江培洲
- 作品数：19 被引量：118H指数：6
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 高浓度EB病毒感染人永生化上皮细胞Hacat系被引量：5
- 2002年
- 目的探讨EB病毒感染上皮细胞的机制。方法大规模培养绒猴淋巴细胞B958系,从中提取并浓缩EB病毒,用胎儿脐带血淋巴细胞滴定后,以高浓度EB病毒感染人永生化上皮细胞Hacat系。提取Hacat细胞基因组DNA,PCR扩增EB病毒基因组特异性核酸序列BamHIw片断,Southernblotting及原位杂交验证感染结果。结果PCR、Southerblotting及原位杂交结果证实高浓度EB病毒能够感染Hacat细胞,但是感染率非常低。结论EBV对上皮细胞存在CR2或多聚IgA受体介导之外的未知感染途径。
- 江培洲沈新明黄华姚开泰
- 关键词：EB病毒上皮细胞病毒学
- 显微操作仪快速分离癌细胞并提取微量RNA的方法被引量：4
- 2002年
- 目的建立一种快速分离、纯化肿瘤组织癌细胞并提取微量RNA的方法。方法将肿瘤组织冰冻切片,快速染色,在镜下用显微操作仪从切片上分离癌巢,收集癌细胞,提取RNA并鉴定。结果冰冻切片染色清楚,癌巢分离准确,成功抽提到高质量的RNA。结论显微操作仪可以代替激光捕获显微切割仪进行特定细胞的分离,该方法可用来从少量组织的特定细胞中抽提RNA。
- 江培洲沈新明黄华石益民姚开泰
- 关键词：癌细胞显微切片术显微切割
- 双向凝胶电泳——飞行时间质谱法分析EB病毒诱导CNE2细胞表达变化的蛋白质
- EB病毒在鼻咽癌发生发展中的作用尚有争议。要解决这个问题,首先应该了解EB病毒诱导鼻咽上皮细胞发生生物学变化的作用机制。寻找并鉴定CNE2细胞中由EB病毒感染引起表达变化的功能蛋白质,能够为阐明该病毒的上述作用机制提供线...
- 江培洲黄华沈新明李欣应万涛钱小红姚开泰
- 文献传递
- 转染人pIgR的小鼠鼻咽上皮细胞在EBV感染前后基因表达谱差异被引量：1
- 2004年
- 目的应用cDNA阵列技术研究转染人多聚免疫球蛋白受体(hpIgR)的二亚硝基哌嗪(n, n'-dinitrosoperazine, DNP)转化的小鼠鼻咽上皮(TMNE)细胞系在EBV感染前后基因表达谱差异,探索EBV在鼻咽癌发病过程中的作用及鼻咽癌的发病机制。方法提取转染hpIgR 的TMNE细胞在EBV感染前后的总RNA,逆转录成α-32P-dATP标记的cDNA探针,与AtlasTM mouse cancer array 1.2 阵列膜进行杂交。利用AtlasImageTM 软件分析基因表达差异。结果共有25个基因表达水平发生了改变,有23个基因表达上调,2个基因表达下调。结论EBV感染可使转染细胞的多个基因表达发生改变,这些基因可能与鼻咽癌的发生、发展有关。
- 王爽吕丽春李虹江培洲姚开泰
- 关键词：EPSTEIN-BARR病毒CDNA阵列
- 运用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳和图像软件分析TPA处理NIH3T3细胞前后的蛋白质表达谱差异被引量：6
- 2004年
- 目的建立及优化聚丙烯酰胺双向凝胶电泳技术,并应用图像软件分析伏波醇酯(TPA)刺激前后小鼠成纤维细胞NIH3T3系的蛋白质差异表达,为进一步鉴定与TPA生物学作用有关的蛋白质奠定基础。方法分别提取TPA处理前后的NIH3T3细胞总蛋白质,经双向电泳,硝酸银染色后用软件分析显示两者蛋白质的差异表达。结果软件分析显示TPA刺激前后的细胞蛋白质有明显的差异表达。结论高质量的双向电泳设备、熟练的电泳操作和图像处理技能是寻找稳定可信的功能蛋白质的必要条件。
- 沈新明江培洲黄华李欣姚开泰
- 关键词：凝胶电泳NIH3T3细胞蛋白质表达谱
- 两种大肠癌转移性细胞株双向电泳图谱的初步分析被引量：2
- 2005年
- 目的初步分析大肠癌转移过程中差异表达的蛋白质,为阐述大肠癌转移的分子机制提供线索。方法以一对来自同一亲本、转移能力不同的人大肠癌细胞株SW620和SW480为实验对象,利用双向电泳技术(two-dimensionalgelelectrophoresis,2-DE),建立并优化两种细胞株的蛋白表达图谱;之后利用Melanieш软件分析与大肠癌转移相关的差异表达蛋白点。结果两种细胞株的2-DE蛋白表达谱具有良好的重复性和可比性;采用了非线性pH3-10及重叠窄范围的固相pH梯度胶条,提高了2-DE图谱的分辨率;初步选择11个差异表达蛋白点。结论非线性及重叠窄范围的固相pH梯度胶条可改善2-DE中蛋白分离的效果,初步分离的差异蛋白点为进一步鉴定大肠癌转移相关蛋白及建立大肠癌转移性细胞株的2-DE数据库奠定了基础。
