赵美眯
- 作品数:38 被引量:149H指数:7
- 供职机构:中国医科大学药学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目辽宁省普通高等教育本科教学改革研究项目更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学更多>>
- 心肌Cav1.2钙通道NT片段的提取纯化及其与CaM的相互作用被引量:1
- 2017年
- 目的探讨心肌Cav1.2钙通道NT蛋白片段提取与纯化的方法,并研究其与CaM的相互作用。方法将NT的cDNA插入pGEX-6p-3质粒载体后,转化大肠杆菌BL-21感受态细胞,大量培养并利用异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导NT的GST融合蛋白表达,GS-4B beads分离纯化,Pre Scission蛋白酶切除GST标签,进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDSPAGE)检测蛋白纯度和相对分子质量。采用GST pull-down实验研究NT片段与Ca M的相互作用。结果 SDS-PAGE结果显示成功纯化获得NT蛋白片段,且具有较高的纯度。GST pull-down实验结果显示NT可与Ca M结合,且具有浓度依赖性。结论本研究成功制备与纯化了心肌Cav1.2钙通道NT蛋白片段,为深入研究蛋白相互作用及NT的生物学功能奠定了基础。
- 苏敬阳邵冬雪雷明康泽赵君方涵田郭凤赵美眯郝丽英封瑞
- 关键词:NT纯化CAMGS
- 注射异丙肾上腺素建立大鼠心肌肥厚模型被引量:6
- 2017年
- 目的采用异丙肾上腺素诱导心肌肥厚,建立大鼠模型,并研究该动物模型的基本特性。方法大鼠背部皮下注射剂量为5 mg/kg的异丙肾上腺素,每日1次,连续注射14 d。结果模型组大鼠的全心重/体质量,左心室重/体质量均明显增加。模型组大鼠血清中羟脯氨酸(HYP)含量显著增加。模型组大鼠心肌组织中总超氧化物歧化酶(SOD)含量与对照组相比显著降低,而丙二醛(MDA)含量明显升高。结论皮下注射异丙肾上腺素14 d,可成功诱导大鼠心肌肥厚模型,为深入研究心肌肥厚的确切机制奠定基础。
- 赵美眯李卓杨艳张翀翯陈思充曾晓荣郝丽英
- 关键词:心肌肥厚异丙肾上腺素动物模型
- PBL结合Seminar教学法对临床药学专业学生学习能力的培养被引量:28
- 2015年
- PBL结合Seminar教学方法首次应用于临床药学专业药物毒理学的教学。90名学生平均分为传统教学组、PBL教学组与PBL结合Seminar教学组三组,应用评估量表来评价教学效果。与传统教学组和PBL教学组相比,PBL结合Seminar组学生的学习主动性、沟通能力以及分析问题、解决问题等学习能力显著提高。PBL结合Seminar教学方法能够提高教学效果和学生的学习能力。
- 郭凤封瑞张阳胡慧媛赵美眯孙雪菲孙宝志郝丽英
- 关键词:PBLSEMINAR药物毒理学
- Ca_v1.2钙通道GST-CT1蛋白片段与胞浆钙调蛋白提取纯化的比较被引量:3
- 2016年
- 目的对比分析心肌Ca_V1.2钙通道片段GST-CT1融合蛋白与胞浆钙调蛋白(calmodulin,CaM)提取与纯化方法的异同。方法将pGEX-6p-3/CT1和pGEX-6p-3/CaM重组质粒转入E.coli BL21菌株,筛选得到转化成功的菌株并用IPTG诱导其表达,GS-4B beads分离纯化,SDS-PAGE凝胶电泳鉴定目的蛋白及其相对纯度,Pull down assay方法鉴定GST-CT1融合蛋白和CaM蛋白的生物学活性。结果采用超声破碎法,应用N-laurylsarcosine和Triton X-100处理后提取的GST-CT1融合蛋白浓度和纯度显著高于未用两者处理的对照组,而N-laurylsarcosine和Triton X-100对胞浆蛋白CaM的提取和纯化无明显影响。结论细胞膜通道蛋白GST-CT1的提取和纯化方法与胞浆蛋白Ca M存在明显差别。
- 晏珊封瑞杨磊孙宇王千慧郭凤赵美眯孙雪菲郝丽英
- 关键词:钙通道钙调蛋白
- 细胞内高镁对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的调节作用
- 目的研究细胞内高镁对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的影响及其作用机制。方法利用Langendroff灌流装置,采用胶原酶法急性分离单个豚鼠心室肌细胞。应用膜片钳技术,采用细胞贴附模式和膜内面向外模式记录单个L型钙通道电流,观察...
