殷喆
- 作品数:25 被引量:79H指数:5
- 供职机构:军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点实验室开放基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:医药卫生环境科学与工程轻工技术与工程文化科学更多>>
- H-NS蛋白对副溶血弧菌hcp1的转录调控被引量:5
- 2016年
- 【目的】研究调控子H-NS对副溶血弧菌T6SS1结构蛋白基因hcp1的转录调控机制。【方法】利用Western blot检测Hcp1蛋白在野生株(WT)和hns基因敲除株(Δhns)中表达水平的差异。提取WT和Δhns的总RNA,采用实时定量RT-PCR的方法验证H-NS对hcp1的转录调控关系。进而采用引物延伸实验研究hcp1的转录起始位点,并根据产物的丰度判断H-NS对hcp1的调控关系。PCR扩增hcp1的整个启动子区DNA序列,并纯化His-H-NS蛋白,通过凝胶阻滞实验(EMSA)验证His-H-NS对hcp1启动子区是否具有直接的结合作用。【结果】Western blot和实时定量RT-PCR结果显示H-NS能抑制hcp1的表达;引物延伸结果显示hcp1只有一个转录起始位点T(–62)(翻译起始位点为+1),且其转录活性是H-NS和σ54依赖性的;EMSA实验表明H-NS对hcp1的启动子区具有直接的结合作用。【结论】H-NS能直接结合到hcp1启动子区而抑制其转录表达。
- 王洁董新波高丽晓周冬生殷喆张义全
- 关键词:副溶血弧菌H-NS转录调控
- 产IMP酶4种病原细菌的检测及其耐药性被引量:1
- 2015年
- 采用16SrRNA和种特异基因的聚合酶链反应(polymerase chainreaction,PCR)鉴定菌株;用VITEK-AMS 60全自动微生物分析仪测定最小抑菌浓度(minimum inhibition concentration,MIC);PCR测序检测已知的超广谱β-内酰胺酶基因(extended spectrum beta-lactamases,ESBLs)和碳青霉烯酶基因;改良型Carba NP法检测碳青霉烯酶类型。对来自4家医院的6株高水平耐碳青霉烯类抗生素临床分离菌株的检测和耐药性研究。结果显示,6株分别为阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌、产酸克雷伯菌各1株,肺炎克雷伯菌3株,且均为blaIMP扩增阳性,并携带1个或多个blaTEM、blaCTX-M-1group、blaSHV、blaVIM、blaOXA-1基因。6株菌均产B型碳青霉烯酶,且对头孢菌素类和碳青霉烯类抗菌药物高水平耐药。结果表明,6株菌对头孢菌素类和碳青霉烯类抗菌药物多重耐药的主要决定因子是产B型碳青霉烯酶IMP,且和携带ESBLs基因也相关。
- 冯娇殷喆邱业峰杨慧盈杨文慧王洁周冬生高英杰
- 关键词:多重耐药菌碳青霉烯酶IMP
- BSL-2实验活动对室内环境生物污染的定量分析被引量:3
- 2016年
- 目的通过一系列生物安全实验室常见操作及发生意外情况产生的生物气溶胶污染进行定量研究,为实验室相关操作的风险评估和人员防护措施提供科学依据。方法用黏质沙雷菌和大肠杆菌(ATCC 13706)的噬菌体phi X-174代替有传染性的细菌、病毒,在生物安全负压室内进行多种实验操作和意外事故的模拟,通过安德森采样器定量采样法对产生的微生物气溶胶进行定量分析。结果各种实验操作中,黏质细菌产生的最大气溶胶风险是冷冻干燥粉掉落,最大浓度是11 696 cfu/m3;噬菌体产生的最大气溶胶风险是高浓度噬菌体液跌落,最大浓度是4 092 PFU/m3,产生的气溶胶粒子大部分都是可入肺即小于5μm的粒子。结论生物安全实验室内的各种实验操作和意外事故产生的气溶胶浓度差异较大,气溶胶颗粒多为可入肺粒子。定量的实验室风险研究可以更好的保障人员安全和对危险发生的应急处理。
- 胡凌飞温占波李劲松王洁李娜张柯杨文慧殷喆
- 关键词:微生物气溶胶气溶胶颗粒风险评估
- 院内感染细菌多药耐药的质粒组学研究
- 周冬生殷喆冯娇张德福杨文慧杨慧盈王洁
- 宋内志贺氏菌1173质粒基因组及耐药基因转移机制被引量:2
- 2018年
- 【目的】研究质粒介导宋内志贺氏菌1173耐药基因bla_(CTX-M-64)转移的机制。【方法】用双纸片协同扩散法验证1173是否产超广谱β-内酰胺酶(ESBL),用PCR扩增鉴定其携带的耐药基因,接合转移实验检验其耐药质粒是否可通过接合转移给其他细菌,并对接合子是否产ESBL和携带耐药基因进行检验,利用VITEK~?2检测1173和接合子的耐药谱,提取质粒进行高通量基因组测序,并对质粒序列进行生物信息学分析,以研究其耐药基因转移机制。【结果】1173是产ESBL的多药耐药宋内志贺氏菌,携带的耐药基因有bla _(CTX-M-64)和bla _(TEM),其中的bla _(CTX-M-64)可通过接合转移作用传递给受体菌EC600,并使接合子具有相应的耐药谱。经序列测定和生物信息学分析表明,介导bla _(CTX-M-64)水平转移的是ISEcp1-bla_(CTX-M-64)-Δorf477转座单元。【结论】质粒携带的bla_(CTX-M-64)介导1173对多类抗菌药物的耐药,ISEcp1-bla_(CTX-M-64)-Δorf477转座单元介导bla_(CTX-M-64)在细菌间的转移。
