王君
- 作品数：41 被引量：168H指数：6
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市浦江人才计划项目上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学交通运输工程电子电信更多>>
- 低氧诱导因子-1α与椎间盘退变被引量：5
- 2015年
- 低氧诱导因子(HIF)-1α是一种介导哺乳动物细胞内低氧反应的核转录复合体,对细胞增殖、迁移及凋亡等有重要调节作用,且在椎间盘细胞中明显表达。椎间盘退变是引起临床上颈肩痛和腰背痛的主要原因,其早期主要特征为髓核细胞数量减少甚至消失、细胞外基质成分合成与降解平衡紊乱。髓核细胞处于低氧环境中,细胞内合成的HIF-1α对其存活有重要作用,因此HIF-1α可能与椎间盘退变密切相关。该文就HIF-1α与椎间盘退变研究进展作一综述。
- 孟祥超王君张兴凯
- 关键词：椎间盘退变髓核低氧诱导因子-1Α
- 单味中药对成骨相关基因表达的影响被引量：56
- 2004年
- 为比较常用接骨单味中药对体外培养成骨细胞成骨相关基因表达的影响。应用RT PCR方法观察常用接骨单味中药含药血清对体外培养成骨细胞成骨相关基因mRNA的表达。结果显示单味中药在促进成骨细胞中cbfal的表达以自然铜为最 ,其下依次为续断、当归、乳香、没药和地鳖虫 ,而骨碎补并没有促进cbfal的表达 ;在促进成骨细胞BMP 2的表达中以续断和骨碎补为最 ,依次为当归、自然铜和没药 ,但是地鳖虫和乳香并没有促进BMP 2表达的功能 ;在促进IGF的表达中 ,以乳香为最 ,依次当归、自然铜、续断 ,而骨碎补、地鳖虫和没药 ,却没有上调IGF的表达。表明单味接骨中药可影响成骨相关基因的表达 ,但不同药物作用的基因靶点不同。
- 冯伟傅文彧魏义勇张玥王君朱雅萍张凤华
- 关键词：细胞培养动物
- 三维标测和Lasso下导管消融治疗房颤的研究
- 目的：三维标测系统联合环状标测导管(Lasso导管)指导下环肺静脉消融实现肺静脉电学隔离治疗心房颤动(房颤)的有效性、安全性，单Lasso导管与双Lasso导管对于手术的影响，术后围手术期复发对于长期随访复发的预测意义以...
- 王君
- 关键词：房颤消融治疗三维标测
- 文献传递
- 静水压力刺激对人骨髓间充质干细胞成骨、成脂双向分化的影响被引量：7
- 2008年
- 目的研究短期和较长期的静水压力负荷对人骨髓间充质干细胞（BMSC）成骨或成脂的影响，并探讨细胞外信号调节激酶（ERK）1／2信号通路在其中作用。方法对BMSC施加40或80kPa的静水压强，分别持续1h或4h，然后加入10mmol／LU0126阻断ERK1，2信号通路，通过半定量RT—PCR和实时定量PCR方法检测成骨标志基因Cbfa1和骨钙素（OC）以及成脂标志性基因PPARγ2和Adipsin的mRNA表达水平。对BMSC施加40kPa的静水压刺激，每天作用4h，7d和14d后检测Cbfa1、OC、PPARγ2和Adipsin的mRNA表达水平，在3、7、14d通过组织化学染色和定量测定方法检测碱性磷酸酶的活性和表达量。结果40kPa压强的静水压连续刺激4h可以促进Cbfa1、OC的mRNA表达和抑制PPARγ2、Adipsin的mRNA表达。40kPa的静水压连续作用7d，仍表现为对BMSC的促成骨分化作用，然而连续作用14d后，则表现为促成脂分化作用。成骨诱导条件并不协同静水压的促BMSC成骨分化作用。而U0126并不能完全抑制BMSC对静水压刺激的反应。结论一定强度和作用时间的静水压刺激可以促进BMSC的成骨分化，但较长期的作用可能会促进成脂分化。成骨诱导培养条件与静水压的促BMSC成骨分化作用无协同作用。
- 何川邓廉夫杨庆铭梁静王君
- 关键词：间质干细胞骨生成成脂分化
- 不同氧环境中破骨细胞特异性基因的表达被引量：2
- 2014年
