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陈宁虹
作品数:
3
被引量:5
H指数:2
供职机构:
山东中医药大学
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发文基金:
山东省自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
毕宏生
山东中医药大学附属眼科医院
马晓华
山东中医药大学附属眼科医院
郭媛媛
山东中医药大学附属眼科医院
郭大东
山东中医药大学附属眼科医院
刘兵
山东中医药大学附属眼科医院
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机构
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山东中医药大...
作者
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陈宁虹
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郭大东
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1篇
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α-硫辛酸对高压条件下培养大鼠视网膜神经节细胞的保护作用
被引量:2
2012年
目的观察α-硫辛酸对高压条件下培养大鼠视网膜神经节细胞(RGc)的保护作用。方法将RGC分为正常对照组、阴性对照组、单纯加压组、加压联合不同浓度α-硫辛酸干预组。正常对照组和单纯加压组不做任何处理;阴性对照组仅接受200μmol/L α-硫辛酸预处理;加压联合不同浓度的α-硫辛酸干预组分别用50、100、200μmol/L等3种不同浓度的α-硫辛酸对其进行干预。α-硫辛酸预处理1h后,单纯加压组和各干预组置于50mmHg(1mmHg=0.133kPa)下培养24h;正常对照组、阴性对照组置于常压下培养24h。分别用噻唑蓝比色法检测各组细胞的活性;4,6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)染色观察各组细胞核形态改变;实时聚合酶链反应(Real—timePCR)及蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测并比较各组细胞中锰超氧化物歧化酶(MnSOD)mRNA和蛋白表达水平的变化。结果单纯加压组细胞活性为(65.64-3.4)%,50、100、200μmol/L3种浓度的α-硫辛酸干预组细胞活性分别为(75.14-3.3)%、(81.8±2.9)%、(87.9±3.1)%,均较单纯加压组显著增高(t=5.108、10.007、12.513,P〈0.05)。DAPI染色显示,加压后RGC-5细胞核可见空泡、染色质高度凝聚、边缘化等典型的凋亡特征,而α-硫辛酸干预组仅有部分细胞核染色质表现出浓缩现象。Real—timePCR及Westernblot检测结果显示,加压培养后细胞内MnSODmRNA和蛋白相对表达量较正常对照组显著降低(t=22.045、26.979,P%0.01);与单纯加压组相比,α-硫辛酸干预组细胞内MnSODmRNA和蛋白相对表达量均显著增高,差异有统计学意义(t=9.171、12.267、23.567、7.723、12.009、28.198,P〈0.05);不同浓度的α-硫辛酸干预组之间,随α-硫辛酸浓度增加,MnSODmRNA和蛋白相对表达量呈升高趋势,且差异有统计学意义(F=134.273、194.597,P〈0.0
刘兵
郭大东
毕宏生
郭媛媛
陈宁虹
马晓华
关键词:
动物实验
青光眼手术治疗方法进展
被引量:1
2011年
开角型青光眼外科手术根据手术过程中前房角的损伤情况可将其分为非穿透性手术(非穿透小梁手术、真空小梁成形术、Schlemm管成形术)、微穿透性手术(小管内Eyepass植入术、GMS金阀睫状体上腔植入术、内路小梁切开术、iStent微支架植入术、EX—PRESS植入术)和穿透性手术三大类。激光手术包括内窥镜下睫状体光凝术、选择性激光小梁成形术、准分子激光小梁切开术以及飞秒激光辅助的手术等。本文对这些手术治疗方法的原理、操作方法、适应证及主要效果等进行简要综述。
陈宁虹
马晓华
毕宏生
关键词:
眼压
激光手术
紫杉醇对人Tenon囊成纤维细胞增生的抑制作用及机制
被引量:2
2014年
背景人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)的异常增生是导致抗青光眼滤过手术失败的主要原因。寻找抑制HTFs增生的药物对抑制青光眼术后功能性滤过泡的瘢痕化有重要意义。目的观察紫杉醇对体外培养的HTFs增生、凋亡、细胞周期以及基质金属蛋白酶-1(MMP-1)表达的影响。方法收集抗青光眼滤过术中切除的人眼Tenon囊组织,用组织块培养法培养HTFs并进行传代,取3~6代细胞用于实验。采用小鼠抗人角蛋白抗体、小鼠抗人波形蛋白抗体、小鼠抗人结蛋白抗体、小鼠抗人S-100抗体行免疫组织化学染色鉴定培养的HTFs。在培养基中分别加入0、1×10^-8、1×10^-8、1×10^-6mol/L紫杉醇,采用实时细胞电子分析系统(RT—CES)观察不同浓度紫杉醇作用后HTFs的细胞指数变化;采用DAPI染色法观察各组细胞的凋亡情况;用流式细胞术检测不同浓度紫杉醇作用后HTFs各细胞周期比例;采用实时定量PCR(real—timePCR)和ELISA法检测各组HTFs中MMP-1mRNA和蛋白的表达量,分别以MMP-1mRNA/GAPDHmRNA和MMP-1蛋白质量浓度(μg/L)表示。结果组织块原代培养7d内可见细胞游出,呈长梭形和不规则三角形,培养的细胞抗波形蛋白抗体染色阳性,而抗角蛋白抗体、抗结蛋白抗体和抗S-100抗体染色阴性。培养基中加入紫杉醇作用24h后,1×10^-8、1×10^-7、1×10^-6mol/L紫杉醇组平均细胞指数值分别为1.09±0.191、0.665±0.093和0.473±0.117,均明显低于0mol/L紫杉醇组的1.514±0.283,差异均有统计学意义(均P=0.000);紫杉醇作用后,HTFs的细胞核内可见呈DAPI蓝色荧光的颗粒状物质,荧光强度随着紫杉醇浓度的增加而增强。l×10^-8、1×10^-7、1×10^-6mol/L紫杉醇分别作用12h后,G,/M期HTFs的比例分别为(9.20±0.80)%、(12.37±0.45)%和(13.80±0.35)%,明显高于0mol/L紫杉醇组的(7.17±0.5
陈宁虹
毕宏生
郭大东
郭媛媛
杜然然
马晓华
关键词:
紫杉醇
TENON囊
细胞学
成纤维细胞
细胞学
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