林阿丽
- 作品数：8 被引量：19H指数：2
- 供职机构：杭州市第三人民医院更多>>
- 发文基金：山东省科技发展计划项目浙江省医药卫生科学研究基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 编码hGM-CSF基因慢病毒载体的构建及其介导的肿瘤疫苗抗肿瘤活性的研究
- 目的：构建编码人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(human Granulocyte-macrophage Colony Stimulating Factor,hGM-CSF)的慢病毒载体，研究编码hGM-CSF的慢病毒载体...
- 林阿丽
- 关键词：慢病毒载体粒细胞巨噬细胞集落刺激因子树突状细胞肿瘤疫苗流式细胞
- 文献传递
- 12例肛周Paget病的临床病理分析
- 2022年
- 目的探讨肛周Paget病(PPD)的临床表现、组织形态学及免疫组化特征,为病理诊断和临床治疗提供理论依据。方法收集2014年11月至2021年12月在杭州市第三人民医院经病理诊断为PPD的12例患者资料,回顾分析患者的临床表现、组织形态学及免疫组化特征、治疗及预后。结果12例PPD患者以老年男性为多,皮损常表现为肛周湿疹样红斑伴瘙痒,组织形态学特征为病变表皮内可见数量不等的Paget样细胞浸润性生长。PPD多伴有潜在恶性肿瘤,免疫组化标志物细胞角蛋白(CK)7/CK20/尾型同源盒转录因子2/囊泡病液体蛋白-15可用于鉴别诊断并提示肿瘤来源。所有患者均行手术切除治疗,7例患者伴复发转移,其中4例死亡,除去1例患者失访,其余均健在。结论PPD是一种惰性肿瘤,而继发性PPD患者因伴有潜在的恶性肿瘤而有较高的复发转移率,应用免疫组化寻找出恶性肿瘤来源,有助于临床及时干预,调整治疗策略。
- 林阿丽芦思佳单晓琼
- 关键词：肛周PAGET病组织形态学免疫组化
- 慢病毒介导的hGM-CSF修饰的肿瘤疫苗免疫活性研究
- 2013年
- 目的构建编码人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(human granulocyte-macrophage colony stimulating factor,hGM-CSF)的慢病毒载体,研究编码hGM-CSF的慢病毒载体对树突状细胞(dendritic cell,DC)疫苗抗肿瘤活性的增强作用。方法以质粒pORFhGM-CSF为模板,采用PCR方法扩增出hGM-CSF基因片段;通过BamH I和Xho I限制性内切酶位点,将hGM-CSF基因定向克隆到慢病毒连接载体L166中构建重组载体L166-hGM-CSF。将重组载体L166-hGM-CSF和包装载体L205以及包膜载体L311共同转染慢病毒包装细胞293T,72h后收集病毒上清液获得编码hGM-CSF的慢病毒颗粒LentihGM-CSF。从脐血中分离出单核细胞,rhGM-CSF、rhIL-4和α-TNF诱导获得DC,通过相差显微镜和流式细胞仪鉴定。应用反复冻融法制备可溶性肿瘤抗原,分别将负载肿瘤抗原的DC疫苗和慢病毒Lenti-hGM-CSF感染的负载肿瘤抗原的DC疫苗与T淋巴细胞共同培养,MTT方法检测并比较两者所诱导的CTL对反应细胞的体外杀伤活性。结果编码hGM-CSF的慢病毒载体L166-hGM-CSF成功构建,获得了编码hGM-CSF的慢病毒。该慢病毒的Hela细胞上清液中hGM-CSF的表达明显高于未感染者。从脐血中分离出的DC,显示其高表达CD80(87.2%)和CD86(92.8%),而单核细胞标志CD14的表达率较低(3.56%)。慢病毒介导的分泌hGM-CSF的树突状细胞肿瘤疫苗刺激同种T淋巴细胞增殖的能力和抗肿瘤活性较普通DC疫苗明显增强(P<0.01)。结论本实验制备的慢病毒Lenti-hGM-CSF感染反应细胞后能够显著增强DC肿瘤疫苗刺激同种T淋巴细胞增殖的能力及其诱导的CTL细胞对肿瘤细胞的杀伤能力,为hGM-CSF修饰的DC肿瘤疫苗的临床应用提供了一定的实验依据。