- 背景:课题组以往研究证实,氧浓度过低乃至处于低氧时(体积分数2%O2),破骨前体细胞的增殖及破骨细胞的分化和功能都受到抑制,但体外培养的破骨细胞在不同氧环境下的基因表达未见有相关报道。目的:实验拟观察不同氧环境下破骨细胞各特异性基因的表达规律,探寻氧环境改变影响破骨细胞分化的表达机制。方法:将破骨前体细胞株经质量浓度均为10μg/L的核因子κB受体活化因子配体和巨噬细胞集落刺激因子联合诱导成为成熟的破骨细胞,然后分别置于常氧、组织氧、低氧(体积分数20%,7%,2%)条件下培养,用抗酒石酸酸性磷酸酶染色检测破骨细胞形成的变化,并分别在培养第1-7天收集细胞,通过定量PCR方法检测核因子κB受体活化因子,肿瘤坏死因子受体相关因子6,抗酒石酸酸性磷酸酶,组织蛋白酶K基因mRNA的表达。结果与结论:低氧条件下抗酒石酸酸性磷酸酶阳性的破骨细胞数显著低于组织氧和常氧培养时形成的抗酒石酸酸性磷酸酶阳性细胞数(P<0.05)。不同氧环境下,破骨细胞中核因子κB受体活化因子mRNA的表达无明显改变,组织氧和常氧培养下肿瘤坏死因子受体相关因子6 mRNA的表达在培养第5天最高(P<0.05)。随着氧浓度的降低,抗酒石酸酸性磷酸酶和组织蛋白酶K mRNA表达时间延后,组织氧培养条件下此2者的表达可以保持在最高水平。结果证实,与常氧和低氧条件相比,破骨细胞在组织氧培养条件下培养时更易促进其分化,从而维持其活性和功能。
- 梁静周琦魏立胡方琼王君
- 关键词：破骨细胞骨组织构建抗酒石酸酸性磷酸酶核因子ΚB受体活化因子组织蛋白酶K
- 低氧诱导因子-1α和VHL对小鼠软骨内成骨过程的调控机制被引量：1
- 2009年
- 目的研究低氧诱导因子1α(HIF-1α)和von Hippel-Lindau(VHL)在成骨细胞水平对小鼠软骨内成骨过程的调控机制。方法以HIF-1α或VHL基因条件性敲除小鼠为实验对象,分别于4、8、12周龄时,采用组织化学染色观察、显微CT扫描、骨小梁面积测量、钙元素含量检测、四环素荧光双标记观察、Real-time PCR及Western blotting等方法,观察和比较基因敲除小鼠与野生型小鼠(对照组)软骨内成骨过程的差异。结果与野生型对照小鼠比较,HIF-1α基因敲除组小鼠在软骨内成骨过程中血管内皮生长因子(VEGF)表达减少,新骨形成速度减慢,钙元素含量和骨小梁面积减少(P<0.05);而VHL基因敲除组小鼠在软骨内成骨过程中VEGF表达增加,新骨形成速度加快,钙元素含量和骨小梁面积增加(P<0.001)。结论在小鼠软骨内化骨过程中,VHL/HIF-1α信号通路对VEGF表达具有调控作用,通过调节血管形成,最终影响骨量形成。
- 邵进邓廉夫齐进周琦王君魏立王晋申钱念东
- 关键词：低氧诱导因子-1ΑHIPPEL-LINDAU软骨内成骨
- 雷帕霉素对骨肉瘤干细胞和人骨肉瘤细胞中雷帕霉素靶蛋白传导通路的抑制作用及意义被引量：15
- 2013年
- 目的研究雷帕霉素对人骨肉瘤MG-63细胞和骨肉瘤干细胞中雷帕霉素靶蛋白（mTOR）传导通路的影响，探讨雷帕霉素应用于骨肉瘤联合化疗的可行性。方法体外培养人骨肉瘤MG-63细胞和骨肉瘤干细胞，采用免疫荧光技术检测骨肉瘤细胞球中Nanog和Oct4的表达。以0、20、50和100nmol／L雷帕霉素处理骨肉瘤干细胞和人骨肉瘤MG-63细胞，采用半定量PCR和定量PCR法检测不同浓度雷帕霉素处理后骨肉瘤干细胞和未经处理的骨肉瘤细胞中mTOR的表达；采用细胞计数盒8（CCK-8）法测定不同浓度雷帕霉素处理后人骨肉瘤MG-63细胞和骨肉瘤干细胞的增殖活性；倒置显微镜下观察不同浓度雷帕霉素处理后骨肉瘤干细胞的形态学变化。结果荧光显微镜下可见，骨肉瘤MG-63细胞球较致密的核心部分Nanog和Oct4呈阳性表达，提示成球的骨肉瘤细胞球有干细胞特性。半定量PCR检测结果显示，未经雷帕霉素处理的骨肉瘤干细胞中mTORmRNA的相对表达量为0．761±O．080，明显高于人骨肉瘤MG-63细胞（0．406±O．090，P〈0．05）。定量PCR检测结果显示，100nmol／L雷帕霉素处理组骨肉瘤干细胞中mTORmRNA的表达量为0．961±O．060，明显低于0nmol／L雷帕霉素处理组（1．654±O．246，P〈0．05）。CCK-8法检测结果显示，与0nmol／L雷帕霉素处理组比较，20、50和100nmol／L雷帕霉素处理组人骨肉瘤MG-63细胞的增殖均受到明显抑制（均P〈0．05）；20和50nmol／L雷帕霉素对骨肉瘤干细胞的增殖无明显的抑制作用（均P〉0．05），但100nmol／L雷帕霉素对骨肉瘤干细胞的增殖有明显的抑制作用（P〈0．05）。形态学观察结果显示，雷帕霉素可以有效抑制骨肉瘤干细胞的成球特性。结论雷帕霉素通过干预mTOR信号途径可以有效抑制骨肉瘤干细胞的增殖活性和成球特性，这将为雷帕霉素应用于骨肉瘤联合化疗提供理论依据。
