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肿瘤相关抗原RCAS1重组质粒的构建与GST-RCAS1融合蛋白的表达和纯化及鉴定被引量：1: 2006年; 目的:构建RCA S1的重组质粒、表达GST-RCA S1融合蛋白并进行纯化和生物学活性鉴定。方法:从M CF-7细胞提取总RNA,通过RT-PCR得到RCA S1的扩增产物,纯化后用E coRⅠ和BamHⅠ双酶切。选择pGEX-2T作为载体,用E coRⅠ和BamHⅠ双酶切后与上述酶切后DNA连接,转化感受态JM 109大肠杆菌,挑单个菌落提取质粒进行双酶切和测序鉴定。选择测序正确的质粒重新转化BL 21大肠杆菌,用终浓度0.1 mm o l/L的IPTG诱导表达GST-RCA S1蛋白,用GST亲和层析纯化并通过SDS-PAGE电泳和W estern印迹试验证实。利用特异性抗RCA S1多抗(N-18和C-20)鉴定所表达的融合蛋白,通过流式细胞仪检测GST-RCA S1融合蛋白诱导活化T细胞凋亡的作用。结果:通过RT-PCR得到大小为642bp的产物,重组质粒通过双酶切和测序鉴定正确。通过IPTG诱导在BL 21大肠杆菌中表达并纯化得到GST-RCA S1蛋白,通过SDS-PAGE电泳鉴定分子量为52 kM r,与预测一致,并由W estern印迹试验证明为GST融合蛋白。该融合蛋白能被特异性抗RCA S1(N-18和C-20)多抗识别。GST-RCA S1对诱导活化的T细胞凋亡有一定的作用。结论:成功构建RCA S1的重组质粒,并表达GST-RCA S1融合蛋白,对其生物学活性作了初步研究。; 洪学军沈芬平王青青; 关键词：RCAS1 重组质粒

腺病毒介导的LIGHT联合IL-12治疗小鼠转移性乳腺癌及其机制: 【目的】研究腺病毒介导的 LIGHT 联合 IL-12的抗肿瘤作用及其免疫机理探讨, 观察其对小鼠4T1乳癌和转移的治疗作用以及长期免疫保护作用。【方法】收集对数生长期的4T1细胞,注射至 BALB/c 小鼠右腹部皮下,...; 赵德矿王青青沈芬平洪学军胡桂莉曹雪涛; 文献传递

膜分子RCAS1的表达与小鼠4T1乳腺癌生长和转移的相关性研究: 目的:膜分子RCAS1是新近发现的一种肿瘤相关抗原,与临床肿瘤的分化、恶性程度以及预后等密切相关,体外实验发现可诱导淋巴细胞凋亡。本文利用小鼠4T1高转移性乳癌模型探讨RCAS1分子的表达与乳腺癌生长和转移的相关性,并初...; 洪学军王青青曹雪涛; 文献传递

雌激素和孕激素对人乳腺癌细胞MCF-7 RCAS1表达的影响被引量：3: 2007年; 目的探讨体外雌激素和孕激素对人乳腺癌细胞MCF-7表达SiSo细胞上的受体结合肿瘤抗原（RCAS1）分子的影响。方法用浓度为10^12～10^-8mol／L的雌激素或浓度为10^-9～10^-5mol／L的孕激素作用乳腺癌细胞MCF-7后，用半定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测MCF-7细胞RCAS1 mRNA水平的变化，用蛋白免疫印迹试验分析MCF-7细胞表达RCAS1蛋白水平的变化。结果在10^-12～10^-8mol／L范围内随着雌激素浓度的增加，MCF-7细胞RCAS1 mRNA的表达呈递增趋势，在10^-11、10^-10、10^-9、10^-8mol／L范围内雌激素组与未处理对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。随着10^-9～10^-5mol／L的孕激素浓度的增加，MCF-7细胞RCAS1 mRNA的表达呈下降趋势，孕激素各组与未处理对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。用RCAS1单克隆抗体能检出相对分子质量为32000的条带，其灰度随着雌激素浓度的增加而增强，随孕激素浓度的增加而减弱。结论雌激素可上调MCF-7细胞的RCAS1分子表达，孕激素可下调MCF-7细胞的RCAS1分子表达。; 葛冰磊洪学军王青青; 关键词：雌激素孕激素 MCF-7细胞逆转录聚合酶链反应

膜分子RCAS1在诱导免疫细胞凋亡的作用: 目的研究 RCAS1分子对免疫细胞的凋亡诱导作用以及生长抑制作用,对相关细胞的 RCAS1受体进行检测,分析 RCAS1诱导细胞凋亡的可能机制。方法1、细胞凋亡检测。利用密度梯度离心法分离新鲜外周血单个核细胞,培养和分选...; 洪学军王青青曹雪涛; 文献传递

腺病毒介导的LIGHT联合IL-12治疗小鼠转移性乳腺癌及其机制: 目的:研究腺病毒介导的LIGHT联合IL-12的抗肿瘤作用及其免疫机理探讨,观察其对小鼠4T1乳癌和转移的治疗作用以及长期免疫保护作用。方法:收集对数生长期的4T1细胞,注射至BALB／c小鼠右腹部皮下,建立4T1乳腺癌...; 赵德矿王青青沈芬平洪学军胡桂莉曹雪涛; 文献传递

膜分子RCAS1的表达与小鼠4T1乳腺癌生长和转移的相关性研究: 目的膜分子 RCAS1是新近发现的一种肿瘤相关抗原,与临床肿瘤的分化、恶性程度以及预后等密切相关,体外实验发现可诱导淋巴细胞凋亡。本文利用小鼠 4T1高转移性乳癌模型探讨 RCAS1分子的表达与乳腺癌生长和转移的相关性,...; 洪学军王青青曹雪涛; 文献传递

一种新的肿瘤相关抗原RCAS1被引量：2: 2005年; RCA S1(receptor-b ind ing cancer an tigen expressed on S iSo ce lls)是一种新近发现的肿瘤相关抗原,为Ⅱ型跨膜蛋白,表达在多种不同类型的肿瘤细胞表面,而且RCA S1的表达与肿瘤的分化、侵袭性和恶性程度呈正相关,并提示不良预后。最近研究表明,RCA S1能诱导活化后的免疫细胞发生凋亡,这可能是RCA S1表达在肿瘤细胞表面进而逃避机体免疫监视的机制之一。; 洪学军王青青; 关键词：膜蛋白质类肿瘤相关抗原细胞凋亡

膜分子RCAS1在诱导免疫细胞低反应性中的作用及机制研究: 1996年，Sonoda(Cancer,1996)等建立了一种子宫腺癌细胞系SiSo，他们将SiSo免疫小鼠，利用杂交瘤技术制备了一系列单克隆抗体，发现了一种可被22-1-1单抗识别的新蛋白，分子量为40kD和78kD(...; 洪学军; 关键词：膜分子免疫细胞低反应性肿瘤; 文献传递

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洪学军