杨芳芳
- 作品数：14 被引量：42H指数：3
- 供职机构：广西壮族自治区疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区卫生厅重点科研课题广西科技厅自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
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- 巢式PCR早期检测实验大鼠卡氏肺孢子虫被引量：2
- 2011年
- 目的探讨ITS1-5．8S rRNA—ITS2巢式PCR法检测大鼠卡氏肺孢子虫的敏感性及早期检测的评估。方法采用地塞米松免疫抑制法诱导大鼠感染肺孢子虫，大鼠分为7组，6组实验组和1组对照组，每组10只，实验组采用地塞米松免疫抑制法诱导大鼠感染肺孢子虫，对照组则不予激素处理。自诱导开始第3周至第8周每周收集1组实验组大鼠肺组织（1ungtissue，LT）和支气管肺泡灌洗液（bronchoal veolar lavage fluid，BALF）标本，采用ITSl-5．8SrRNA—ITS2巢式PCR法扩增卡氏肺孢子虫ITSI-5．8SrRNA—ITS2，同时采用六亚甲基四胺银（GMS）染色镜检法对第3周到第8周的大鼠肺组织和肺泡灌洗液标本进行检测，并将两种方法进行比较以评估巢式PCR技术的敏感性。结果采用ITSI-5，8SrRNA—ITS2巢式PCR法对实验感染卡氏肺孢子虫的大鼠¨和BALF进行检测，卡氏肺孢子虫DNA阳性率依次为第3周20％（2／10）、0（0／10），第4周70％（7／10）、10％（1／10），第5周90％（9／10）、30％（3／10），第6周90％（9／10）、80％（8／10），第7周100％（10／10）、80％（8／10），第8周63％（5／8）、63％（5／8）。而GMS染色镜检法仅于第5周开始检出卡氏肺孢子虫包囊，第6、7周包囊数最多。实验组大鼠诱导后的前4周无明显卡氏肺孢子虫肺炎体征，第5周后症状趋于明显。结论ITSI-5．8SrRNA-ITS2巢式PCR法敏感性高，可在第3周后和无症状阶段实验大鼠中检出卡氏肺孢子虫，并且比镜检法早两周。
- 张小娟杨芳芳欧阳颐王鸽黎学铭林睿
- 关键词：卡氏肺孢子虫内转录间隔区巢式PCR
- mtLSU-巢式PCR检测实验大鼠卡氏肺孢子虫的实验研究
- 2011年
- 目的对mtLSU-巢式PCR方法检测大鼠卡氏肺孢子虫的应用价值以及基因序列进行评价。方法采用地塞米松免疫抑制法诱导大鼠感染肺孢子虫;实验组10只,对照组1只;诱导至第7周时收集实验组及对照组大鼠肺组织和支气管肺泡灌洗液(BALF)标本,采用mtLSU-巢式PCR方法对人源与鼠源肺孢子虫共有的基因进行扩增和序列测定,同时采用镜检法对实验组大鼠肺组织和肺泡灌洗液标本进行检测,评估两种方法的敏感性。结果采用mtLSU-巢式PCR方法对实验感染大鼠肺组织和BAL进行检测,卡氏肺孢子虫DNA阳性率分别为100%(10/10)、90%(9/10)。而GMS染色镜检法检测的阳性率分别为80%(8/10)、60%(6/10)。所测Wistar大鼠卡氏肺孢子虫mtLSU基因序列长度为155bp,与GenBank的大鼠源肺孢子虫(U20170)及人源肺孢子虫(DQ473446)同源性均为100%(154/154、155/155)。结论 mtLSU-巢式PCR方法应用于大鼠卡氏肺孢子虫检测敏感性高,特异性强;获得与人源耶氏肺孢子虫相同的Wistar大鼠卡氏肺孢子虫mtLSU的基因序列。
- 张小娟杨芳芳欧阳颐王鸽黎学铭林睿
- 关键词：卡氏肺孢子虫巢式PCR基因序列
- 广西首次发现野生果子狸感染旋毛虫
- 2011年
