王乾
- 作品数:12 被引量:52H指数:4
- 供职机构:华中农业大学水产学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省海洋渔业科技推广专项项目广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 摄食水平和温度对翘嘴鳜幼鱼生长、排粪、排泄及氮收支影响的研究
- 翘嘴鳜(Siniperca chuatsi(Basilewsky))隶属鲈形目(Perciformes)、鲈亚目Percoidei、真鲈科(Percichthyidae)、鳜属(Siniperca)。其生长速度快、肉质细...
- 王乾
- 关键词:翘嘴鳜摄食水平幼鱼生长氮收支饲养模式
- 青鱼Dazl基因的原核表达及其多克隆抗体制备
- 2019年
- 实验进行了青鱼( Mylopharyngodon piceus ) Dazl 基因的原核表达,兔抗青鱼源Dazl多克隆抗体的制备及抗体的特异性验证。首先将青鱼 Dazl 基因的编码区利用重组表达引物从pCS2- MpDazl 质粒中扩增出来,经酶切后连接到pET-28a载体中,构建pET-28a- MpDazl 重组表达载体。然后将pET-28a- MpDazl 重组质粒转化至大肠杆菌( Escherichia coli )BL21中,利用异丙基-β-d-硫代半乳糖苷( IPTG)诱导表达,获得分子量为27 kD的Dazl重组蛋白。将纯化的Dazl重组蛋白作为抗原免疫家兔制备多克隆抗体,抗体的效价和特异性通过ELISA法和 Western blot检测。结果:成功构建重组表达载体pET-28a- MpDazl;以0.5 mmol/L IPTG在37 ℃条件下诱导4 h可获得高效表达的Dazl重组蛋白;制备的兔抗青鱼Dazl多克隆抗体能够特异性识别原核表达Dazl蛋白、青鱼卵巢的内源Dazl蛋白以及细胞中过表达的Dazl蛋白,并证实了青鱼Dazl蛋白在性腺中表达的特异性。
- 王艺舟潘启华王乾夏必琳罗君志方健邓羽廖明聪陈天圣
- 关键词:DAZL原核表达多克隆抗体
- 长链非编码RNAlnc4及基因prdm14在青鳞性腺发育中的功能研究
- 原始生殖细胞(Primordialgermcells,PGCs)是动物性腺的最早期形态,所以对于PGC特化的研究一直是动物性腺发育研究中的一个非常重要的议题。在哺乳动物中,PRDM14在细胞多能性维持、表观遗传重编程和P...
- 王乾
- 关键词:青鳉性腺发育长链非编码RNA胚胎发育
- 鳜鱼3个养殖群体经济性状及遗传多样性分析被引量:7
- 2012年
- 测量了1、2月龄广东、湖南和湖北鳜鱼3个养殖群体的各性状指标,分析了2月龄鳜鱼全长、体长等主要性状与体质量间的相关性,并对鳜鱼3个养殖群体的mtDNA控制区核苷酸序列进行测定。形态-体质量指标相关性分析表明,全长—体质量、体长—体质量之间的相关性极显著(r>0.9,P<0.01)。对鳜鱼3个养殖群体经济性状的比较结果显示,长江中游鳜鱼养殖群体的体长和体高日增长率均比广东鳜鱼养殖群体高。采用特异性引物对鳜鱼基因组进行PCR扩增,得到3个地区鳜鱼线粒体DNA控制区的全序列(830~834bp)。遗传多样性分析结果表明,长江中游地区鳜鱼养殖群体的遗传多样性比广东鳜鱼养殖群体高。因此,与广东鳜鱼养殖群体相比,长江中游群体具有更高的养殖经济价值和育种价值。
- 余锐梁旭方易提林张进骆小年王乾
- 关键词:鳜鱼经济性状相关系数MTDNA
- 一种可高效转染的青鳉肌肉细胞系的建立与应用(英文)被引量:1
- 2019年
- 在哺乳动物细胞系中转基因的效率相对较高而在鱼类细胞系中相对较低,为了获得鱼类高效转基因细胞系,我们从模式鱼类青鳉(Oryzias latipes)中分离和构建了肌肉细胞系OLM。该细胞系类似于纤维细胞,在28℃DMEM和10%的胚胎牛血清中培养了超过88代。通过染色体分析,它属于两倍体并含有48条染色体。在脂质体介导下,报告基因的转染效率可以达到40%,在测试的其他鱼类细胞中转染效率最高。此外还构建了稳定转染转基因或者非编码RNA的细胞系。OLM细胞对常见的病毒SVCV、GCRV、SGIV等不敏感。综上所述,研究在青鳉中建立了一种能高效转染的肌肉细胞系,它适用于鱼类瞬时和稳定的转基因研究。
- 邓羽王乾王艺舟薛亭罗君志陈天圣
- 关键词:青鳉肌肉细胞系转染转基因
- 长链非编码RNA lnc4及基因prdm14在青鳉性腺发育中的功能研究
- 动物性腺发育一直是发育生物学的一个重点内容,在模式动物中研究性腺发育调控可以为一些人类生殖疾病的诊断和治疗提供有效的启示和帮助。本论文将对模式动物日本青鳉(Oryzias latipes)中一个长链非编码RNA(long...
