郑文争
- 作品数：8 被引量：47H指数：4
- 供职机构：中山大学附属第三医院更多>>
- 发文基金：广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 结核分枝杆菌katG基因突变对异烟肼耐药性的影响被引量：4
- 2014年
- 目的探讨结核分枝杆菌katG基因突变TGG328TTT(Trp328Phe)对异烟肼耐药性的影响。方法以结核分枝杆菌标准株H37Rv和临床突变株DNA为模板,采用PCR扩增野生型和双突变型(含Trp328Phe与Met420Thr)katG基因,采用重叠延伸PCR技术构建单突变型(Trp328Phe)katG基因。将各katG基因重组至质粒pET22b(+),再导入表达宿主菌BL21(DE3)pLySs中,IPTG诱导目的蛋白表达,亲和层析法对重组KatG蛋白进行分离纯化。通过各重组KatG蛋白与过氧化氢和邻联大茴香胺反应,检测受试菌过氧化氢酶和过氧化物酶的活性。结果成功获得纯化的KatG蛋白。相比野生型KatG(19.05U/mg和7.05×10-3 U/mg),单突变型KatG(10.50U/mg和2.23×10-3 U/mg)过氧化氢酶和过氧化物酶活性分别下降44.9%和68.3%,双突变型KatG(11.88U/mg和3.31×10-3 U/mg)则分别下降37.6%和53.0%。结论 katG基因(Trp328Phe)突变引起KatG酶活性部分缺失,与异烟肼耐药有关,可作为耐药菌株基因检测的标志用于基因芯片的开发。双突变时KatG蛋白活性较高,提示katG-328TTT具有代偿性突变的作用。
- 郑文争张天托朱家馨袁小亮黄育波黄静彭宣宪
- 关键词：结核分枝杆菌KATG基因异烟肼耐药性
- 江西省结核分枝杆菌耐二线抗结核药的分子学特征被引量：3
- 2013年
- 目的初步明确江西省耐二线抗结核药相关基因突变的特征,评价等位基因特异性多重PCR(multiplex allele-specific polymerase chain reaction,MAS-PCR)检测二线抗结核药耐药性的可行性。方法采用DNA测序方法和MAS-PCR技术,对江西省52株耐二线抗结核药的结核分枝杆菌进行耐药相关基因突变位点检测。结果DNA测序分析:39株耐氧氟沙星(Ofx)菌株中,32株存在gyrA基因错义突变,2株发生gyrB基因错义突变。29株耐卡那霉素(Km)或卷曲霉素(Cm)菌株中,22株为rrs1401位点A→G突变。52株耐二线抗结核药的结核分枝杆菌,40株为北京基因型(76.92%,40/52),其中17株北京基因型菌株发生gyrA-GAC94GGC突变(42.50%,17/40),19株北京基因型菌株发生rrs-A1401G突变(47.50%,19/40)。北京基因型与基因突变类型gyrA-GAC94GGC和rrs-A1401G无明显相关性(χ2=1.16、1.92,P值均>0.05)。MAS-PCR检测Ofx耐药株的敏感度为61.54%(24/39),检测Km或Cm耐药株的敏感度为79.31%(23/29)。结论gyrA基因94位密码子突变是江西省结核分枝杆菌Ofx耐药的主要机制;rrs-A1401G突变则是Km或Cm耐药的主要原因。MAS-PCR方法对于快速检测二线抗结核药的耐药性有一定的临床应用价值。
- 袁小亮张天托朱家馨郑文争雷建平涂少华罗一钧刘惟优
- 关键词：分枝杆菌结核抗生素类抗结核卡那霉素聚合酶链反应
- ICU与非ICU鲍氏不动杆菌耐药性和耐药基因比较分析
- 2024年
- 目的回顾性分析重症监护病房(ICU)与非ICU鲍氏不动杆菌分离株的耐药性、耐药基因及外排泵基因表达差异,为临床合理使用抗菌药物和多药耐药菌的防控提供科学依据。方法对来自于2009年1月-2014年3月中山大学附属第三医院住院患者下呼吸道感染的鲍氏不动杆菌分离株213株按照来源分为ICU组(82株)和非ICU组(131株),对上述分离株进行耐药性检测,同时检测耐药基因(OXA-23、OXA-24、OXA-48、OXA-51、OXA-58、OXA-143、OXA-235、NDM-1、KPC、IMP、VIM、GIM-1、SPM-1、SIM-1、FIM-1、ISAba1和ISAba4)和外排泵基因(adeB、adeJ、adeG、craA、abeM和amvA)、外膜蛋白基因(omp25、omp33-36、carO)的表达。结果与非ICU组鲍氏不动杆菌分离株比较,ICU分离株对亚胺培南有更高的耐药率(达到90.2%),差异具有统计学意义(χ^(2)=7.117,P=0.008);耐药基因OXA-51检出率在ICU组和非ICU均超过95%,OXA-23、VIM在ICU组和非ICU组检出率分别是80.0%vs.60.3%(P=0.007),50.0%vs.29.0%(P=0.002);未检出OXA-48、OXA-143、OXA-235、KPC、NDM-1及SIM-1基因;ICU组和非ICU组相比,adeB相对表达量比较有统计学差异(P<0.05)。结论ICU和非ICU组来源的鲍氏不动杆菌对亚胺培南耐药性、耐药基因(OXA-23、VIM)和外排泵基因adeB表达存在统计学差异,提示ICU鲍氏不动杆菌耐药性高可能是上述多种耐药机制的结果。
