牛哲峰 作品数:5 被引量:18 H指数:3 供职机构: 中国医科大学基础医学院 更多>> 发文基金: 辽宁省自然科学基金 重庆市自然科学基金 沈阳市科技攻关计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
维康醇对肝癌细胞增殖抑制和诱导凋亡的作用 被引量:4 2013年 目的研究维康醇对肝癌细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡作用的影响。方法以不同浓度维康醇处理对数生长期人肝癌细胞HepG2,利用MTT法测定维康醇对细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪PI单染检测细胞周期分布情况的改变,流式细胞仪Annexin V FITC/PI双标记法检测细胞凋亡率。结果 MTT结果显示:维康醇对HepG2细胞具有明显的生长抑制作用并呈浓度和时间依赖性。流式细胞术结果显示:30μmol/L维康醇作用于HepG2细胞48 h后,处于G2/M期的细胞比例显著升高,同时伴随G1/G0期细胞比例下降,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。Annexin V FITC/PI染色检测结果显示:30μmol/L维康醇作用于HepG2细胞48 h后,细胞凋亡率显著升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论维康醇对肝癌细胞有明显的增殖抑制作用,并具有浓度和时间依赖性;维康醇通过引起细胞周期阻滞、诱导细胞凋亡发挥其抗肝癌作用。 王艳丽 朱晓琳 段丽丽 陈杰鹏 牛哲峰 曲迎春 丛培芳 李岭 张美侠关键词:肝癌 凋亡 细胞周期 胃癌组织芯片快速制备及Reg Ⅳ编码产物检测 被引量:3 2014年 目的:建立快速胃癌组织芯片(tissue microarray,TMA)制作方法,探讨其在RegⅣ编码产物检测和研究中的应用。方法:收集日本富山大学医学部1993-04-20-2010-11-29胃癌石蜡标本372例和相应癌旁黏膜标本(距离癌组织>4cm)198例,应用AZUMAYA芯片机构建48阵列组织芯片,利用免疫组化和原位杂交检测RegⅣ蛋白和mRNA的原位表达。在Olympus BX41显微镜下选定切取部位,利用2mm的穿刺针切除供体蜡块,不用制备受体蜡块,直接将切除组织放入金属包埋皿的固定盒上制备48阵列芯片。结果:组织芯片经HE染色确定了组织病理学诊断,免疫组化和原位杂交均发现在肠上皮化生和黏液分泌性肿瘤细胞质中存在RegⅣ蛋白和mRNA表达。胃黏膜肠化生中RegⅣ蛋白表达为100%(63/63),高于胃炎的29.0%(27/93,χ2=73.67,P<0.001)、腺瘤的85.7%(36/42,χ2=9.54,P<0.005)和胃癌的45.2%(168/372,χ2=65.06,P<0.001)。胃癌组织中,印戒细胞癌阳性率为95.3%(41/43),高于低分化癌的27.4%(32/117),χ2=55.89,P<0.001。原位杂交发现,癌旁黏膜肠化生上皮细胞中RegⅣmRNA表达阳性率为95.2%(40/42),高于癌旁正常黏膜的38.6%(17/44,χ2=30.63,P<0.001)和胃癌的20.3%(14/69,χ2=55.74,P<0.001)。结论:制备TMA不需要制备受体蜡块,提高了TMA制作速度。异常RegⅣ表达与胃黏膜肠化生-球样异型增生-印戒细胞癌的发生途径关系密切。 陈说 勾文峰 牛哲峰 赵爽 郑鑫 赵杨 高野康雄 郑华川关键词:胃肿瘤 组织芯片 原位杂交 免疫组织化学 维康醇对DNA拓扑异构酶活性的影响 被引量:1 2012年 目的探讨维康醇对DNA拓扑异构酶活性的影响。方法以质粒pBR322超螺旋DNA为底物,采用凝胶电泳分别检测维康醇对拓扑异构醇Ⅰ(TopoⅠ)和拓扑异构醇Ⅱ(TopoⅡ)介导的pBR322 DNA解旋反应的影响。结果维康醇对TopoⅠ介导的pBR322解旋反应无明显的抑制作用,而对TopoⅡ的活性有明显的抑制作用。结论维康醇的直接作用靶点可能是DNATopoⅡ,该药可能成为新的TopoⅡ抑制剂。 历文 尹晓慧 段丽丽 陈杰鹏 周雪莹 朱晓琳 牛哲峰 张美侠关键词:DNA拓扑异构酶 葫芦素B对肝癌细胞内阿霉素浓度的影响 被引量:6 2012年 目的建立肝癌细胞H22和HepG2中阿霉素含量测定的高效液相色谱方法,以明确葫芦素B对阿霉素在细胞内浓度的影响。方法色谱柱为Waters Sunfine C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-0.01%醋酸(40∶60,V/V),流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,荧光检测激发波长为495 nm,发射波长为560 nm,以盐酸表阿霉素为内标。结果在HepG2细胞液中,阿霉素线性范围为0.1~6.4μg/mL(r=0.993 4,n=7),加样回收率为107.4%,RSD为3.77%;在H22细胞液中,阿霉素线性范围为0.625~20μg/mL(r=0.996,n=7),加样回收率为105.93%,RSD为5.64%。结论在肝癌细胞中,葫芦素B能明显促进阿霉素内流,减少外排。葫芦素B使肝癌细胞中阿霉素的浓度升高,两者联合可能起到更好的抗肝癌作用,葫芦素B可能逆转肝癌细胞的阿霉素耐药性。 杨姣 周雪莹 历文 朱晓琳 牛哲峰 张玉玺 李士峰 张美侠关键词:葫芦素B 阿霉素 HEPG2 H22 HPLC 葫芦素B和阿霉素联合应用在体内外对肝癌细胞H22的生长抑制作用 被引量:4 2012年 目的研究葫芦素B和阿霉素联合应用在体内外对肝癌细胞H22的生长抑制作用。方法将40只雌性昆明小鼠随机分为4组,每组10只,包括阴性对照组(生理盐水组)、阿霉素组、葫芦素B组、联合组。分别以阿霉素、葫芦素B、葫芦素B联合阿霉素处理H22细胞,培养48 h后MTT法检测细胞增殖情况。计算抑瘤率、白细胞数、胸腺指数、脾脏指数和血药浓度。结果 MTT结果显示,与阿霉素组相比,联合组对H22细胞的增殖抑制作用明显增强,联合组与阿霉素组之间、高剂量组与低剂量组之间的差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。联合组与阿霉素组相比,抑瘤率明显增强,并且联合组阿霉素在心脏中的浓度明显降低(P<0.05)。结论葫芦素B和阿霉素联合应用具有增强抗H22肝癌作用。 杨姣 周雪莹 历文 朱晓琳 牛哲峰 张玉玺 李士峰 张美侠关键词:葫芦素B 阿霉素 肝癌 H22