- 张德福张德福刘东冯娇冯娇曲道峰曲道峰周冬生殷喆殷喆
- 关键词:质粒多药耐药
- H-NS对副溶血弧菌泳动能力的调控研究被引量:1
- 2015年
- 目的研究H-NS对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)泳动能力的调控作用。方法将VP接种于泳动实验平板上,37℃静置培养4.5 h后,通过比较不同菌株间菌苔直径的差异来判定H-NS对泳动表型的影响。提取WT和hns基因突变株(Δhns)的总RNA,采用实时定量RT-PCR方法研究H-NS对极鞭毛蛋白基因fla A的转录调控关系。将fla A启动子区DNA克隆入p HRP309质粒的β-半乳糖苷酶基因上游,构建Lac Z重组质粒,并将该重组质粒转入WT和Δhns中,通过比较二者中β-半乳糖苷酶活性的差异研究H-NS对fla A的调控关系。结果与结论动力表型结果显示,H-NS可促进VP的泳动能力;实时定量RT-PCR和Lac Z报告基因融合实验结果表明H-NS正调控fla A的转录。这表明H-NS至少可通过激活fla A的转录而促进VP的泳动能力。
- 王洁林磊孙凤军董新波侯书宁周冬生殷喆张义全
- 关键词:副溶血弧菌
- 质粒介导碳青霉烯耐药机制研究
- 碳青霉烯类抗生素是抗菌谱最广、抗菌活性最强的非典型β-内酰胺类抗菌药物,因具有对β-内酰胺酶稳定、毒性低、见效快、预后好等特点,已经成为治疗危重感染或初始抗生素治疗失败的复杂感染的最常用抗菌药物之一.但是,由于近年来碳青...
- 周冬生邱业峰殷喆冯娇
- 同时产碳青霉烯酶IMP与NDM的肺炎克雷伯菌和霍氏肠杆菌的分离及耐药性研究被引量:5
- 2018年
- 目的对分别分离自我国两家医院的多药耐药菌株肺炎克雷伯菌10677和霍氏肠杆菌128379进行耐药机制研究。方法通过16SrDNA鉴定菌种,PCR筛查菌株携带的耐药基因,应用改良Carba NP法检测菌株产碳青霉烯酶的类型,接合转移和电转化试验验证携带IMP和NDM的质粒是否具有可转移性,全基因组测序获得细菌所携带的所有质粒序列,应用RAST、BLAST等对序列进行生物信息学分析。结果 10677和128379两株菌均产B类酶,且均携带碳青霉烯酶基因blaIMP和blaNDM。全基因测序结果显示10677和128379各包含两个分别携带blaIMP-4和blaNDM-1的质粒,分别为p10677-IMP、p10677-NDM、p128379-IMP和p128379-NDM。其中p10677-IMP、p10677-NDM和p128379-NDM可通过接合转移得到相应的接合子,p128379-IMP仅可通过电转的方式得到其电转化子。p10677-IMP和p128379-IMP均为IncN1型质粒,有三个共有的外源插入区,分别为包含有携带blaIMP-4的整合子In823b,IS1插入区,携带qnrS1基因的转座子Tn6292,除此外,p10677-IMP还包括携带fosA5基因的转座子Tn6412区以及IS26插入区。p10677-NDM和p128379-NDM为IncX3型质粒,包含两个共有的外源插入区,分别为ISKox3和携带blaNDM-1的耐药区,此外,p10677-NDM还包含一个独有的插入区ISEhe3。结论质粒p10677-IMP、p10677-NDM和p128379-IMP、p128379-NDM分别介导10677和128379多药耐药且均具有转移性,是这两株耐药菌传播的重要载体。
- 梁丽琪冯娇蒋晓圆曾利军周冬生梁权辉殷喆江凌晓
- 关键词:肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶质粒
- 一种空气微生物液体冲击式采样一体机
- 本实用新型公开了一种空气微生物液体冲击式采样一体机。它包括一主机箱,所述主机箱包括箱体和与之配合的箱盖;所述箱体的一外侧壁上设有采样滤水器、遥控接收天线和GPS接收器;所述箱体的另一外侧壁上设有防水USB接口、防水电源插...
- 李娜王洁李劲松张柯胡凌飞何春雷刘凯殷喆
- 文献传递
- 生物安全三级实验室废弃物处置的环境风险评价检测
- 目的:通过对生物安全三级实验室的感染性'三废'无害化处置设备的生物学检测评价,确保生物安全三级实验室外环境生物安全.
方法:建立微生物评价高压灭菌器和高效粒子空气隔离器对微生物灭菌和净化处置性能的检测方法,并在...
- 李劲松张柯李娜王洁胡凌飞曹杰温占波殷喆
- 关键词:生物安全实验室废弃物处置环境风险评价
- 文献传递