王恒伟 作品数:19 被引量:93 H指数:6 供职机构: 北京市朝阳区疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 北京市朝阳区科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 轻工技术与工程 理学 更多>>
居民冰箱食源性致病菌病原学分析 被引量:3 2021年 目的了解北京市朝阳区居民冰箱卫生状况及食源性致病菌耐药与毒力分析。方法采集居民冰箱拭子进行大肠菌群、葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌分离鉴定;分离菌株采用微量肉汤稀释法、纸片法及PCR法进行耐药及毒力研究。结果 120件棉签拭子,大肠菌群、葡萄球菌阳性率48.33%(58/120)、49.17%(59/120),金黄色葡萄球菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌阳性率2.50%(3/120)、1.67%(2/120),未检出单核细胞增生李斯特氏菌。金黄色葡萄球菌红霉素耐药率33.33%(1/3);凝固酶阴性葡萄球菌青霉素、红霉素耐药率23.21%(13/56)、21.43%(12/56)。小肠结肠耶尔森氏菌头孢唑林耐药率50%(1/2)。金黄色葡萄球菌毒力基因seb阳性率66.67%(2/3),sea、sec、sed、see与耐药基因mec A、van A阴性;凝固酶阴性葡萄球菌mec A阳性率1.69%(1/59),sea、seb、sec、sed、see、van A阴性。小肠结肠炎耶尔森氏菌毒力基因ail、yst A、vir F、yad A阴性,yst B阳性。结论北京市朝阳区居民冰箱卫生状况差,存在食源性疾病传播风险,应加强冰箱正确使用宣传教育。 郝民 宋衍燕 王恒伟 田甜 邵希凤 孙灵利关键词:食源性致病菌 毒力基因 耐药性 2009—2020年北京市朝阳区113株食源性金黄色葡萄球菌耐甲氧西林和肠毒素/类肠毒素基因携带与分子分型分析 被引量:4 2022年 目的了解北京市朝阳区2009—2020年113株食源性金黄色葡萄球菌甲氧西林耐药、肠毒素/类肠毒素基因携带和分子分型情况。方法采用纸片扩散法进行头孢西丁药物敏感性实验,结合mec A基因扩增鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA);实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,QR-PCR)检测28种金黄色葡萄球菌肠毒素/类肠毒素(staphylococcal enterotoxins/enterotoxin-likes,SEs/SEls)基因;采用脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)和多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)进行分子分型。结果检出7株MRSA(6.19%、7/113);所有菌株至少携带1种肠毒素/类肠毒素基因,最多携带14种,共检出24种肠毒素/类肠毒素基因;经典sea~see肠毒素基因携带率为0%~33.63%。MLST共24型,ST1、ST398、ST7、ST59为优势型;发现ST6656、ST6688、ST6709、ST6745、ST67545个新型别。PFGE共分25型,H型(11/113)、I型(9/113)、J型(29/113)是优势分型,占比43.36%。结论本地区食源性金黄色葡萄球菌MRSA菌株分离率低于临床株;PFGE分型结果中J、H、I 3种优势型占比近半,显示本地区食源性金黄色葡萄球菌优势菌株集中;优势ST型别主要与医院、社区感染和动物相关。