- 目的对广西龙州果子狸旋毛虫分离株进行虫种研究,确定当地是否存在新虫种。方法对龙州果子狸旋毛虫分离株进行囊包形态学、毒力和保姆细胞形成时间进行实验观察。提取并且扩增该旋毛虫及从德保、南丹野鼠体内分离的旋毛虫、河南旋毛虫分离株细胞色素氧化酶1(COX1)基因,分析同源性及遗传距离,构建系统发生树,并且与Genbank已知的旋毛虫相应基因序列进行对照比较。结果龙州旋毛虫分离株原代囊包的平均大小为328.72μm×236.42μm。小鼠接种旋毛虫(2 000条/只)后,半数死亡天数为24～25d,死亡率为84.62%。小鼠感染后第18d开始形成保姆细胞,第34d后保持在较高水平波动,至56d实验结束时仍可见少量游离幼虫,未见钙化死亡囊。龙州旋毛虫分离株和南丹旋毛虫分离株、河南分离株之间COX1的同源性为99.8%～100.0%,遗传距离为0.000～0.003。龙州旋毛虫分离株、南丹旋毛虫分离株及河南分离株与基因库中T.spiralis COX1基因的同源性为98.8%～99.0%,遗传距离为0.003～0.005。构建的系统发生树显示,果子狸分离株与德保、南丹分离株及Genbank中的T.spiralis在同一分枝,与其它旋毛虫种在不同的分枝。结论广西龙州发现果子狸自然感染旋毛虫,与广西德保、南丹两县野鼠体内分离旋毛虫为同一虫种,即T.spirilas,广西未发现新的旋毛虫种株。
- 欧阳颐黎学铭张鸿满杨益超杨芳芳张小娟王鸽
- 关键词：旋毛虫果子狸系统发生树
- 广西融水县肉孢子虫分离株系统发生关系研究被引量：2
- 2013年
- 目的初步分析和判定融水县肉孢子虫分离株的基因差异和系统发生关系。方法在融水县集市采集猪肉和牛肉样本，分离肉孢子虫包囊，观察包囊形态。提取各肉孢子虫分离株的基因组DNA，以18S rRNA基因为分子标志，对目标基因进行扩增、测序，与GenBank中各肉孢子虫序列进行同源性分析，同时应用最大似然法（maximum likelihood method）及邻位相接法（neighbor-joining method）构建系统发生树，分析亲缘关系。结果从融水县分离到3株肉孢子虫分离株。融水县的肉孢子虫拱洞分离株、良寨分离株1与猪人肉孢子虫（S．suihominis）的同源性高，分别为99．8％和97．4％。肉孢子虫良寨分离株2与人肉孢子虫（S．hominis）的同源性较高，为93．5％。在最大似然法构建的系统发生树上，拱洞分离株与猪人肉孢子虫位于同一分枝；良寨肉分离株1与猪肉孢子虫（S．miescheriana）位于一枝；良寨分离株2单独位于另一分枝，这一分枝与人肉孢子虫及中华肉孢子虫（S．sinensis）所在的分枝较近。在邻位相接法构建的系统发生树上，拱洞分离株与良寨分离株的分枝情况与最大似然法系统发生树相似，但良寨分离株1与猪肉孢子虫均位于独立分枝。结论广西融水县三个肉孢子虫分离株中，拱洞分离株与猪人肉孢子虫、良寨分离株1与猪肉孢子虫较为相似，而良寨分离株2的虫种尚需进一步分析和鉴定。
- 欧阳颐刘莹王静杨芳芳张小娟杜进发
- 关键词：肉孢子虫系统发生关系
- 巢式PCR法检测大鼠卡氏肺孢子虫的敏感性
- 2011年
- 目的探讨mtLSU-巢式PCR法检测大鼠卡氏肺孢子虫的敏感性以及应用于早期检测的可行性。方法大鼠随机分为7组(6组实验组,1组对照组),每组10只,采用地塞米松免疫抑制法诱导实验组大鼠感染肺孢子虫;自第三周开始每周剖杀一组实验鼠,收集第三周至第八周实验组大鼠肺组织(LT)和支气管肺泡灌洗液(BAL)标本,同时采用镜检法和mtLSU-巢式PCR法对大鼠肺组织和肺泡灌洗液标本进行检测。结果采用GMS染色镜检法于第五周开始检出肺孢子虫包囊,第六、七周包囊数最多。而采用mtLSU-巢式PCR法对实验感染大鼠LT和BAL进行检测,卡氏肺孢子虫DNA阳性率分别为第三周100%(10/10)、100%(10/10);第四周100%(10/10)、80%(8/10);第五周100%(10/10)、50%(5/10);第六周90%(9/10)、100%(10/10);第七周100%(10/10)、80%(8/10);第八周100%(8/8)、87.5%(7/8)。结论 mtLSU-巢式PCR法可在无症状的实验大鼠中检出卡氏肺孢子虫并且比镜检法早两周,其敏感性明显高于镜检法。
- 张小娟杨芳芳欧阳颐王鸽林睿黎学铭
- 关键词：卡氏肺孢子虫巢式PCR敏感性
- 广西南宁市郊居民寄生虫感染状况初步调查被引量：8
- 2011年
