严泉剑
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 辅助肾小管装置免疫调节机理研究被引量：5
- 2004年
- 目的 研究辅助肾小管装置参与全身免疫调节的机理。方法 分别用感染患者持续血液滤过(continuousvenovenoushemofiltration ,CVVH)超滤液和脂多糖 (LPS)干预培养人肾小管上皮细胞系HKC细胞 ,用RT -PCR、ELISA检测IL - 10转录水平和蛋白水平表达变化 ,用”transwell”方法检测IL - 10在HKC细胞内的转位特点。结果 RT -PCR、ELISA结果显示 ,HKC细胞暴露于感染患者CVVH超滤液或含LPS培养液后 ,IL - 10转录水平升高 ,上清中IL - 10蛋白水平升高。”transwell”方法检测发现IL - 10向两侧分泌。结论 辅助肾小管装置中的HKC可以通过表达IL - 10 ,参与全身免疫调节。
- 严泉剑陈香美吴镝谢院生付博张利李志辉张宇梅马志芳卢英杰申力军刘秀娟孙雪峰
- 生物人工肾小管上皮种子细胞的建立被引量：1
- 2008年
- 目的利用人Nanog基因转染生物人工肾的种子细胞（肾近曲小管上皮细胞HKC），提高其增殖能力，在较短时间内获得大量种子细胞，为克服肾脏组织工程种子细胞来源的匮乏及生物人工肾的快速构建提供新途径。方法制备含有人Nanog基因的复制缺陷型重组腺相关病毒血清2型病毒颗粒rAAV2-hNanog，用rAAV2-hNanog转染肾小管上皮细胞，然后采用RT-PCR检测hNanog基因在转染的肾小管上皮细胞中的表达，再用MTT、免疫荧光及激光共聚焦技术检测hNanog基因对肾小管细胞HKC生长的影响。结果rAAV2-hNanog转染肾小管上皮细胞后，RT-PCR检测表明hNanog基因能在肾小管上皮细胞中稳定表达；同时，小管上皮细胞在转染后的增殖能力也显著增强（P〈0．05）。光镜下观察发现，转染的小管上皮细胞的形态无明显改变。结论利用hNanog基因提高生物人工肾小管种子细胞的增殖能力，可为生物人工肾的快速构建及应用提供一种新的方法。
- 黄大伟傅博陈香美孙雪峰谢院生蔡广研严泉剑
- 关键词：种子细胞转染
- 辅助肾小管装置通过IL-10参与免疫调节
- 目的研究辅助肾小管装置(RAD)通过分泌IL-10参与全身免疫调节的机理。方法制备RAD,收集感染病人持续血液滤过(continuous venovenous hemofiltration,CVVH)血滤超滤液,体外模拟...
- 严泉剑陈香美吴镝付博张利张宇梅马志芳卢英杰申力军孙雪峰
- 文献传递
- 小鼠抗人Nanog多克隆抗体的制备及其鉴定被引量：5
- 2006年
- 目的用基因免疫方法制备小鼠抗人Nanog多克隆抗体并进行鉴定。方法应用Accelrys软件分析Nanog抗原表位，选择其中免疫原性较强的抗原表位（A16-V101），从Nanog cDNA全长质粒中扩增其cDNA（258bp）序列，克隆到pBQAP-TT构建基因免疫载体，鉴定正确后与辅助载体pCMVi-GMCSF和pCMVi-Fh31。同时免疫小鼠，12周后用ELISA方法检测血清抗体滴度，Western blot方法鉴定抗体对人肾组织的特异性。同时将Nanog-AAV2病毒转染到HKC细胞，免疫荧光定位Nanog在细胞的表达。结果成功构建了Nanog基因免疫载体，经酶切及序列分析鉴定完全正确。ELISA结果显示抗体滴度为1：32000。Western blot结果显示小鼠抗Nanog多克隆抗体识别人肾组织34kD的Nanog蛋白。免疫荧光结果表明转染的Nanog基因主要表达在HKC细胞细胞核。结论用基因免疫的方法可以成功制备高效价和高特异性抗Nanog多克隆抗体。
- 许国双陈香美孙雪峰吴镝严泉剑师锁柱洪权吕扬
- 关键词：基因免疫多克隆抗体