新发现5个ST型别;肠毒素/类肠毒素携带与ST型别存在一定关联性;ST1-MSSA-sea-seh-sek-seq-selw-selx是优势株;仅检测5种经典肠毒素不能代表金黄色葡萄球菌引起食物中毒的致病因子,应扩大肠毒素检测范围。 王琦 郝民 王恒伟 邵希凤 宋衍燕关键词:金黄色葡萄球菌 肠毒素 脉冲场凝胶电泳 多位点序列分型 柠檬酸杆菌属基质辅助激光解析电离飞行时间质谱图谱库的扩展及效果评价 2021年 目的扩展基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)中柠檬酸杆菌属数据库。方法采用PCR方法扩增并测序管家基因leuS进行系统发育分析鉴定菌种;采用平行对照实验优化菌株培养和样品制备条件;按照自建库方法手动采集优化培养后的菌株谱图,构建实验室内部数据库,并进行灵敏度与特异度评价。结果经系统发育分析,有7个种共66株柠檬酸杆菌。最佳培养条件为哥伦比亚血平板做培养基、转种1次、培养24 h,甲酸溶液体积25μL。新增沃克曼氏柠檬酸杆菌和巴氏柠檬酸杆菌2个菌种谱图,补充中国株弗氏、布氏、吉氏、杨氏、无丙二酸柠檬酸杆菌等5个菌种本地区谱图。结论leuS基因可以有效区分柠檬酸杆菌属菌种,MALDI-TOF图谱库的扩展提升了质谱对本地区柠檬酸杆菌属菌种鉴定准确性。 王恒伟 孔凡旭 郝民 田甜 邵希凤 宋衍燕关键词:系统发育分析 北京市朝阳区2011年儿童A组溶血性链球菌超抗原基因的分子流行病学研究 被引量:8 2013年 目的描述2011年北京市朝阳区儿童A组溶血性链球菌(GAS)的超抗原分子流行病学特征,分析超抗原基因与emm型别和GAS相关疾病的关系。方法从猩红热、咽炎及扁桃体炎患儿的咽拭子分离培养获得71株GAS,应用PCR法检测这些GAS是否携带8类超抗原基因(speA、spel、$sa、speC、speJ、speG、spell和SMEZ);PCR扩增emm基因片段并测序,进行emm型别鉴定;分析超抗原基因、emm型别和GAS所致疾病之间的相互关系,应用,检验进行显著性分析。结果71株GAS的超抗原基因检出率从高到低分别为speC(100.0%)、SMEZ(100.0%)、s50(97.2%)、speG(95.8%)、speH(80.3%)、spel(80.3%)、speA(15.5%)和speJ(12.7%);71株GAS中检出emml2.0型菌株62株、emml.0型7株、emm22.0型1株、emm75.0型1株;spel和渺H基因与speA和speJ基因在emml2.0型与emml.0型菌株中的分布差异有统计学意义(P均〈0.05);spel和spetf基因在猩红热患儿和咽炎扁桃体炎患儿中的分布差异有统计学意义(P均〈0.05);未发现emm型别在不同的疾病中的分布有差异。结论北京市朝阳区儿童携带的GAS超抗原基因的检出率与地域有一定关系;不同emm型别的GAS对超抗原基因的携带有一定的选择性,尤其是针对噬菌体携带的超抗原基因;较emm型别,超抗原基因能更好地建立菌株与疾病之间的关系。 王海滨 尤元海 王恒伟 韩庆华 张玉松 赵剑虹 宋衍燕 闫笑梅 张晓曦关键词:A组溶血性链球菌 食品与环境中豚鼠气单胞菌系统发育分析以及毒力和耐药性研究 2020年 目的食品与环境中49株豚鼠气单胞菌菌种鉴定、毒力与耐药性检测。方法VITEK、API 20NE生化鉴定,gyrB、rpoD系统发育分析;PCR检测act、alt、ast、lip、ahp、aerA、hlyA、ompA1、fla基因;AST-GN16药敏试验。结果生化鉴定为豚鼠/嗜水气单胞菌株54株,经系统发育分析豚鼠气单胞菌49株,嗜水气单胞菌4株,中国台湾省气单胞菌1株。