于文功
- 作品数：145 被引量：495H指数：12
- 供职机构：中国海洋大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程农业科学更多>>
- 一种AHL降解菌株的高效筛选方法被引量：2
- 2007年
- 酰化高丝氨酸内酯化合物(acyl-homoserine lactone,AHL)是革兰氏阴性细菌(G-)群体感应的信号分子。本文建立1种从环境微生物中高效地筛选AHL降解菌株的方法。首先利用AHL作为唯一能源对环境微生物进行初筛,再利用顶层琼脂法和报告菌株Chromobacterium violaceumATCC 12472、Agrobacterium tumefaciensA136等进行复筛,共筛选得到21株具有AHL降解活性的菌株。对其中活性最高的菌株A11进行初步的菌种鉴定,通过形态观察、16S ribosomal RNA(16S rDNA)基因分析最终确定为假单胞菌属细菌Pseudomonassp.A11。
- 史晓宫倩红于文功王为善魏岚
- 条斑紫菜叶状体细胞的抗生素敏感性研究被引量：17
- 2002年
- 为了进行条斑紫菜基因工程研究和培育转基因紫菜 ,首先必须确定适合的阳性选择标记基因。条斑紫菜对 8种抗生素的敏感性试验表明 ,它对各种抗生素的敏感性不同 ,其中 zeocin、腐草霉素和氯霉素半致死剂量都很低。因此 Cat(氯霉素乙酰转移酶 )基因和 Sh.ble(sh.bleomycin)基因均有望成为条斑紫菜基因工程研究中理想的选择标记基因。
- 张亚萍于文功戴继勋路新枝韩峰宫倩红
- 关键词：条斑紫菜氯霉素抗生素人工养殖
- 一种β－琼胶酶基因agaB及其制备方法和应用
- 一种β－琼胶酶基因agaB，其特征在于它是编码假别单胞菌CY24的β－琼胶酶的基因。本发明的β－琼胶酶基因agaB编码的β－琼胶酶能够特异性地降解琼胶产生聚合度为8－14的新琼寡糖，每种主要新琼寡糖在降解产物中的含量大于...
- 于文功马翠萍路新枝韩峰褚艳石超
- 文献传递
- 具有细菌群体感应抑制活性海洋来源真菌的筛选鉴定被引量：4
- 2011年
- 许多致病菌的致病机制依赖于群体感应系统的调控,经实验证明群体感应系统突变或缺失的菌株致病能力显著下降,筛选高效的群体感应抑制剂有望成为解决细菌感染以及细菌耐药性问题的一个有效途径。从海洋软体动物体内分离海洋真菌69株,发酵液粗提物经QSIS2(Quorum Sensing Inhibitor Selector 2)筛选模型和紫色杆菌CV026指示菌株筛选后得到编号QY013的粗提物具有群体感应抑制活性,进一步实验表明该粗提物能够显著降低铜绿假单胞菌群体感应调控的毒力因子绿脓菌素的产量,以及紫色杆菌群体感应调控的紫色菌素的产量,且在有效浓度范围内对细菌生长不产生影响。形态学特征和18S rDNA序列分析表明菌株QY013为Penicillium属。文中筛选到一株具有细菌群体感应抑制活性的海洋来源真菌,其发酵液粗提物中的有效活性成分可用于新型抗菌药物的研究。
- 尹守亮常亚婧邓苏萍王清池于文功宫倩红
- 关键词：海洋真菌
- 海藻酸裂解酶突变体
- 本发明涉及基因工程和蛋白质工程改造技术领域，具体涉及一种海藻酸裂解酶突变体。本发明以野生型海藻酸裂解酶ALE为基础，提供了包含S60T和/或T419N突变位点的突变体。与野生型海藻酸裂解酶相比，所述海藻酸裂解酶突变体的比...
- 李玉强于文功韩峰
- 一种来源于海鞘的抗炎寡肽及其在制备药物中的应用
- 本发明提供了一种来源于海鞘的抗炎寡肽及其在制备药物中的应用，属于海洋生物医药技术领域，具体为一种来源于海鞘的抗炎寡肽，所述寡肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述来源于海鞘的抗炎寡肽在制备药物中的应用；本发明首...