- 刘沛宜张伟滨王君沈宇辉魏义勇
- 关键词：雷帕霉素骨肉瘤干细胞雷帕霉素靶蛋白
- 骨折愈合过程中低氧诱导因子-1α的表达及其调节作用被引量：3
- 2009年
- 目的探讨骨折愈合过程中低氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达及其调节作用。方法建立小鼠胫骨骨折模型，骨折后1、3、7、14、21、28d取材，应用X线摄片、Micro-CT和四环素荧光双标记技术，观测骨痂组织的演变和新骨形成状况；采用RT-PCR、Western blotting和免疫组织化学方法，检测骨痂组织细胞HIF-1α、血管内皮生长因子（VEGF）和成骨性标志物（Runx2和ALP）的表达状况，分析HIF-1α与骨折愈合进程的关系。结果在早期骨痂组织中，募集于骨折处的细胞以及由此演化的成骨细胞、软骨细胞及骨细胞在低氧环境中均表达HIF-1α。骨折后第7天，HIF-1α阳性细胞百分率达到峰值，持续高表达7d后逐渐下降，骨折后第28天基本恢复至骨折前水平；细胞VEGF表达特征的变化与HIF-1α的表现相似；早期骨痂细胞的骨形成功能活跃，骨痂体积较大，至骨折后14d达到峰值后随骨改建的发生而逐步减小，骨痂矿化沉积主要发生于骨折愈合的中晚期（14—28d）。结论骨折愈合过程中，参与骨折愈合的细胞属低氧感应细胞并表达HIF-1α；HIF-1α可调节细胞自身的状态，通过调控早期骨痂细胞的功能和刺激血管新生而参与调节骨折的愈合。
- 罗涛齐进周琦王君王晋申魏立刘晓东邓廉夫
- 关键词：骨折愈合骨痂低氧诱导因子-1Α
- 丹参注射液对C57小鼠脂肪源性干细胞成软骨的促进作用被引量：4
- 2014年
- 目的:探索丹参注射液对脂肪源性干细胞(ASCs)成软骨的促进作用。方法:①获取C57小鼠ASCs并培养传代,取第4代用于体外实验。分为空白组、诱导组与丹参注射液组,分别予常规培养液、成软骨诱导液及成软骨诱导液加丹参注射液干预,培养14 d后采用定量PCR检测ASCs体外Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)的表达。②取2月龄裸鼠15只,在髌股关节面用克氏针造成软骨缺损。随机分为模型组、诱导细胞复合纤维蛋白胶植入组和丹参注射液干预细胞复合纤维蛋白胶植入组,术后12周切取膝关节缺损处,行HE染色。结果:①通过体外对CollagenⅡmRNA表达的研究证实,诱导组和丹参注射液组均可促进ASCs向软骨细胞分化,尽管两者数值相比没有统计学差异(P>0.05),但与诱导组相比丹参注射液组可以提高CollagenⅡmRNA的表达水平。②体内修复的HE染色表明,丹参注射液组和诱导组与纤维蛋白胶复合后均具有促进软骨再生,其中丹参注射液干预细胞组的再生软骨优于诱导组。结论:丹参注射液具有促进ASCs向软骨细胞分化的功能,与支架材料复合后可以较好地修复软骨缺损,这将为中药应用软骨组织工程的发展奠定基础。
- 周琦王君魏义勇
- 关键词：丹参注射液脂肪源性干细胞软骨细胞
- 接骨中药含药血清对成骨细胞生物功能的影响被引量：3
- 2004年
- 目的 比较伤科常用单味接骨中药含药血清对成骨细胞生物学功能的影响。方法 应用MTT法、对硝基苯磷酸盐法、茜素红染色方法和RT-PCR法,比较伤科常用单味中药当归、自然铜、骨碎补和续断对体外培养成骨细胞的增殖、碱性磷酸酶分泌、矿化结节形成和mRNA表达的影响。结果 单味中药当归对早期增殖期的成骨细胞有明显的促增殖和分化的作用;当归和自然铜能增加成骨细胞矿化期矿化结节的形成;当归和续断能上调BMP-2和IGF-I mRNA的表达。结论 单味接骨中药当归具有刺激体外培养成骨细胞增殖和分化的功能。
- 冯伟傅文彧张玥朱雅萍王君
- 关键词：含药血清成骨细胞生物功能体外培养