毒力基因alt、lip、ompA1、fla、act、aerA、hlyA检出率依次为100.00%、100.00%、79.59%、14.29%、2.04%、2.04%、2.04%,未检出ast、ahp;存在4种毒力基因组合,优势组合为alt/lip/ompA1(32/49)。豚鼠气单胞菌氨苄西林、头孢唑林、头孢西丁、阿莫西林/克拉维酸、头孢曲松、复方新诺明、安曲南耐药率依次为79.59%、14.29%、10.20%、6.12%、4.08%、4.08%、2.04%,哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、阿米卡星、庆大霉素、左氧氟沙星、替加环素、呋喃妥英均敏感;2株多重耐药菌株。结论gyrB、rpoD可有效鉴定豚鼠/嗜水气单胞菌,rpoD可区分近亲缘关系豚鼠与中国台湾省气单胞菌;所有豚鼠气单胞菌均携带2种以上毒力基因,1株环境源菌携带7种毒力基因;青霉素类普遍耐药,产生β-内酰胺酶是最主要耐药机制;未发现碳青霉烯类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类、四环素类、呋喃类耐药菌株;食品和生活饮用水存在多重耐药菌。 孔凡旭 郝民 王恒伟 田甜 邵希凤 宋衍燕关键词:豚鼠气单胞菌 嗜水气单胞菌 系统发育分析 毒力基因 耐药性 2011年北京市朝阳区儿童A组溶血性链球菌的emm基因分型及耐药性分析 被引量:12 2012年 目的了解2011年北京市朝阳区儿童感染A组溶血性链球菌(GAS)的emm基因分型及对红霉素和克林霉素的耐药情况及耐药基因谱的特点。方法从猩红热或咽峡炎及扁桃体炎儿童患者的咽拭子培养分离获得71株GAS,应用PCR扩增emm基因及红霉素耐药基因mefA、ermA、ermB和转座子基因Tn916;采用E-test法进行药敏试验并分析耐药情况。结果北京市朝阳区儿童感染GAS的emm12.0基因型占87.4%,其次为emm1.0型(9.8%)、emm22.0型(1.4%)、emm75.0型(1.4%);GAS对红霉素和克林霉素的耐药率为100%和95.8%,两种药物的交叉耐药率为95.8%;耐药基因ermA、ermB、mefA和转座子基因Tn916的携带率分别为5.6%、90.1%、4.2%和90.1%。结论北京市朝阳区2011年儿童感染GAS的主要流行株为emm12.0型,对红霉素普遍具有较高的耐药率且与克林霉素之间存在显著的交叉耐药;ermB基因是决定本地区2011年儿童感染GAS对红霉素耐药的重要基因;而Tn916转座子基因在GAS菌株间耐药基因扩散中起重要作用。 王海滨 温雯 王恒伟 李崇 韩庆华 张玉松 赵剑虹 郝民 王晨 宋衍燕 张晓曦 罗凤基关键词:链球菌 红霉素 耐药基因 北京市朝阳区外来人群风疹和流行性腮腺炎血清流行病学调查 被引量:7 2008年 近年来,随着人口流动性的逐年增加,北京市朝阳区风疹和流行性腮腺炎(流腮)发病逐渐呈现以外来人口为主的特点。为了解外来人群风疹和流腮抗体水平,及时发现免疫薄弱人群,有效控制风疹和流腮疫情,调查朝阳区外来人群的风疹和流腮抗体水平,结果报告如下。 罗凤基 刘方 张晓曦 张菁 王晨 王恒伟 张延关键词:风疹 流行性腮腺炎 抗体 沙门菌基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱方法研究 被引量:13 2017年 目的优化基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法对沙门菌鉴定的条件,研究不同前处理方法对MALDI靶板污染情况,建立安全高效的检测沙门菌的方法。