- 黄育波郑文争朱家馨杨海玲吴文斌周宇麒张天托
- 关键词：鲍氏不动杆菌耐药重症监护病房耐药基因外排泵
- 医院获得性肺炎患者醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合体的鉴定和耐药基因研究被引量：11
- 2015年
- 目的:了解我院医院获得性肺炎患者下呼吸道分离的醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合体的菌种鉴定方法和耐药性,探讨其耐药机制。方法:收集2009-2014年临床分离的醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合体共318株,用K-B法进行药敏试验,用gyr B多重PCR法对其进行菌种鉴定,检测碳青霉烯酶及金属β-内酰胺酶耐药基因。结果:318株醋酸钙-鲍曼不动杆菌复合体鉴定为鲍曼不动杆菌298株、不动杆菌基因种型3为5株、不动杆菌基因种型13TU 8株。对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦的不敏感率分别为78.0%、89%、92.1%。OXA型碳青霉烯酶基因OXA-51、OXA-23、OXA-24、OXA-58检出率分别为91.2%、65.7%、1.3%、3.8%;金属β-内酰胺酶基因IMP、VIM、GIM-1、SPM-1检出率分别为0.9%、34.6%、6.3%、0.9%;未检测到OXA-48、OXA-143、SIM-1、KPC、NDM-1等基因。结论:gyr B多重PCR法是一种快速、特异性高、可靠的鉴定鲍曼不动杆菌的方法。鲍曼不动杆菌对多种抗生素呈现高度耐药。我院鲍曼不动杆菌耐药性主要与OXA-23、VIM等耐药基因的表达有关。
- 黄育波张天托朱家馨郑文争吴文斌李惠彭宣宪
- 关键词：鲍曼不动杆菌金属酶耐药
- 多重耐药鲍曼不动杆菌外排泵与外膜蛋白表达水平分析
- 2023年
- 目的分析鲍曼不动杆菌对常用抗生素的敏感性,检测外排泵基因和外膜蛋白基因的表达水平,探讨上述基因表达与抗生素耐药之间的关系。方法选择下呼吸道标本分离的鲍曼不动杆菌共213株,对其进行菌种鉴定、药敏试验;根据药敏试验将其分为不敏感组(NS组)与敏感组(S组),应用荧光定量PCR检测外排泵基因(adeB、adeJ、adeG、craA、abeM、amvA)、外膜蛋白基因(omp25、omp33-36、carO)的表达水平,比较上述基因在NS组与S组表达水平的差异。结果鲍曼不动杆菌对阿米卡星、亚胺培南不敏感率分别为89.2%、81.2%,对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、庆大霉素等药物的不敏感率均超过92%。adeB基因相对表达量升高(RE≥1)在各抗生素(AMK、IPM、CFP、FEP、TZP、CAZ、SXT、CIP、SCF、CN)NS组的比例高于S组,差异有统计学意义(P<0.05)。外排泵adeB基因mRNA的RE值在上述各抗生素NS组和S组之间差异有统计学意义(P<0.05),NS组adeB基因的RE值平均水平较高。外排泵adeJ、adeG、craA、abeM、amvA基因平均RE水平无升高,且经比较分析差异无统计学意义(P>0.05)。外膜蛋白omp25、omp33-36、carO基因平均RE值均超过1.0,提示相对表达量升高。结论本院鲍曼不动杆菌对多种抗生素耐药率较高。外排泵基因adeB过度表达在本院鲍曼不动杆菌耐药中起着重要作用;其余外排泵基因adeJ、adeG、craA、abeM、amvA和外膜蛋白基因omp25、omp33-36、carO在本研究的多数菌株耐药机制中可能不起作用。
- 黄育波周宇麒郑文争朱家馨杨海玲吴文斌张天托
- 关键词：鲍曼不动杆菌耐药外排泵外膜蛋白
- AECOPD住院患者3个月内再住院相关风险评估模型的建立被引量：12
- 2019年