- 林阿丽孙青
- 关键词：慢病毒载体粒细胞巨噬细胞集落刺激因子树突状细胞肿瘤疫苗
- HER2、PD-L1及CK7在乳腺外Paget病中的表达
- 2022年
- 目的探讨HER2、PD-L1及CK7等多种免疫组化标记物在乳腺外Paget病中表达的临床病理学特征。方法对浙江省杭州市第三人民医院2015年1月-2022年8月确诊的乳腺外Paget病进行CK7、EMA、CEA、CDX2、HER2及PD-L1等免疫组化标记物的检测,分析其表达特点。结果CK7、EMA和CEA在原发性EMPD中的阳性率在90%以上,HER2在乳腺外Paget病中阳性表达率高达62%,而30例EMPD中仅有5例呈PD-L1的阳性低度表达。结论CK7、EMA和CEA可以很好地帮助诊断原发性EMPD,CK20和CDX2阳性提示EMPD继发于胃肠道腺癌的可能性很大,PD-L1在EMPD中的阳性表达很少,而HER2在EMPD中的阳性表达率高,可以为后续的靶向治疗提供理论依据。
- 林阿丽芦思佳方帅帅潘能文吕欣莹
- 关键词：乳腺外PAGET病免疫组化PD-L1
- 编码hGM-CSF基因的慢病毒包装及表达被引量：2
- 2007年
- 目的:构建编码人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)慢病毒载体转染小鼠结肠癌细胞CT26,建立持续高表达hGM-CSF基因的CT26细胞株。方法:采用PCR法获得hGM-CSF DNA片段,插入转移载体L166;用CaCl2法将载体L166-hGM-CSF、L205和L311共同转染到慢病毒包装细胞293T中,72 h后收集上清液。测定慢病毒的滴度;用ELISA法检测慢病毒感染后的CT26细胞上清液中hGM-CSF的表达。结果:通过酶切电泳证实重组转移载体L166-hGM-CSF含有预期的hGM-CSF片段。收集慢病毒转染CT26细胞,滴度达4.69×105IU/ml。ELISA法检测慢病毒转染的CT26细胞上清液中有hGM-CSF的表达超过2个月。终浓度15μg/ml的嘌呤霉素成功筛选出单克隆CT26细胞株。结论:收集的慢病毒能够有效的将其所携带的目的基因导入CT26细胞并使其在细胞中高效持续表达2个月以上。
- 林阿丽孙青
- 关键词：粒细胞巨噬细胞集落刺激因子慢病毒载体癌症疫苗
- 肛瘘患者特征性微小RNA表达的检测及分析被引量：7
- 2016年
- 目的检测并分析肛瘘患者的特征性微小RNA（miRNA）表达谱，探讨其可能的靶基因和临床意义。方法收集2014年3-12月间杭州市第三人民医院肛肠外科收治的3例肛瘘联合混合痔切除手术患者的痔核近端肛管黏膜标本（肛瘘组），另选取年龄、性别和体质量与之相匹配的行单纯混合痔手术的3例患者的肛管黏膜标本作为对照（对照组）。利用miRNA微阵列芯片检测比较两组肛管黏膜的1285个miRNAs的表达差异，并通过聚类分析差异miRNAs的聚集性（差异基因的筛选标准是：P≤0.05且变化倍数≥2或≤0.5）；采用DIANAmT、miRanda、miRDB、miRwalk等10种预测软件对差异miRNAs的靶基因进行预测，并进行综合打分，确定出预测分值最高的基因；采用基因本体（GO）富集法分析与靶基因相关的生物学过程；利用免疫组织化学方法检测两组肛管黏膜中分值最高基因的蛋白表达。结果肛瘘组患者的1285个miRNA中，发现13个miRNA与对照组存在显著差异，其中在肛瘘组上调2个，下调11个。