细胞CD4+、CD8+、CD19+亚群绝对数量显著减少,并且CD69+CD4+绝对数量和CD4+/CD8+比例下降。与环磷酰胺单用组相比,五子衍宗方联合环磷酰胺组红细胞、白细胞、血小板数量明显恢复;小鼠瘤质量降低,抑瘤率升高;小鼠脾脏淋巴细胞CD4+、CD8+、CD19+亚群绝对数量显著增加,并且CD69+CD4+绝对数量和CD4+/CD8+比例明显上升。结论五子衍宗方可减轻环磷酰胺对H22荷瘤小鼠化疗的毒副作用,其机制可能与改善机体免疫功能有关。
- 王洪武李守超王光勇余枫华曾晓狄国杰徐媛青袁丁张长城
- 关键词：五子衍宗方H22荷瘤小鼠环磷酰胺减毒作用
- 湖北省宜昌市2004年流行性感冒监测报告
- 目的每周对哨点医院流感样病例进行登记监测,对发生的疫情进行调查实施防治措施干予。方法通过流行病学研究方法,执行国家和省流感监测方案进行监测及疫情处理。结果 2004年2-12月,监测哨点医院门诊就诊患者总数为140609...
- 杨绍金陈斌贺圆圆余枫华周红雨潘淼李桂林
- 关键词：流行性感冒疫情流行病学
- 文献传递
- 2011—2015年宜昌市流感流行特征及病原学分析被引量：22
- 2016年
- 目的探讨宜昌市流感的流行病学特征,为科学防控流感大流行提供依据。方法对2011—2015年宜昌市流感监测数据和病原学检测结果进行描述和统计分析。结果 2011—2015年度流感监测哨点医院共报告流感样病例（influenza-like illness,ILI）34 064例,其就诊人数占门诊总病例数的2.24%。其中2014年以25~岁年龄组和15~岁年龄组为主,其他各年份都以0~岁年龄组和25~岁年龄组为主,60岁以上组为历年比例最小。共采集检测ILI病例鼻咽拭子标本4 627份,分离流感毒株433株,毒株分离阳性率为9.36%,以季节性H3N2型（181株,41.80%）和甲型H1N1型（129株,29.79%）为主,其次为乙型Yamagata（68株,15.70%）和Victoria（56株,12.93%）。各年度流行优势株不同,2011年以Victoria为主,伴随新甲流和季节性H3N2,2012和2013年以新甲流为主,伴随Victoria和季节性H3N2,2014年转为季节性H3N2为主,伴随Yamagata和新甲流,2015年同时流行Yamagata和季节性H3N2型。2011和2015年各报告1起流感爆发疫情,其余3年每年均有3~4起流感爆发疫情,小学是最主要的报告单位,其次有2起是戒毒所和看守所,一起是家庭聚集性疫情。结论 2011—2015年宜昌市ILI就诊比例逐年增长且呈线性趋势,5年平均增长率为16.56%。ILI人群主要以5岁以下儿童和25~59岁年龄段为主,流感病毒流行型别主要为季节性H3N2、新甲流和乙型,季节性H1N1完全消失被新甲流代替,每2年左右更换优势型别,上一季的优势毒株流行趋势逐渐减弱,在下一季被另一种型别毒株取代。中小学是流感爆发疫情的主要报告单位,其次是看守所或戒毒所。
- 余云芳张谨马静余枫华张娅琳李清元汪艳平
- 关键词：流感流行病病原学监测
- HIV-1 gp160多表位嵌合基因的构建及表达蛋白的免疫原性分析被引量：1
- 2008年
- HIV感染引起的AIDS已经成为严重影响人类健康和社会发展的全球性疾病。酶联免疫吸附试验和免疫印迹检验组合则被认为是HIV检测的"金标准"。构建了gp160的抗原多表位融合基因及在原核系统的高表达,为HIV抗体测定提供特异、价廉的抗原。选定HIV-1gp160基因中3个片段包含较多抗原表位的区域,设计带有酶切位点的引物,用PCR的方法从HIV-1HXB2全基因扩增编码这3个片段的基因序列,通过质粒提取、酶切、测序方法鉴定基因片段的正确性,SDS-PAGE和Western blot测定融合蛋白的抗原特异性。构建的HIV-1gp160多表位嵌合基因的原核表达质粒,酶切和测序结果表明基因序列正确,基因全长969bp。在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达的重组蛋白分子量为37kDa,以包涵体的形式存在。应用Western blot测定10例正常人和12例HIV/AIDS病人血浆显示HIV-1gp160多表位融合蛋白具有良好的抗原特异性。成功构建了高表达HIV-1gp160多表位蛋白的原核表达系统,纯化的融合蛋白有较强的抗原特异性。
- 杨凡刘朝奇柳发勇余枫华杨春秀韩莉任东明张伟杨祖伟
- 关键词：HIV-1蛋白表达免疫原性免疫印迹
- 2006年宜昌市市售食品中食源性致病菌监测分析被引量：7
- 2008年
- 目的:了解宜昌市市售食品中食源性致病菌污染状况。方法:对宜昌市几个主要的集贸市场和超市采集7大类10个食品品种进行6类食源性致病菌检测。结果:生禽肉和速冻面米食品(生制食品)中致病菌检出率分别60%和37.5%。6种食源性致病菌中只分离出了沙门菌、弯曲菌、单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌。结论:生禽肉和速冻面米食品(生制食品)致病菌检出率较高,沙门菌、弯曲菌、单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌仍然是食品中常见的污染菌。