- 目的回顾分析慢性阻塞性肺病急性加重(AECOPD)住院患者3个月内再住院治疗的危险因素,加强对患者临床特征的认识,并建立风险评估模型评估其短期再住院风险。方法回顾性分析2007年1月至2013年10月中山大学附属第三医院呼吸内科AECOPD住院患者的临床资料,按照出院后3个月内是否再住院将患者分为两组,采用SPSS软件分析两组在人口学、临床症状、体征、实验室检查等方面的差异,寻找患者再入院危险因素及建立logistic风险评估预测模型。结果纳入的患者中3个月内再住院组90例,未再住院组493例,统计学分析发现年龄、合并房颤、肺炎性病变、高碳酸血症、主肺动脉直径大小,体温升高等指标是AECOPD患者3个月内再住院的独立危险因素,并建立logistics预测模型,获得AECOPD住院患者3个月内再住院的风险预测方程。该模型ROC曲线下面积为0.694(95%CI:0.655~0.732),最佳截断值P=0.2075时,模型敏感度为0.511,特异度为0.826。结论本研究分析了与AECOPD住院患者3个月内再住院相关的临床危险因素,并建立其风险评估模型,为评估此类患者预后和提供干预措施提供临床依据。
- 李文娟周宇麒杨海玲刘玉颖王娜娜郑文争张天托
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病急性加重再住院风险评估模型
- 呼吸系统感染高毒力肺炎克雷伯杆菌的临床和分子特征被引量：8
- 2018年
- 目的了解呼吸系统感染高毒力肺炎克雷伯杆菌(hvKP)的临床特征、常用抗生素的耐药性和分子特征。方法收集中山大学附属第三医院2016年8月至2017年8月呼吸系统感染患者分离的62株肺炎克雷伯杆菌作为实验菌株,分析病例的临床特征,采用药敏实验检测菌株耐药性,利用PCR检测菌株的毒力质粒和耐药质粒的分布。结果 62株呼吸系统感染肺炎克雷伯杆菌中11株是hvKP,检出率为17.7%,其中1株hvKP发生迁徙感染,hvKP感染成人患者的最高体温为(38.6±0.9)℃,其中63.6%(7/11)的患者表现为中高热,而普通肺炎克雷伯杆菌(cKP)感染成人患者的最高体温为(37.8±0.9)℃,其中60.9%(28/46)的患者表现为低热或无发热。hvKP感染成人病例平均年龄(53.3±13.1)岁,低于cKP感染成人病例平均年龄(65.6±18.6)岁,66.7%(6/9)hvKP感染病例胸部CT表现为结节渗出阴影或脓肿,cKP感染病例中25.6%(11/43)胸部CT表现结节渗出阴影或脓肿。所有(11/11)hvKP菌株都含有毒力质粒pLVPK的部分基因rep、rmpA或iuc,其中毒力质粒pLVPK特有序列rep只存在于hvKP菌株。hvKP菌株对大部分抗生素敏感,目前未发现含有耐碳青霉烯质粒KPC-2基因的hvKP菌株,hvKP菌株均对碳青霉烯类抗生素敏感。结论呼吸系统感染的hvKP病例临床特征有别于cKP病例,hvKP菌株对大部分抗生素敏感性高并含有毒力质粒pLVPK基因,但未发现含有耐药质粒KPC-2的hvKP菌株,指导临床可使用碳青霉烯类抗生素治疗hvKP感染。
- 叶李铭黄静吴本权郑文争孟平朱家馨张天托
- 关键词：克雷伯杆菌肺炎毒力基因高毒力
- 老年医院获得性肺炎患者临床特征及死亡危险因素分析被引量：9
- 2020年
- 目的通过分析老年医院获得性肺炎(hospital acquired pneumonia,HAP)患者临床特征及死亡危险因素等,为临床早期干预、早期决策提供依据,以改善预后,降低病死率。方法纳入我院自2014年1月1日至2018年1月1日诊断的老年HAP患者病例,回顾性分析其病历资料,并将其分为生存组和死亡组,分析其临床特征及死亡相关危险因素等。结果497例HAP患者入组,50%~60%有发热、咳嗽、咳脓痰症状,9.7%有呼吸困难症状,常合并脑血管病、糖尿病等,血尿素氮/白蛋白平均比值为(0.224±0.157)mmol/g,21.5%存在多重耐药菌感染,48.9%有发病前90 d内使用抗生素史。死亡例数为76例(15.3%)。经Cox回归分析发现,有咳脓痰、呼吸困难症状、发病前90 d使用抗生素史、既往有放化疗病史、多重耐药菌感染、血尿素氮/白蛋白水平升高是老年HAP患者死亡的相关危险因素。血尿素氮/白蛋白水平的ROC曲线下面积为0.703。高血尿素氮/白蛋白比值的HAP生存期明显低于对照组。结论老年HAP症状不典型,合并症多,常存在多重耐药菌感染,且病死率高。血尿素氮/白蛋白比值是HAP患者死亡的独立危险因素,值得临床医生重视。
- 吴文斌杨海玲朱家馨郑文争冯定云张天托
- 关键词：医院获得性肺炎老年人