- 梁莉丁彦青李欣江培洲李雪华张进华
- 关键词：双向电泳
- 改进的核移植方法完成小鼠卵丘细胞重组胚的早期发育被引量：4
- 2005年
- 目的建立一种快速、简便、有效且损伤小的核移植方法,研究来源于小鼠体细胞重组胚的早期发育.方法用尖锐的去核针在MⅡ期卵母细胞透明带上切开一个25 mm左右的小口,首先将第一极体挑出,再轻轻地挤压和负压吸引卵母细胞,去除包含有MⅡ期染色体-纺锤体复合体的最少量细胞质.随后,将直径为10～12 mm的C57BL/6j小鼠卵丘细胞核注射到去核卵母细胞透明带下,构建供体核-卵母细胞复合体.用电融合的方法诱导复合体融合,并对重组胚激活.体外培养72 h,对重组胚发育到2细胞、4～8细胞和桑椹胚期等各阶段进行观察和计数.结果完成一个MⅡ期卵母细胞去核的平均时间为15 s;Hoechst 33342染色证明可以完全去除MⅡ期卵母细胞细胞核:去核成功率为95.5%,注核成功率为76.7%,供体核-卵母细胞复合体融合和重组胚原核形成率分别为68.2%和62.2%;重组胚体外培养72 h内发育到2细胞、4～8细胞和桑椹胚期的比率分别为57.5%、39.1%和27.6%;用2个微卫星位点D7Mit22和D4Mit204引物,扩增不同发育阶段重组胚的DNA片段,表明重组胚来源于供体卵丘细胞.结论应用改进的核移植方法,不仅可以有效地去除卵母细胞细胞核,去核成功率高,而且操作简便,去核迅速,对卵母细胞损伤小,是研究小鼠体细胞核移植的一种简便可行的新方法.
- 沈新明乔贵林江培洲李欣黄华姚开泰
- 关键词：电融合卵母细胞
- 用曲细精管微注射法建立绿色荧光蛋白转基因小鼠被引量：37
- 2002年
- 目的研究曲细精管微注射法建立转基因小鼠的可行性。方法选取人巨细胞病毒启动子调控的增强型绿色荧光蛋白(pCMV-EGFP)表达载体,应用体视解剖镜和显微注射仪将不同剂量的被脂质体包裹的质粒DNA注射到不同年龄的KM小鼠曲细精管内。在注射后40d左右,雄鼠与雌鼠合笼交配;分娩后3周,剪取仔鼠尾,提取基因组DNA,应用PCR、Southernblotting技术进行整合检测。处死2只首建小鼠,荧光显微镜观察组织冰冻切片中EGFP的表达。结果共注射41只雄性小鼠,存活34只,其中32只具有交配、受精能力,获得仔鼠382只。仔鼠经检测,PCR阳性133只,Southernblotting阳性15只。小鼠的年龄、注射剂量与EGFP的整合率没有明显关系,荧光显微镜观察下没有观察到组织冰冻切片中EGFP明显表达。结论曲细精管微注射法是动物基因转移的一条简便可行的新途径。
- 沈新明乔贵林张玲江培洲黄华姚开泰
- 关键词：绿色荧光蛋白转基因小鼠
- 变性高效液相色谱法筛选鼻咽癌相关基因单核苷酸多态性被引量：7
- 2002年
- 目的 利用变性高效液相色谱法（DHPLC）结合测序筛选和鉴定鼻咽癌基因的单核苷酸多态性（SNPs）。方法 PCR扩增30例鼻咽癌患者和28例正常对照者6p21.3区域基因PPP1R11、PP1R10、FLOT1、KIAA0170的4个外显子与1个内含子片断,采用DHPLC技术对扩增片断进行基因变异检测,将不同的类型PCR片断进行全序列测定并与参考序列对照分析。结果 在5个片断中初步鉴定出4个未见报道的新SNP位点,验证了4个已知的SNPs位点和基因型。结论 DHPLC预测结合全序列测序是一种高效、经济、简便、可靠的SNP筛选方法。
- 黄华江培洲沈新明姚开泰周宇凤
- 关键词：变性高效液相色谱法鼻咽癌单核苷酸多态性基因筛选PCR扩增
- 癌基因与抑癌基因的表达研究进展被引量：21
- 2001年
- 肿瘤的发生发展本质上是细胞原癌基因的激活和抑癌基因的失活造成的。癌基因和抑癌基因的研究对探索肿瘤发病机制 ,寻找预防和治疗肿瘤的新措施具有重要意义。本文较全面地介绍了癌基因和抑癌基因的种类以及它们对细胞的调控作用和致癌、抑癌的分子机制 ,特别是总结了近年来癌基因及抑癌基因的研究进展。
- 江培洲沈新明黄华
- 关键词：癌基因抑癌基因基因表达肿瘤
