韩捷
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：暨南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学自动化与计算机技术更多>>
- 构建的Flt3L胞外域原核表达载体在大肠杆菌中的表达被引量：1
- 2008年
- 目的:构建含组氨酸标签的FMS样酪氨酸激酶3配体(Fms-like tyrosine kinase 3 ligand,Flt3L)胞外域蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达。方法:依据Flt3L基因序列设计引物,以RT-PCR的方法从小鼠脾脏总RNA中克隆Flt3L基因并构建其胞外域原核表达载体,测序鉴定后在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中诱导表达,用免疫印迹鉴定。结果:克隆到Flt3L编码区全长序列,经DNA测序证明与已报道的序列相同;构建羧基端带有His6标签的Flt3L胞外域蛋白的原核表达载体,转化大肠杆菌后SDS-PAGE分析显示在BL21(ED3)中获得较高表达;免疫印迹分析表明IPTG诱导后表达的Flt3L胞外域蛋白的相对分子质量(Mr)为19 000,与理论值相符,此蛋白与抗His6标签的抗体发生特异性反应。结论:成功克隆Flt3L基因,构建其胞外域蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得表达。
- 卢宏松徐丽慧施焕敬韩捷何贤辉
- 关键词：原核表达组氨酸标签
- 抗人PD-1高亲和力抗血清的制备及其在PD-1免疫印迹分析中的应用
- 2008年
- 利用纯化的可溶性人PD-1胞外域(sPD-1)蛋白为免疫原免疫小鼠,获得抗血清.免疫印迹显示该抗血清与原核表达的sPD-1有特异性反应,但与某些菌体蛋白存在交叉反应.经菌体蛋白吸附法处理后,交叉反应明显减弱.以商业化抗人PD-1抗体和小鼠sPD-1抗血清分析经亲和层析富集的活化的Jurkat T细胞表达的PD-1,只有自制的抗血清鉴定到特异反应条带,其表观分子质量为49 ku.
- 施焕敬徐丽慧韩捷卢宏松何贤辉
- 关键词：JURKAT抗血清免疫印迹
- 分泌型Survivin真核表达载体的构建及其在HeLa细胞中的表达被引量：1
- 2008年
- 目的:构建含6个组氨酸标签(His6)的小鼠存活素(Survivin)融合蛋白的真核表达载体,及其在真核细胞中的表达。方法:根据小鼠Survivin序列设计引物,经过RT-PCR克隆Survivin的cDNA并进一步构建分泌型Sur-vivin的真核表达载体,经测序鉴定后在大肠杆菌中扩增在HeLa细胞中表达;以金属离子螯合层析富集,再用免疫印迹法鉴定。结果:克隆到Survivin编码区全长序列,经DNA测序后证明与已报道序列相同。构建氨基端融合小鼠IL-2信号肽,羧基端带有His6标签的Survivin融合蛋白的真核表达载体,在HeLa细胞中转染成功并且表达;细胞上清经HisTrap HP柱层析富集后,进行免疫印迹分析,表明该融合蛋白以分泌型方式在HeLa细胞中表达。结论:成功克隆Survivin的cDNA,并构建其分泌型真核表达载体。
- 韩捷施焕敬徐丽慧卢宏松何贤辉
- 关键词：存活素真核表达分泌型肿瘤相关抗原
- 基于Survivin的肿瘤DNA疫苗的构建及鉴定
- 目的: 肿瘤的免疫治疗是一种有前途的疗法,肿瘤DNA疫苗是肿瘤免疫治疗的一种重要策略之一。存活素(survivin)是一种肿瘤相关抗原,在多种肿瘤细胞中过表达。本研究的目的是构建基于含6个组氨酸标签(His)的小鼠存活素...
- 韩捷
- 关键词：存活素真核表达分泌型肿瘤相关抗原DNA疫苗
- 文献传递