- 王乾
- 关键词:性腺发育长链非编码RNA
- 一种青鳉肌肉细胞系
- 本发明涉及鱼类细胞培养技术,具体涉及建立一种青鳉肌肉细胞系,该细胞系和其他常见的鱼类细胞系相比,其外源基因由脂质体转染时候效率大幅度提高。所述青鳉肌肉细胞系为青鳉肌肉细胞系OLM,保藏于中国典型培养物保藏中心、且保藏号为...
- 陈天圣邓羽薛亭王乾王艺舟
- 文献传递
- 团头鲂oct4基因真核表达载体的构建与表达
- 2021年
- 八聚体结合转录因子4(octamer-binding transcription factor 4,Oct4)在干细胞多能性维持、胚胎早期发育和体细胞重编程等过程中具有重要作用,构建团头鲂oct4基因真核表达载体可为进一步研究该基因的功能提供实用工具。通过PCR方法从含有团头鲂oct4基因开放阅读框序列的载体pCS2+Maoct4中获得基因编码片段,连入真核表达载体pCVpr,构建重组的融合表达载体pCMV-Maoct4-Red;经酶切和测序鉴定后,采用脂质体法将该载体转染HepG2细胞,观察到细胞中红色荧光主要定位于细胞核,并采用Western blot方法分析融合蛋白的正确表达。成功构建了团头鲂oct4基因荧光真核表达载体pCMV-Maoct4-Red,该载体可用于真核细胞的核定位标记,为后续研究鱼类oct4基因的作用机制奠定了基础。
- 于淼潘启华王乾方健薛亭陈天圣
- 关键词:团头鲂OCT4真核表达载体亚细胞定位
- 翘嘴鳜与斑鳜杂交F_1代食性驯化及主要形态性状的通径分析被引量:21
- 2013年
- 对翘嘴鳜(♀)和斑鳜(♂)杂交F1代进行程序性的驯化,挑选出易驯化和不易驯化的2组。采用一维方差分析和主成分分析研究了易驯化和不易驯化杂交鳜的形态差异;对易驯化杂交鳜全长、体长、体宽、体高、吻长、头长、眼径、眼间距、尾长、尾柄高、尾柄长和体质量等12个性状进行了相关分析和通径分析。试验结果显示,所选易驯化杂交鳜F1代体长、体高和眼径3个形态性状对体质量的相关系数均达到极显著水平(P<0.01),对体质量的通径系数亦达到极显著水平(P<0.01),体长对体质量的直接影响最大,通径系数达0.435;所选3个形态性状与体质量的共同决定系数r2=0.949,说明所选性状是影响体质量的主要形态性状;应用逐步多元回归分析建立了以体质量为依变量(Y),体长(X2)、体高(X4)和眼径(X7)为自变量的回归方程:Y=-15.527+0.127 X2+0.344 X4+0.903 X7。试验结果说明,翘嘴鳜和斑鳜杂交F1代存在易驯化和不易驯化个体的食性分化;用体长、体高和眼径估计体质量的多元回归方程为易驯化杂交鳜选择育种提供了理论依据。
- 张进梁旭方易提林窦亚琪王乾余锐符云叶卫
- 关键词:食性驯化形态性状通径分析
- 一种高效转染青鳉肌肉细胞系
- 本发明涉及鱼类细胞培养技术,具体涉及建立一种高效转染青鳉肌肉细胞系,该细胞系和其他常见的鱼类细胞系相比,其外源基因由脂质体转染时候效率大幅度提高。所述高效转染青鳉肌肉细胞系为青鳉肌肉细胞系OLM,保藏于中国典型培养物保藏...
- 陈天圣邓羽薛亭王乾王艺舟
- 文献传递