- 目的:了解广西南宁市郊区居民寄生虫感染状况。方法:采用随机抽样法选择地点和对象,采用改良加藤法检查寄生虫虫卵。结果:调查居民共737人寄生虫总感染率为62.14%。钩虫、蛔虫、鞭虫、华支睾吸虫感染率分别为5.56%、0%、0.68%和56.58%。土源性线虫男女感染差异无统计学意义(P>0.05);华支睾吸虫男女感染差异有统计学意义(χ2=73.245,P=0.000)。土源性线虫感染呈大幅度下降,华支睾吸虫感染成大幅度上升。从地区分布看,扶绥县没有发现土源性线虫,横县和宾阳县的钩虫感染率为14.19%和12.40%,上林县鞭虫感染率为2.99%。4个县的华支睾吸虫感染率平均为56.58%,而且所有年龄组都有华支睾吸虫感染者。结论:广西南宁市郊区居民的钩虫和鞭虫感染率处于较低水平,华支睾吸虫处于较高水平,并成为主要虫种。
- 张小娟杨芳芳林睿王鸽黎学铭欧阳颐
- 关键词：寄生虫
- 广西两地理株钉螺CO Ⅰ基因分析及其与邻近四省钉螺亲缘关系的比较
- 2011年
- 目的了解广西两地理株钉螺细胞色素氧化酶Ⅰ（cytochrome oxidaseⅠ，COⅠ）基因的差异性，探讨广西钉螺与周边邻近4省钉螺的亲缘关系。方法采集广西靖西有肋、横县光壳钉螺，提取DNA，PCR扩增COⅠ基因并测序。登录GenBank检索出云南大理、四川绵竹、湖南岳阳、湖北汉阳4地钉螺的COI基因序列。采用ClustalX软件对上述COⅠ基因排序。采用拟钉螺COⅠ基因序列作为外源性参考基因，Kimura双参数法计算遗传距离，Mega3．1软件中非加权组平均法（UPGMA）、邻接法（NJ）和最小进化法（ME）构建系统发生树。结果广西靖西光壳钉螺与横县有肋钉螺COⅠ基因的遗传距离为0．0505，同源性为95％。广西横县钉螺与湖南岳阳、湖北汉阳、四川绵竹、云南大理钉螺的遗传距离依次为0．0102、0．0171、0．1401、0．1421，COⅠ基因的同源性依次为99％、98％、87％、86％。广西靖西钉螺与湖南岳阳、湖北汉阳、四川绵竹、云南大理钉螺的遗传距离依次为0．0451、0．0505、0．1382、0．1421，COⅠ基因的同源性依次为95％、95％、88％、87％。结论广西有肋钉螺与光壳钉螺基因差异性较小。广西两种钉螺与湖南、湖北钉螺遗传距离较小．同源性较高。广西两种钉螺与四川、云南钉螺遗传距离较大，同源性较低。
- 杨芳芳张小娟林睿王鸽黎学铭欧阳颐
- 关键词：钉螺系统进化树亲缘关系
- 南宁市郊农村居民土源性线虫感染状况调查被引量：1
- 2011年
- 目的了解广西南宁市郊土源性线虫感染现况。方法采用随机抽样法选取调查对象,采用改良加藤法检查虫卵。应用SPSS16.0软件分析资料。结果调查居民共884人,其中男性514人,女性370人,平均年龄为38.48岁。土源性线虫总感染率为5.20%。鞭虫和钩虫感染率分别为0.57%和4.64%,两种虫的感染差异有统计学意义。男、女性钩虫感染率为4.67%和4.60%。男、女性鞭虫感染率为0.58%和0.57%,男女感染差异无统计学意义。从地区分布看,横县和宾阳县居民钩虫感染者相对较多,感染率分别为14.19%和12.4%;上林县鞭虫感染者相对较多,感染率为2.99%。从年龄分布上看,钩虫在30~50岁年龄组有更高的感染率。本次调查结果与2002~2004年调查结果相比,土源性线虫感染率大幅度下降,尤其是蛔虫感染率降至0。结论南宁市郊居民的土源性线虫感染率较低,主要以钩虫和鞭虫感染为主,未发现蛔虫感染者。
- 杨芳芳张小娟王鸽林睿欧阳颐黎学铭
- 关键词：土源性线虫农村居民
- 广西肋壳钉螺和光壳钉螺与邻省钉螺亲缘关系研究
- 目的了解广西肋壳和光壳钉螺形态学及细胞色素氧化酶1 (Cytochrome Oxidase 1,CO1)基因的差异性,探讨广西钉螺与邻省钉螺的亲缘关系。 方法采用单纯抽样法采集广西残存钉螺地区中的肋壳钉螺(横县)和光壳钉...
- 杨芳芳
- 关键词：钉螺系统进化树亲缘关系
- 文献传递
- 我国农村土源性寄生虫病防治新模式探讨被引量：24
- 2011年
- 目的探索我国土源性寄生虫病综合防治新模式。方法在我国选择8个省(自治区)作为土源性寄生虫病综合防治示范区,采取行政部门组织协调、健康教育、药物驱虫以及环境改造等措施开展寄生虫病综合防治。结果通过3年防治,各示范区居民土源性寄生虫感染率大幅度下降。主要的组织保障措施有3种模式,健康教育有3种模式,组织群众服药驱虫有4种模式,改水改厕和整治环境有2种模式。结论通过各示范区的工作,总结提出了具有地方特色,行之有效的寄生虫病综合防治新模式。
- 黎学铭陈颖丹许隆祺周长海欧阳颐林睿杨芳芳张小娟王鸽刘腾王静
- 关键词：寄生虫病示范区