经配对t检验显示-肛瘘组中miR-3609上调是对照组的5-98倍（P=0.0231），miR-181a-2-3p下调0.13倍（P=0.0067），是差异表达最大的miRNA。进一步聚类分析显示，上调的hsa-miR-3609和hsa-miR-6086相对表达量在两组间的变化趋势一致；下调的11个miRNAs中，miR-125b-1-3p和miR-548q表达类似，其余9个表达相似（包括：hsa-miR-1185-1-3p、hsa-miR-532-3p、hsa-miR-1233-5p、hsa-miR-769-5p、hsa-miR-149—5p、hsa-miR-99b-3p、hsa-miR。138-5p、hsa-miR-141-3p及hsa-miR-181a-2-3p）。对13个差异miRNAs进行靶基因预测分析显示，其中7个（53-8％）miRNAs能预测到靶基因，共计预测到靶基因104个；其余6个（46-2％）miRNAs未能预测到靶基因。预测分值最高的为几丁质酶基因1（CHff1），其对应的差异miRNA为hsa-miR-769-5p（r=-0.94286，P=0.0167）。基因本体（GO）富集分析结果显示，与这1
- 裘建明余吉平杨关根徐侃陶勇林阿丽王东
- 关键词：肛瘘微小RNA靶基因
- 负载hGM-CSF基因的慢病毒载体介导的宫颈癌DC疫苗抗肿瘤活性的初步研究被引量：2
- 2010年
- 目的:制备负载hGM-CSF基因的宫颈癌DC疫苗并研究其抗肿瘤作用。方法:(1)分离制备脐血来源的DC,通过相差显微镜和流式细胞仪鉴定;(2)Lenti-hGM-CSF转导DC细胞,ELISA方法检测DC细胞上清液中hGM-CSF的含量。宫颈癌HeLa细胞冻融抗原刺激DC细胞制备DC疫苗;(3)DC疫苗刺激同种T淋巴细胞诱导特异性CTL并用MTT法检测其增殖能力和对靶细胞的特异性杀伤能力。结果:(1)经Lenti-hGM-CSF转导后DC培养液中hGM-CSF含量明显高于未转染的DC细胞(P<0.01);(2)Lenti-hGM-CSF转染的宫颈癌DC疫苗刺激淋巴细胞的增殖指数(SI)达2.16,明显优于未转染的宫颈癌DC疫苗;(3)经Lenti-hGM-CSF修饰的宫颈癌DC疫苗诱导的CTL对宫颈癌HeLa细胞的杀伤活性达51.12%,高于未经修饰的DC诱导的CTL(P<0.05)。结论:用Lenti-hGM-CSF修饰制备的宫颈癌DC疫苗,其刺激T细胞增殖的能力增强,诱导的CTL对宫颈癌HeLa细胞具有显著增强的杀伤效应。
- 崔晶林阿丽刘群孙青
- 关键词：粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子慢病毒载体DC疫苗肿瘤疫苗
- CK19、HBME-1、Galectin-3、TPO及CD56联合检测在甲状腺乳头状癌诊断中的意义被引量：8
- 2014年
- 甲状腺肿瘤是最常见的内分泌器官肿瘤，其中以甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinomas，PTC）最为常见，早期手术预后较好，因此及早做出诊断有重要意义。病理检查是PTC确诊的主要手段，但由于近年提出的甲状腺微小乳头状癌及滤泡型乳头状癌等特殊类型的存在，使PTC诊断变得困难，尤其是与结节性甲状腺肿伴滤泡上皮乳头状增生和乔本甲状腺炎等甲状腺滤泡上皮良性增生病变难以鉴别。目前免疫组化仍是诊断PTC的主要方法。本文旨在探讨免疫组化联合检测CK19、HBME-1、Galectin-3、TPO、CD56在PTC诊断中的意义。
- 林阿丽
- 关键词：GALECTIN-3甲状腺乳头状癌HBME-1CK19CD56TPO
