梁鑫 作品数:16 被引量:28 H指数:4 供职机构: 成都中医药大学 更多>> 发文基金: 四川省教育厅资助科研项目 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 更多>>
Clock基因对精子顶体酶的影响 被引量:5 2015年 目的研究雄鼠睾丸Clock因沉默后,小鼠精子顶体酶的活性及功能。方法在ICR小鼠睾丸内注射Clock干扰质粒干扰雄性小鼠睾丸节律基因Clock的表达,研究:(1)进行体外受精,观察精子驱散卵丘颗粒细胞情况及受精率等;(2)检测精子顶体内顶体蛋白酶、透明质酸酶活性及芳香基硫酸酯酶A(ASA)的含量。(3)将精子注射入卵母细胞,观察受精卵及胚胎发育情况。结果睾丸Clock基因沉默后,精子驱散卵丘颗粒细胞时间延长,受精率下降;精子顶体蛋白酶活性下降;透明质酸酶活性和ASA含量无明显变化;干扰组精子对卵母细胞及胚胎发育的影响小于未干扰组(P〈0.05)。结论干扰睾丸Clock基因表达后,影响精子顶体蛋白酶活性,从而影响雄性小鼠的生殖功能。 梁鑫 成姝婷 王正荣 何煊 单旭东关键词:CLOCK基因 顶体蛋白酶 精子 不育 IVF-ET中观察胚胎早期卵裂预测胚胎发育潜力的研究 被引量:7 2011年 目的:探讨通过观察胚胎早期卵裂预测胚胎发育潜力,以期得到较好的临床妊娠结局。方法:对117个IVF、IC-SI周期,1 169个胚胎在受精24~28h的早期卵裂及后期发育情况进行观察,并根据早期卵裂情况将胚胎分为早期卵裂组、未早期卵裂组和原核(PN)未消失组,最终结合早期卵裂,第2天(D2)、第3天(D3)胚胎评分等情况选择适合移植的胚胎进行移植,共移植102个周期。同时对优胚率、妊娠率、种植率等指标进行比较。结果:①早期卵裂组D3优胚率高于其它两组(P〈0.05);②全部移植早期卵裂胚胎组和全部移植未早期卵裂胚胎组的生化妊娠率高于全部移植PN未消失胚胎组(P〈0.05),但临床妊娠率差异无统计学意义(P〉0.05);③移植2~3个优胚与移植1个优胚和1~2个非优胚的周期妊娠率和种植率差异无统计学意义(P〉0.05),但都高于未移植优胚周期(P〈0.01)。结论:观察胚胎早期卵裂可有效预测胚胎发育潜力,有利于挑选适合移植的胚胎,从而获得较高的妊娠率,但对临床妊娠率的影响不明显,临床妊娠率主要取决于优胚率。 单旭东 梁鑫 漆著 黄明孔关键词:妊娠率 弱精子症患者精子外周致密纤维2基因及蛋白的表达 被引量:4 2017年 目的:探讨弱精子症患者精子中外周致密纤维2(ODF2)mRNA及蛋白的表达水平,比较ODF2在健康男性与弱精子症患者中的表达差异。方法:根据WHO第5版,收集身体健康无疾病正常男性精液(n=15)和弱精子症患者精液(n=45)共60份,利用计算机辅助精液分析系统(CASA)进行精子统计,将弱精子症分为轻、中、重度3组,采用实时定量PCR和Western印迹对4组标本进行ODF2基因的表达量研究。结果:与正常组相比,轻度弱精子症组精子中ODF2基因表达无明显统计学差异(1.1120±0.5255 vs 0.6880±0.3720,P>0.05);中度弱精子症组ODF2基因表达降低,有显著的统计学差异(1.1120±0.5255 vs 0.4833±0.1863,P<0.05);重度弱精子症组ODF2基因表达明显降低,有极显著的统计学差异(1.1120±0.5255 vs 0.448 3±0.3408,P<0.01)。Western印迹中ODF2的OD值(ODF2/β-actin)在正常组和轻、中、重度弱精子症组分别为:0.4587±0.0521、0.3261±0.0714、0.1454±0.0536和0.1227±0.0457,与正常组相比,轻度弱精子症组无明显统计学差异(P>0.05),中度弱精子症组有显著的统计学差异(P<0.05),重度弱精子症组有极显著的统计学差异(P<0.01)。