- 杨静于文功韩峰顾玉超
- 利用DNA重组技术构建产生多聚甘露糖醛酸的突变菌株被引量：1
- 2006年
- 本文旨在以海洋细菌Pseudomonas sp．QDA褐藻多糖（alginate）生物合成操纵元中的algG基因为靶点，利用DNA重组技术改建褐藻多糖的生物合成途径，以期获得产生甘露糖醛酸的突变菌株。首先，利用PCR克隆幽G基因两侧大小分别为1．7kb和1．8kb的DNA片段作为同源片段，用编码Gm抗性的aacCl基因替换algG基因，构建成打靶载体pEX100TUDG。将打靶载体转入QDA，利用Gm抗生素和蔗糖为选择压力进行培养，通过PCR和Southern杂交验证，获得了突变菌株。^1H—NMR、PAGE和GPC分析发现，突变菌株胞外产物为多聚甘露糖醛酸。该突变菌株的获得丰富了具有较高药物开发价值的甘露糖醛酸的来源，为褐藻多糖途径工程的进一步研究提供了理论依据和技术支持。
- 沈洪波韩峰林育姿韩文君于文功
- 关键词：假单胞菌
- 一种新的弧菌科弧菌属菌株及其应用
- 本发明涉及一种新的弧菌科弧菌属菌株及其应用。具体地，本发明涉及一种从海带糜烂物中分离的新的弧菌科弧菌属菌株，利用该菌株制备褐藻胶裂解酶，其产量为现有技术的2～5倍。制备的褐藻胶裂解酶可以用于制备广泛应用的褐藻胶寡糖。
- 于文功韩峰
- 文献传递
- 一株海洋高产壳聚糖酶菌株Renibacterium sp．QD1的筛选鉴定及产酶研究被引量：2
- 2013年
- 目的:获得高产壳聚糖酶菌株。方法:利用唯一碳源法富集产壳聚糖酶菌株,并利用平板水解圈和酶活力检测进行复筛。利用PCR克隆16S rDNA基因进行种属鉴定。利用SDS-PAGE凝胶原位复性鉴定野生菌株产壳聚糖酶的数量和大小。利用单一变量法进行发酵条件的初步优化。结果:获得了一株高产壳聚糖酶菌株,对该菌株的16S rDNA序列进行比对和分析发现该菌株属于Renibacterium属,将该菌命名为Renibacterium sp.QD1。SDS-PAGE电泳和凝胶原位复性结果显示,该菌株能产生一种胞外壳聚糖酶,分子量大小在25ku左右。对其发酵条件进行初步优化,用成分为壳聚糖(0.50%)、KH2PO4(0.10%)、K2HPO4(0.20%)、MgSO4(0.07%)、NaC(l0.10%)、CaCl2(0.01%)、酵母粉(0.05%)、马铃薯浸粉(%)、蛋白胨(0.2%)的培养基发酵,其粗酶活力可达400U/mL,比文献报道的活力最高的Microbacterium sp.OU01高近4倍。结论:获得了一株高产壳聚糖酶菌株,该菌株的发现为壳寡糖的制备提供了新的工具。
- 邢培川刘丹于文功路新枝
- 关键词：壳聚糖酶
- 海洋紫色杆菌β-琼胶酶的分离纯化及性质被引量：8
- 2008年
- 从青岛近海海水中分离得到一株高产琼胶酶的海洋紫色杆菌SY12.紫色杆菌SY12的发酵液上清经硫酸铵沉淀,凝胶过滤层析,离子交换层析和凝胶过滤层析等蛋白纯化步骤,得到纯化的野生琼胶酶AgaY.琼胶酶纯化了133.63倍,酶比活力为320.7 U/mg;纯化的琼胶酶经SDS-PAGE检测,显示为单一条带,其相对分子质量约为50×103.研究结果表明琼胶酶AgaY降解琼脂糖的β-1,4-糖苷键,其主要产物为新琼四糖和新琼二糖.对AgaY进行酶学性质研究,发现其最适反应pH为7.0,最适反应温度为40℃;Hg2+,Ag+,Zn2+,Cu2+和Pb2+等金属离子可以显著的抑制琼胶酶AgaY的活力.研究发现,AgaY的催化活性不依赖于离子的存在,AgaY对EDTA不敏感.
- 时岩玲于文功路新枝
- 关键词：Β-琼胶酶分离纯化