方法应用MALDI-TOF-MS法对4株沙门菌标准菌株进行不同培养条件、样品前处理方式检验,确立优化的鉴定程序,对不同处理方式下MALDI靶板进行检测,采用优化的前处理方法对33株腹泻病人粪便标本中分离的沙门菌进行数据采集和图谱比对,所得鉴定结果与常规血清学分型结果比较。结果不同前处理方法、不同的培养基上沙门菌标准菌株均准确鉴定为沙门菌。33株沙门菌用MALDI-TOF-MS方法全部准确鉴定为沙门菌属,19株沙门菌在种的鉴定水平上与血清分型结果完全一致,14株沙门菌在种的鉴定水平上与血清分型结果不一致。不同前处理方法的MALDI靶板上均未发现细菌生长。结论 MALDI-TOF-MS方法能快速、简便、安全、准确鉴定属水平沙门菌,是一种有效的沙门菌检测鉴定的手段。 赵剑虹 高艳 李书明 张士尧 王恒伟 顾琳 韩庆华 焦洋 陈倩关键词:沙门菌 北京发现ST4821克隆群B群脑膜炎奈瑟菌 被引量:11 2014年 目的对2013年1月北京市1例流行性脑脊髓膜炎(流脑)死亡病例标本进行脑膜炎奈瑟菌检测,了解感染病原及分离菌株的分子流行病学特征。方法对患者脑脊液标本进行细菌分离培养,通过常规细菌学试验对分离菌株进行脑膜炎奈瑟菌鉴定、实时荧光定量-聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative PCR)方法检测患者脑脊液和抗凝血中脑膜炎奈瑟菌核酸,同时对鉴定的菌株进行多位点序列分型(MLST)分析、外膜蛋白PorA分型和FetA分型,以及体外药物敏感试验。结果从患者脑脊液和抗凝血标本中均检测到脑膜炎奈瑟菌种特异基因ctrA和血清群B特异基因siaD。从患者脑脊液中分离到1株可疑阳性菌,经实验确诊为B群脑膜炎奈瑟菌。PorA为P1.20,23-9,FetA为F1-91;多位点序列分型分析显示基因型为ST10051,属于ST4821序列群。该菌株对复方新诺明为中等耐药,对环丙沙星和四环素耐药,对青霉素、头孢噻肟、头孢曲松、左氧氟沙星、美罗培南、氯霉素、利福平等药物均敏感。从密切接触者咽拭子中未分离到脑膜炎奈瑟菌。结论该菌株经鉴定为B:P1.20,23-9:F1-91:ST10051(ST4821序列群)。北京地区人群中已经存在高致病性ST4821克隆群B群脑膜炎奈瑟菌,并引发死亡病例,提示应全面掌握本地区脑膜炎奈瑟菌健康人群携带情况及病例菌株分子流行病学资料,为流脑的预防控制提供实验室数据支撑。 董梅 赵剑虹 王恒伟 曾阳 黄芳 吴疆关键词:流行性脑脊髓膜炎 死亡病例 北京市朝阳区食物中毒相关金黄色葡萄球菌病原学分析 被引量:5 2020年 目的了解2017年北京市朝阳区11株食物中毒相关金黄色葡萄球耐药性、耐药基因、毒力基因及分子分型。方法依据GB4789.10-2016对甲、乙饭店留样食品、餐具及厨师手涂抹样品进行金黄色葡萄球菌分离鉴定;荧光定量PCR法检测耐药基因mecA、vanA与毒力基因sea、seb、sec、sed、see;纸片法与微量肉汤稀释法进行药物敏感性试验;脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)进行溯源分析。结果甲、乙饭店留样食品、餐具涂抹及厨师手涂抹样品共检出11株金黄色葡萄球菌。耐药基因mecA、vanA与毒力基因sea、seb、sec、sed、see均未检出。检出菌株对青霉素100%耐药,四环素、氯霉素耐药率分别为27.3%、9.09%,未发现耐甲氧西林金黄色葡萄球菌株。PFGE分型显示,甲饭店餐具涂抹菌株、手涂抹菌株及乙饭店所有菌株可为3种带型。结论甲乙饭店分别为两起由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒事件,皆为携带菌株的厨师污染餐具及食品引起,菌株具有较高耐药性。 郝民 王恒伟 邵希凤 田甜 宋衍燕关键词:食物中毒 金黄色葡萄球菌 耐药 毒力基因 脉冲场凝胶电泳