结论:ODF2基因及蛋白在弱精子症患者精子中的表达下调与精子活动力下降有密切联系,呈正相关性,提示ODF2基因可能参与精子活力的调控。 罗斌 何维 王世恒 熊洪平 梁鑫 单旭东 吕自力关键词:弱精子症 实时定量PCR 蛋白印迹 囊胚培养及废弃胚胎临床研究 被引量:6 2015年 目的 探讨囊胚培养在辅助生殖技术治疗周期中的价值以及质量较差胚胎和废弃胚胎的临床应用。方法 将受精后第3天(D3)卵裂期胚胎继续培养至囊胚。比较不同来源胚胎及不同卵裂球数和评分胚胎的囊胚形成情况,同时比较发育延缓胚胎受精后第4天(D4)冻融和囊胚冻融的结果,并利用囊胚形成情况对妊娠结局进行预测。结果 D3卵裂球数为6-9细胞且评分3分以上胚胎的优质囊胚形成率显著高于其他组(P〈0.01)。2个原核(2PN)胚胎的囊胚形成率和优质囊胚形成率均高于单原核(1PN)胚胎和无原核(0PN)胚胎(P〉0.05)。常规体外受精(IVF)和卵胞浆内精子注射(ICSI)胚胎进行比较,囊胚形成率和优质囊胚率无统计学差异(P〉0.05)。冻融囊胚的种植率和临床妊娠率均显著高于D4冻融胚胎(P〈0.01)。有囊胚形成者的种植率和临床妊娠率明显高于无囊胚形成者(P〈0.01)。结论 囊胚培养并冷冻保存具有极高的临床应用价值,且可间接预测妊娠结局。质量较差胚胎有一定的发育潜能,部分可发育为囊胚。 梁鑫 单旭东 漆著 贺贞 谭欣 吕自力 朱明辉 杨丹关键词:辅助生殖技术 原核 卵裂期胚胎 囊胚 左/右归丸对小鼠精子功能影响的研究 被引量:1 2012年 目的:探讨左/右归丸对小鼠精子功能的作用机制。方法:正常ICR雄性小鼠随机分为服用左/右归丸的实验组和服用生理盐水的对照组,实验组灌服含左/右归丸溶液,每次含左、右归丸各0.25 g,qd×14 d,每次1 ml,对照组以等量生理盐水代替。于末次灌胃后第7日与超促排卵的雌鼠合笼,检测到雌鼠阴栓后处死雌鼠,取1-细胞胚胎(受精卵),体外培养,观察卵裂率和囊胚形成率。另将上述确认让雌鼠受孕的雄鼠,于前次交配后3 d处死,取附睾精子,并行IVF,观察体外受精率和囊胚形成率,进一步观察与精子受精能力相关的完整顶体(acrosome-in-tact spermatozoa,AIS)率和顶体酶活性。结果:体内受精实验组的卵裂率(88.3±1.3%)高于对照组的(62.1±3.5%),差异有统计学意义(P=0.005)。实验组IVF受精率为82.4±2.9%,高于对照组的62.5±3.6%,差异有统计学意义(P=0.015)。不管体内受精还是体外受精,实验组与对照组的囊胚形成率均无统计学差异(P>0.05)。实验组顶体酶活性为44.29±5.49 IU,高于对照组的27.12±4.87 IU,差异有统计学意义(P=0.048),AIS率组间无统计学差异。结论:左/右归丸能提高小鼠精子功能,其作用机制有可能是通过调节顶体酶活性来影响小鼠精子功能。 蒋小辉 张路 张伦 梁鑫 陆华关键词:精子功能 顶体酶活性 小鼠 探讨ICSI时注射顶体完整精子对胚胎发育的潜在危害 被引量:1 2011年 目的:探讨卵胞浆内单精子注射(ICSI)时注射完整顶体的人精子对卵及胚胎发育的潜在危害。方法:①分别注射1、3、5个顶体完整的人精子于金黄地鼠卵中,同时注射数量相等的无顶体精子作为对照组,观察卵母细胞活化、受精及后期发育情况。②将6 ̄9个顶体完整的人精子注入废弃的人卵母细胞中,观察卵及胚胎发育情况。结果:①将顶体完整的人精子注入金黄地鼠卵中时,随着注入精子数量的增加,卵发育的异常率显著增加,而注射无顶体精子组,无论注射精子数量为多少,均无异常发生。②将6 ̄9个完整顶体的人精子注入人卵母细胞中时,未观察到发育异常的卵。