白龙川
- 作品数:11 被引量:14H指数:2
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 具有广泛抑制人免疫缺陷病毒(HIV)活性的两种cDNA及其在原核中的表达、分离、纯化方法
- 本发明涉及两种能抑制人免疫缺陷病毒(HIV-1)活性的cDNA,包括这两种cDNA的分离克隆,体外突变,在原核中的融合表达以及该cDNA在制备治疗病毒、肿瘤的制剂中的应用。所述的cDNA中一种是从植物中国商陆叶片中分离、...
- 彭小忠白龙川阴彬金鑑周严胡晓燕韩春雨邵一鸣袁建刚强伯勤
- 文献传递
- 反义多聚TAR对人免疫缺陷病毒Ⅰ型TAT蛋白活性的抑制作用
- 1997年
- 以HIV-1TAR(Trans-acting response element)的PCR引物为自身模板,用PCR法直接扩增得到多拷贝的TARDNA同向串连体;构建了以HIV-1LTR(-158~+80)片段为启动子,含有4,8和15个拷贝的TAR DNA反义表达质粒;以荧光素酶基因为报告基因,检测了瞬时共转染体系中不同拷贝数的反义TARDNA转录产物对Tat反式激活作用的抑制作用。结果表明,反义多聚TAR RNA对Tat活性具有很强的抑制作用,其抑制程度与反义TAR串联体的拷贝数有关。
- 白龙川袁建刚阴彬强伯勤
- 关键词:艾滋病毒蛋白活性
- 人免疫缺陷病毒1型TAT突变蛋白及反义TAT RNA对TAT反式激活作用的抑制被引量:2
- 1997年
- Tat(Transactivator)是人免疫缺陷病毒(HIV)基因组编码的反式激活因子,突变分析表明它含有几个重要的功能域。为寻找控制HIV复制的途径,构建了以HIV-1LTR(-158-+80)为启动子的TatcDNA全长反义表达质粒pAS-Tat,并用已经构建的以HIVLTR-158到+80为启动子,具有不同突变点的突变Tat基因表达质粒,以荧光酶基因为报告基因,共转染Jurkat细胞,结果发现无论是反义Tat表达质粒还是突变Tat表达质粒,在瞬时转染体系中均能不同程度地抑制Tat的活性,其中以pM5(52位Arg由Leu替代)和反义TatRNA的抑制效果最好。结果说明。
- 白龙川袁建刚强伯勤
- 关键词:RNA
- HIV-1 Tat蛋白定点突变的分子动力学模拟被引量:1
- 1999年
- HIV 1Tat的Cys富集区、核心区和碱性氨基酸富集区是高度保守的 ,并且对于Tat反式激活作用至关重要 .用分子动力学模拟的方法构建了HIV 1Tat蛋白在上述 3个区域进行定点突变的 6种突变体的三维结构 ,分析了突变体的结构变化 。
- 崔岩凌伦奖陈润生白龙川袁建刚强伯勤
- 关键词:分子动力学定点突变TAT蛋白HIV-1
- 利用PCR构建多拷贝HIV-1 TAR序列的串联体被引量:9
- 2001年
- 建立“自身引物—模板”PCR方法 ,并应用此方法成功地扩增了多拷贝HIV 1TAR片段的同向串联体。此方法简便 ,省力 ,可用于多拷贝基因探针、多拷贝反义基因片段、多拷贝抗原表位的扩增和克隆。
- 阴彬白龙川袁建刚
- 人免疫缺陷病毒1型TAT蛋白点突变对其反式激活作用的影响被引量:1
- 1996年
- 不同免疫缺陷病毒(HIV-1,HIV-2和SIV)的Tat均有3个高度保守的结构域:Cys富集域、核心域和碱性氨基酸富集域,用PCR定点突变法在HIV-1Tat蛋白的这些区域引入单氨基酸或多氨基酸突变;构建了以HIV-1LTR-158到+8O区域为启动子,含有不同突变点的突变Tat基因表达质粒;以荧光酶基因为报告基因,瞬时共转染Jurkat细胞:分析不同氨基酸突变对Tat的反式激活作用的影响。结果发现,突变后的Tat蛋白的活性均极大地降低或丧失,表明这些序列内的氨基酸的确定性对Tat的活性至关重要。
- 白龙川袁建刚陈菊凤屠郑强伯勤
- 关键词:艾滋病毒定点突变TAT蛋白
- Tat和TAR对人免疫缺陷病毒HIV-1基因表达的调控研究
- 2000年
- 目的为了寻找能够阻断HIV-1复制的方法,探索控制HIV-1蔓延的第二代基因治疗的新途径。方法采用自身引物一模板PCR得到了含有TAR核心序列(+11到+47)的多聚TAR-Core DNA同向串联体。结果所有这些抗性基因策略均能对病毒的复制产生较好的抑制作用。结论 TAT蛋白序列中氨基酸的替换使活性改变,与其三维结构的变化间有一定的相关性。
- 白龙川
- 关键词:艾滋病毒基因表达TATTAR
- 多聚TAR-CoreRNA诱饵对人免疫缺陷病毒1型Tat蛋白活性的抑制作用
- 1998年
- 为了抑制Tat蛋白的反式激活作用,在细胞内大量表达外源TARRNA使其与Tat蛋白结合,从而竞争性抑制其与HIV-1LTR的TARRNA元件结合.构建了以HIV-1LTRYL158(-158~+180)为启动子,分别含有4,8和15个拷贝的TAR-CoreRNA诱饵(decoy)表达质粒;以荧光酶基因为报告基因,检测了瞬时共转染体系中含不同拷贝数的TAR-CoreDNA转录产物对Tat蛋白反式激活作用的影响.结果证明,TAR-CoreRNA诱饵对Tat蛋白活性具有很强的抑制作用,其抑制程度与TAR-CoreDNA串联体的拷贝数有关.
- 白龙川袁建刚杜光伟强伯勤
- 关键词:人免疫缺陷病毒TATRNA诱饵
- 反显性突变Tat蛋白抑制人免疫缺陷病毒1型的复制
- 1999年
- Tat(Transactivator)蛋白是人免疫缺陷病毒HIV基因组编码的反式激活因子。为了进一步研究M5 Tat和M6 Tat蛋白对HIV病毒复制的抑制作用,将可被Tat调控的启动子YL158替换基因治疗中常用的逆转录病毒载体LNCX中的CMV启动子,构建了表达上述反显性Tat蛋白的逆转录病毒载体,随后导入双向性包装细胞PA317细胞中,用产生出的复制缺陷病毒感染MT4 T淋巴细胞.用HIV-1病毒攻击稳定表达有M5和M6 Tat蛋白的MT4细胞;结果显示,M5和M6 Tat蛋白均能抑制低剂量的HIV-1病毒的复制。
- 白龙川胡松年赵全壁邵一鸣强伯勤
- 关键词:人免疫缺陷病毒TAT蛋白
- TD TAT和反义TAR对HIV复制的抑制作用
- 袁建钢白龙川
- 关键词:受体基因心肌重塑