- 黄家兵汪艳平司徒谊萍余枫华吴谨呈周红雨程德明
- 关键词：食源性致病菌
- HIV-1 p15（Gag）基因的克隆、蛋白表达及抗体制备被引量：1
- 2007年
- 目的：构建HIV-1p15（Gag）原核表达载体，诱导蛋白表达及制备多克隆抗体。方法：用PCR的方法扩增编码p15（Gag）基因序列，将其克隆到原核表达载体pET28a（＋）中，利用大肠杆菌表达系统表达HIV-1p15蛋白，分别用His抗体和HIV阳性血清做westernblot鉴定目的蛋白的免疫原性。纯化目的蛋白免疫家兔，制备多克隆抗体。通过酶联免疫吸附实验（ELISA），细胞免疫组织化学法检测抗体滴度及其特异性。结果：原核表达载体pET28a（＋）-p15（Gag）成功构建，可在大肠杆菌BL2。（DE3）中用IPTG诱导表达，得到相对分子质量约20KD的p15（Gag）蛋白，经westernblot鉴定正确。纯化蛋白免疫家兔，制备的多克隆抗体具有较强免疫特异性。结论：得到纯化的HIV-1p15蛋白，制备的多克隆抗体能够检测自然状态下病毒蛋白p15（Gag），为进一步研究HIV-1奠定了实验基础。
- 柳发勇刘朝奇史继静杨凡余枫华杨春秀韩莉任东明韩钰
- 关键词：HIV-1原核表达免疫原性多克隆抗体
- 基于可溶性虫卵抗原的血吸虫抗体检测免疫传感器
- 2011年
- 目的:将免疫法特异性和电化学法灵敏性相结合,建立一种高灵敏基于可溶性虫卵抗原的电化学免疫传感器,用于血吸虫抗体的检测。方法:巯基乙胺通过吸附作用在金电极表面形成的自组装单分子层(SAM),依次滴加2.5%戊二醛和血吸虫抗原(可溶性虫卵抗原,soluble egg antigen,SEA),用以捕获抗SEA抗体(兔多抗或人多抗),然后再与辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗形成免疫复合物。用循环伏安法检测还原峰的电流值。结果:在底物为添加了2μl 30%的双氧水及1.0 mmol/L对苯二酚的0.1 mol/L pH7.2的PBS缓冲液中,还原峰的电流值与抗SEA兔血清稀释度在10-3与10-6范围内成正比,相关系数为0.956。与抗SEA人血清稀释比在10-1与10-4范围内成正比,相关系数为0.988。在1∶40稀释度条件下,血吸虫病人与正常人血清的抗SEA还原峰的电流值相差7.4μA。结论:该方法可以用于血吸虫抗体的初步检测。
- 马静周卓晟徐勇刘红艳余枫华刘军杨春秀
- 关键词：血吸虫抗原SEA循环伏安
- 宜昌地区结核分枝杆菌基因分型与成簇特征分析被引量：3
- 2019年
- 目的描述宜昌地区结核分枝杆菌的基因分型及成簇特征,为宜昌地区的结核病防治提供依据。方法搜集宜昌地区2016年12月至2017年5月经基因芯片检测阳性的结核病患者痰标本,接种罗氏培养基进行培养后,得到的367株结核分枝杆菌临床分离株选择国际通用的24位点结核分枝杆菌散在分布重复单位及可变数目串联重复序列(MIRU-VNTR)进行分子分型,用Hunter-Gaston指数(HGI)和遗传差异值(h)对MIRU位点的分辨率和差异性进行评价;运用BioNumerics5.0软件对VNTR-MIRU结果进行成簇性分析,根据近期传播率公式计算其近期传播率;367株菌株分离来自367例患者,细分为初治患者321例、复治患者46例后分别进行成簇率统计,初复治患者的成簇率比较采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果367株结核分枝杆菌24位点VNTR-MIRU分型结果显示,其总的分辨率HGI值为0.999,其中遗传多样性最高的位点为QUB11b,其h值为0.79;遗传多样性最低的位点为MIRU24,其h值为0.03。分析时发现基因型呈明显的多态性,总共有324个基因型。成簇性分析发现,其中90株菌株形成39个簇,成簇率为24.52%(90/367),近期传播率为13.90%(51/367);复治患者菌株成簇率为21.74%(10/46),初治患者菌株成簇率为24.92%(80/321),两者成簇率比较,差异无统计学意义(χ2=0.220,P=0.639)。结论宜昌地区的结核分枝杆菌呈现出较高的遗传多样性,近期传播率较低,且成簇率与初复治无关,提示宜昌地区结核分枝杆菌以内燃复发为主,也存在小范围内的流行,在结核防控方面要加以重视。
- 刘晓俊余枫华余云芳纪律周攀赵雁林
- 关键词：基因型串联重复序列聚类分析
- 健康联合体综合防治结核病模式实践研究
- 刘晓俊张培徐勇吴周志姜生涛刘幼昆周萍袁凤花程云舫程德明刘军杨夕缘余云芳余枫华张晓雷方正超谭芳陈军陈丹王春燕
- 研究背景：结核病疫情依然严峻，诊疗研究却进展缓慢。中国是全球结核病高负担国家之一，肺结核患者数量位居第三位，同时也是耐多药高负担国家，位居世界第一位。据世界卫生组织《全球结核病控制2010年报》估算：中国耐多药结核病患者...
- 关键词：
- 关键词：结核病显微镜诊断
