范盼红
- 作品数：7 被引量：22H指数：3
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- miR-140通过下调Smad3表达抑制结肠癌细胞迁移和侵袭能力被引量：5
- 2014年
- 目的探讨miR．140对结肠癌RKO细胞迁移和侵袭能力的影响及其调控机制。方法将miR-140模拟物、miR-140特异性抑制物和Smad3小干扰RNA（siRNA）等分别通过脂质体转染至细胞，应用实时荧光定量PCR（real-timePCR）检测细胞中miR-140和Smad3mRNA的表达，应用Westernblot检测Smad3蛋白的表达。采用细胞划痕实验和Transwell小室模型检测miR-140上调、miR．140下调和Smad3下调对RKO细胞迁移和侵袭能力的影响。结果Westernblot结果显示，上调miR-140后，miR-140组中Smad3蛋白的相对表达水平为0．04±0．01，低于空白对照组（0．47±0.02）和阴性对照组（0．52±0．06，均P〈0．05）。real-timePCR检测结果显示，miR-140组中Smad3mRNA表达水平为1．11±0．13，与阴性对照组（1．00±0．06）比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。细胞划痕实验显示，miR．140转染细胞的迁移能力均低于空白对照组和阴性对照组，而与Smad3siRNA组比较，迁移能力无明显改变。Transwell小室迁移实验显示，miR-140组的穿膜细胞数为76．2±4．4，低于空白对照组（267．1±4．9）和阴性对照组（336．1±5．7，均P〈0．05），而与Smad3siRNA组（83．54-7．3）比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。Transwell小室侵袭实验显示，miR-140组的穿膜细胞数为109．54-7．4，低于空白对照组（403．1±5．1）和阴性对照组（392．6±8．4，均P〈0．05）；而与Smad3siRNA组（138．8±3．6）比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。miR-140下调可使Smad3蛋白表达增高，部分逆转miR-140对细胞迁移和侵袭能力的抑制作用。miR-140抑制剂和Smad3siRNA共转染则对Smad3蛋白表达和细胞的迁移和侵袭能力无明显影响。结论miR-140在转录后水平调控Smad3的表达。miR-140抑制结肠癌细胞迁移和侵袭能力，可能是通过下调Smad3来实现。miR-140可能作为肿瘤转移诊断及治疗的潜在候选靶点。
- 赵文月邹佳芮王波范盼红毛俊李嘉芝刘涵肖晶马威王梅李连宏宋波
- 关键词：结肠肿瘤微RNASSMAD3蛋白肿瘤侵润
- 乳腺癌中干细胞标志物ALDH1及VHL/HIF-1α的表达及意义被引量：10
- 2013年
- 目的探讨乙醛脱氢酶1(acetaldehyde dehydrogenase 1,ALDH1)、缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)及希佩尔林道(Von Hippel-Lindau,VHL)在乳腺癌中表达的关系及意义。方法采用免疫组化SP法分别检测15例乳腺正常组织、30例乳腺增生组织及40例乳腺浸润性导管癌组织中干细胞标志物ALDH1、HIF-1α及VHL的表达。结果 (1)AL-DH1、HIF-1α及VHL在乳腺正常组织、乳腺增生组织、乳腺浸润性导管癌组织中阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。(2)Spearman等级相关分析显示VHL与HIF-1α、肿瘤病理分级、临床分期、肿块大小、淋巴结转移呈负相关;HIF-1α与肿瘤病理分级、临床分期、肿块大小、淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。(3)HIF-1α与ALDH1在乳腺癌中的表达有相关性(r=0.976,P=0.001),VHL与ALDH1在乳腺癌中的表达有相关性(r=0.971,P=0.001)。结论乳腺癌中存在ALDH1、HIF-1α、VHL的异常表达,三者在乳腺癌发生、发展、侵袭和转移中可能具有重要作用。VHL/HIF-1α信号通路可能与肿瘤干细胞生长和分化密切相关。
- 王洪海李连宏毛俊王波马威范盼红侯震寰
- 关键词：乳腺肿瘤ALDH1VHLHIF-1Α
- 下调Smoothened基因抑制乳腺癌干细胞生长的相关机制被引量：2
- 2013年
- 目的利用短发夹RNA（shRNA）下调Smoothened（SMO）基因的表达，研究SMO对乳腺癌干细胞增殖的影响。方法设计针对人SMO基因的shRNA，转染人乳腺癌MCF-7细胞系，G418筛选出稳定下调SMO基因的细胞株。体外：活细胞计数试剂盒（CCK8）检测细胞增殖的变化，流式细胞仪检测CIM4＋／CD24-乳腺癌干细胞比例，悬浮球培养检测乳腺球形成的能力，Westernblot检测SMO、GLIl及Oct4的表达。体内：每3天检测各组裸鼠成瘤情况，免疫组织化学SP法检测SMO的表达，Westernblot检测SMO、GLIl及Oct4蛋白的表达。结果21d后筛选出稳定下调SMO基因的MCF-7细胞。CCK8结果显示下调SMO基因可以抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖。流式细胞仪显示下调SMO基因后，CD44＋／CD24-细胞和乳腺癌干细胞球形成的比例明显降低。下调后裸鼠的肿瘤生长速度下降。免疫组织化学检测显示阴性对照组中SMO阳性表达比例为5／5，SMO．shRNA组阳性比例为2／5。两组肿瘤组织中SMO的蛋白表达水平分别为0．72±0．17和0．21±0．09，GLIl的蛋白表达水平分别为1．21±0．21和0．47±0．12，Oct4的蛋白表达水平分别为0．83±0．13和0．25±0．07。SMO、GLI-1和Oct4在SMO—shRNA组中的表达明显低于阴性对照组（P〈0．05）。结论下调SMO基因可以抑制乳腺癌干细胞的增殖。
- 毛俊范盼红马威张晴晴王波范姝君李连宏
- 关键词：乳腺肿瘤肿瘤干细胞