- 赵美眯于丽凤连雯雯邵冬雪曾本清孙雪菲封瑞郝丽英
- 关键词:心室肌细胞钙通道
- 小剂量过氧化氢对大鼠心肌细胞钙瞬变及凋亡的作用
- 2014年
- 目的:探讨小剂量过氧化氢导致的氧化应激对大鼠心肌细胞钙瞬变及细胞凋亡的作用。方法:解剖取出成年大鼠心脏,应用langendorff方法分离心肌细胞,加入fluo-3荧光指示剂后,应用不同浓度的过氧化氢作用于心肌细胞,在共聚焦显微镜下测定心肌细胞内钙瞬变。分离并培养新生大鼠心肌细胞,观察过氧化氢处理心肌细胞后其形态的变化,从而评价小剂量过氧化氢对心肌细胞的凋亡作用。结果:应用0.125 mmol/L、0.25 mmol/L及0.375 mmol/L的过氧化氢作用于心肌细胞后,心肌细胞内钙瞬变幅度明显升高,并呈时间剂量依赖性。在培养的大鼠原代心肌细胞中加入0.25 mmol/L的过氧化氢后,心肌细胞发生凋亡的形态变化。结论:小剂量过氧化氢可开放心肌细胞L-钙通道,明显增加心肌细胞内钙瞬变,并导致心肌细胞凋亡。
- 王昊李玉泽王成福赵美眯孙英贤王丽娟
- 关键词:过氧化氢心肌细胞钙瞬变凋亡
- Cav1.2钙通道片段CT1融合蛋白的制备及生物学活性鉴定被引量:4
- 2013年
- 目的诱导表达Cav1.2钙通道片段CT1与谷胱甘肽转移酶(GST)重组的融合蛋白并进行纯化和鉴定。方法将pGEX6p 3/CT1重组质粒转化入E.coli BL21中并诱导表达,采用非离子去污剂B per的方法分离纯化GST CT1融合蛋白,使用Western blot技术鉴定GST CT1融合蛋白,pull down assay实验方法检测GST CT1融合蛋白的生物学功能。结果非离子去污剂B per能够成功分离纯化GST CT1融合蛋白,识别此片段的特异性抗体能够检测到GST CT1融合蛋白;制备获得的GST CT1融合蛋白具有与钙调蛋白结合的生物学功能。结论技术简单、操作快速的非离子去污剂B per能够分离纯化具有生物学功能的GST CT1融合蛋白。
- 封瑞胡慧媛郭凤于丽凤赵美眯龟山正树郝丽英
- 关键词:融合蛋白钙通道片段
- 豚鼠钙调蛋白2基因编码区及3'端非编码区序列分析
- 2015年
- 目的比较分析豚鼠CaM2基因编码区及3'端非编码区序列,获得丰富的豚鼠CaM2基因生物遗传学信息。方法基因测序获得豚鼠CaM2基因编码区及3'端非编码区序列,通过genebank数据库获得不同种属CaM核苷酸序列,采用DNASTAR软件对CaM2不同部位序列进行多序列的比较分析。结果豚鼠CaM2基因编码区与人、小鼠和大鼠的同源率分别为96.7%、91.4%和90.5%,与人、小鼠、大鼠的CaMl和CaM3基因编码区序列的同源率在80%-85%之间。豚鼠CaM2基因3'端非编码区序列与人、小鼠和大鼠的同源率分别为94.2%、93.3%和90.0%,与人、小鼠、大鼠的CaM3基因3'端非编码区序列的同源率分别为26.8%、29.2%和25.9%,与CaMl的同源率在25%-63%之间。结论豚鼠CaM2基因编码区具有种属和亚型较高同源性特征,而CaM2基因3'端非编码区虽在不同种属中具有很高同源性,但在不同种属与其它亚型比对中同源性较低。
- 封瑞刘彦胡慧媛郭凤赵美眯赵金生郝丽英
- 关键词:钙调蛋白同源性
- 蛋白磷酸酶参与豚鼠心肌L-型钙通道run-down机制的研究
- 目的探讨蛋白磷酸酶(protein phosphatase,PP)是否参与豚鼠心肌L-型钙通道的run-down过程及其可能的作用机制。方法通过采用胶原酶法分离豚鼠心肌细胞、膜片钳单通道记录手段和蛋白纯化技术,在膜片钳内...
- 于丽凤赵美眯封瑞郝丽英
- 关键词:钙通道磷酸酶
- 藻酸双酯钠对2型糖尿病心血管并发症防治作用的研究被引量:3
- 2008年
- 目的观察藻酸双酯钠(PSS)对2型糖尿病并发的心血管疾病危险因素的影响,并探讨其可能机制。方法高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素(STZ 20mg·kg-1)制作2型糖尿病Wister大鼠模型,并将其随机平均分为5组:正常对照(NC)组、模型(Mod)组、藻酸双酯钠(PSS)组、二甲双胍(Met)组、洛伐他汀(Lov)组,并给予相应的药物治疗8wk。实验过程中观察血糖、血脂的变化;发色底物法检测血清中组织纤溶酶原激活物(t-PA)、组织纤溶酶原激活抑制物(PAI-1)的活性;22wk后处死大鼠,取其主动脉,透射电镜观察主动脉的超微结构;免疫组织化学及Western blot方法检测动脉内核转录因子(NF-κB)及细胞间粘附分子(ICAM-1)的表达水平。结果PSS组的空腹血糖(FBG)、血脂(TG、TC、LDL)水平及PAI-1的活性均明显低于模型组(P<0.05),而t-PA的活性则明显高于模型组(P<0.05);同时PSS组NF-κB和ICAM-1的表达比模型组明显减少(P<0.05);PSS组主动脉损伤明显轻于模型组。结论藻酸双酯钠能抑制2型糖尿病大鼠并发的心血管疾病的发生、发展,其机制可能与其降低血糖、血脂水平,改善t-PA和PAI-1的活性,抑制核因子NF-κB的活化及细胞间粘附分子ICAM-1的表达有关。
- 于丽凤赵金生于龙赵美眯齐贺李智
- 关键词:藻酸双酯钠2型糖尿病心血管并发症核转录因子细胞间粘附分子组织纤溶酶原激活物