此外,注射多个精子于金黄地鼠卵中时,多原核(PN)形成率顶体完整组明显低于无顶体组(P<0.01)。结论:本研究初步证实注射完整顶体人精子所含顶体酶对胚胎发育存在一定的危害性,行人类辅助生殖技术ICSI时,注射无顶体精子似乎更合理,或许能增加该技术的有效性。 梁鑫 单旭东 漆著 杨丹关键词:精子 顶体 ICSI 睾丸活组织直接镜检法诊断无精子症患者的临床意义 被引量:3 2010年 目的探讨睾丸活组织直接镜检法诊断无精子症患者临床意义。方法对47例无精子症患者进行睾丸活组织检查,同一部位取睾丸组织两份,一份做常规病理组织学检查,另一份将组织撕碎后,立刻在倒置显微镜下检查有无精子及活动精子,然后对两种方法所得结果进行比较。结果47例中,病理组织学检查可见精子生成16例(34.0%),组织撕碎后直接镜检发现精子30例(63.8%)。后者精子检出率明显高于前者。结论与常规病理组织学检查方法相比,直接镜检法能更好地反映睾丸内有无精子或活动精子,且简单易行。在进行病理学检查的同时取睾丸组织直接镜检,可为准备进行卵胞浆内精子注射(ICSI)治疗的患者提供更为确切的依据。 梁鑫 漆著 单旭东 黄明孔 余颜关键词:睾丸活检 直接镜检 无精子症 下调受精卵中Clock基因对早期小鼠胚胎DNA甲基化的影响 2015年 目的通过干扰小鼠二细胞受精卵中节律基因Clock的表达,研究Clock对小鼠早期胚胎DNA甲基化的影响。方法将Clock基因的RNAi干扰质粒转染到通过人工授精得到的二细胞受精卵中,通过移植假孕雌鼠获得7.5~11.5dpc的小鼠胚胎,并检测其基因组DNA甲基化水平和甲基转移酶Dnmt3a和Dnmt3b的表达。结果Clock干扰组无论是基因组DNA甲基化水平还是甲基转移酶Dnmt3a、Dnmt3b的表达量均较对照组高(均P〈0.01)。结论降低小鼠受精卵中节律基因Clock的表达量,可以通过影响甲基转移酶Dnmt3a和Dnmt3b而改变其胚胎发育中DNA甲基化水平。 成姝婷 梁鑫 王正荣 李世平 刘延友 汪宇辉 江舟 肖静 郭慧玲关键词:CLOCK基因 小鼠胚胎 DNA甲基化 DNMT3B 补肾中药复方对小鼠精子受精能力影响的研究 2011年 目的观察补肾中药复方对小鼠精子受精能力的影响,并探讨其作用机制。方法正常雄性小鼠随机分为服用补肾中药复方的实验组和服用生理盐水的对照组,实验组灌服补肾中药复方溶液,1次/d,每次1mL,共14d,对照组同时间灌服等量的生理盐水。于末次灌胃后第7d与超排的雌鼠合笼,合笼成功后处死雌鼠取出受精卵(1cell胚),体内实验观察卵裂率和囊胚生成百分率;体外实验观察体外受精百分率(IVF%)和囊胚率,并观察与精子受精能力相关的完整顶体百分率(AIS%)和顶体酶活性。结果体内实验发现实验组卵裂率(88.3%±1.29%)高于对照组(62.1%±3.48%),P=0.005;体外实验发现实验组IVF%为82.4%±2.89%,高于对照组(62.5%±3.58%),P=0.015;而体内、外实验均发现两组的囊胚生成百分率差异无统计学意义。实验组顶体酶活性为(44.29±5.49)IU,与对照组〔(27.12±4.87)IU〕的差异有统计学意义(P=0.048),两组AIS%差异无统计学意义。结论补肾中药复方能提高小鼠精子的受精能力,其作用机制有可能通过调节顶体酶活性来影响小鼠精子的受精能力。 蒋小辉 张伦 梁鑫 胡翔 陆华关键词:补肾中药复方 顶体酶活性 一种小分子胶原蛋白的制备方法 本发明提供了一种小分子胶原蛋白的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:将未经色谱纯化过的胶原蛋白于25~37℃下放置3~14天。本发明能够有效制备分子量在10~50KD大小的胶原蛋白,无需借助γ射线发生装置、蛋白酶等装置或... 梁鑫 吕自力 单旭东 杜娟 罗斌文献传递