- Genistein和乳腺癌干细胞PTKs信号转导通路的研究进展被引量：1
- 2013年
- 饮食中的genistein在降低亚洲人乳腺癌的发病率上有很重要的作用。最新研究表明genistein抑制乳腺癌细胞生长是通过调节细胞的增殖、分化和凋亡等相关信号转导通路来完成的。乳腺癌干细胞可能是乳腺癌发生耐药、复发及转移的根源。近年来发现乳腺癌干细胞相关信号转导通路复杂且涉及面广泛,其中蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinases,PTKs)信号转导通路在癌干细胞中的异常过表达,是引起癌基因转化、肿瘤生长的重要因素之一。因此,Genistein和乳腺癌干细胞相关的PTKs信号转导通路之间的关系也越来越受到关注,对寻找更为有效的乳腺癌靶向治疗具有重要意义。
- 范盼红李连宏
- 关键词：GENISTEIN乳腺癌干细胞乳腺癌
- 金雀异黄素诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的研究被引量：4
- 2013年
- 目的探讨金雀异黄素(genistein,GEN)诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的分子机制。方法用0、5、10、20μmol/L GEN处理MDA-MB-231细胞24 h。采用CCK-8、Hoechst 33342染色和流式细胞仪测定不同浓度GEN对MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响。采用Western blotting检测不同浓度GEN处理前后MDA-MB-231细胞中Fas相关死亡域蛋白(FADD)、活性半胱天冬酶8(cleaved caspase-8)、Fas、FasL蛋白表达水平。采用实时RT-PCR分析不同浓度GEN处理前后MDA-MB-231细胞中Fas、FasL基因表达水平。多组均数比较采用方差齐性检验后进行单因素方差分析。结果在GEN作用24 h后,0、5、10和20μmol/L组对MDA-MB-231细胞增殖的抑制率分别为(3.00±1.41)%、(14.02±1.57)%、(27.5±1.52)%、(48.90±1.44)%。与0μmol/L组相比,5、10和20μmol/L组呈浓度依赖性增加(F=528.119,P=0.000)。两两比较显示:各浓度组之间差异均有统计学意义(P<0.05)。0、5、10和20μmol/L组诱导MDA-MB-231细胞的早期凋亡率分别为(3.40±0.40)%、(9.34±1.34)%、(19.26±0.93)%、(27.41±1.12)%。与0μmol/L组相比,5、10和20μmol/L组呈浓度依赖性增加(F=379.573,P=0.000)。两两比较显示:各浓度组之间差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blotting结果显示,与0μmol/L组相比,其他浓度组经GEN处理的MDA-MB-231细胞FADD、cleaved caspase-8、FasL蛋白表达升高(F=368.621、456.744、419.129,P均=0.000),Fas蛋白表达差异无统计学意义(F=0.800,P=0.528);与10μmol/L组相比,20μmol/L组FasL蛋白表达降低有统计学意义(F=92.235,P=0.001)。实时RT-PCR结果显示,与0μmol/L组相比,其他浓度组经GEN处理的MDA-MB-231细胞FasL mRNA表达升高(F=646.983,P=0.000),Fas mRNA表达差异无统计学意义(F=1.556,P=0.274);与10μmol/L组相比,20μmol/L组FasL mRNA表达降低有统计学意义(F=52.562,P=0.020)。结论 GEN通过上调Fas/FasL途径中FasL基因表达诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡。
- 王欢卢陈嘉马威毛俊范盼红赵文月王露李连宏
- 关键词：细胞凋亡金雀异黄素FAS
- Genistein对乳腺癌干细胞的影响及机制的研究
- 研究背景与目的:2013年的最新统计显示全世界女性每一年死于乳腺癌的人数大于癌症总死亡人数的15％，乳腺癌成为女性最常见的恶性肿瘤，严重威胁全球女性的健康。原发肿瘤病灶包含一般的肿瘤细胞和肿瘤干细胞，肿瘤干细胞具有干细胞...
- 范盼红
- 关键词：乳腺癌信号转导通路肿瘤干细胞动物模型
- 文献传递
- Genistein对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨Genistein对高侵袭性乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖、侵袭和转移能力的影响。方法采用CCK-8实验和流式细胞技术研究Genistein对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响;细胞侵袭和迁移实验结合Western blot检测Genistein作用前后细胞内基质金属蛋白酶2(MMP-2)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的变化,研究其对乳腺癌细胞侵袭和迁移能力的影响及可能的作用机制。结果 CCK-8实验结果显示:Genistein处理乳腺癌MDA-MB-231细胞24-h,可明显抑制癌细胞增殖,IC50为18.7μmol/L。流式细胞技术检测细胞周期显示:经相同处理的乳腺癌MDA-MB-231细胞,处于S期的比例显著下降。细胞侵袭实验和迁移实验结果显示:随着Genistein浓度的增加,侵袭和迁移的细胞数量逐渐减少,差异有统计学意义(P<0.05)。Western-blot 结果显示:Genistein处理后可降低MMP-2和VEGF蛋白的表达。结论 Genistein可抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,降低其侵袭和迁移能力,其可能的机制是降低乳腺癌MDA-MB-231细胞MMP-2和VEGF的表达。
- 范盼红赵文月邹佳芮马威张晴晴李连宏
- 关键词：GENISTEIN基质金属蛋白酶2血管内皮生长因子
