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抗癌胚抗原免疫毒素生物学功能的研究: 2004年; 为了研究免疫毒素发挥生物学作用的全过程 ,构建了两种不同形式的基于假单胞菌外毒素 (PseudomonasexotoxinA ,PE)的抗癌胚抗原 (carcinoembryonicantigen ,CEA)免疫毒素CEA (Fv) /PE38/KDEL和PE35 /CEA(Fv) /KDEL .用流式细胞术经间接免疫荧光法测定免疫毒素的抗原结合活性 .免疫毒素的内化 (internalization)通过间接免疫荧光标记的方法在激光共聚焦显微镜下进行检测 ,采用流式细胞术进行免疫毒素内化的定量分析 .细胞凋亡采用FITC annexinV/PI双荧光染色方法进行分析 .用噻唑蓝 (MTT)法测定免疫毒素的靶细胞杀伤功能 .对两种形式的免疫毒素在各个功能阶段的性质进行研究和比较 ,全面展现了免疫毒素发挥生物学功能的过程及各个生物作用过程之间的相互影响 ,为详尽的机制研究和免疫毒素的进一步优化改造提供了重要的依据 .; 何丹杨慧晁开林晴黄华樑; 关键词：癌胚抗原 CEA 免疫毒素内吞作用

抗癌胚抗原重组免疫毒素的研究: 免疫毒素用于肿瘤治疗是在现代医学生物学发展的基础上提出的一种新的治疗策略.免疫毒素是由抗体分子或细胞因子等与截短或修饰的毒素分子组合而成的产物.抗体端负责与细胞表面抗原或细胞因子受体结合,而毒素负责引发细胞死亡.CEA(...; 杨慧; 关键词：CEA PE 重组免疫毒素

抗CEA免疫毒素的表达、纯化、复性与生物学活性的研究被引量：2: 2004年; 以抗癌胚抗原 (Carcinoembryonicantigen ,CEA)单链抗体与假单胞菌外毒素 (PseudomonasexotoxinA ,PEA)的截短和修饰形式PE38 KDEL构建重组免疫毒素CEA PE38 KDEL ,并在大肠杆菌菌株BL2 1(DE3)_star中表达。采用镍离子螯合层析法纯化变性的包涵体样品 ,并用连续梯度透析的方法对纯化后的包涵体进行复性。采用流式细胞术鉴定复性产物与靶细胞的结合活性 ,结果表明免疫毒素CEA PE38 KDEL具有与靶细胞特异性结合的活性。以MTT法检测免疫毒素对肿瘤细胞的体外杀伤活性 ,结果表明该免疫毒素对SW1116和CNE_2细胞具有特异性杀伤活性。证明了经包涵体复性的抗CEA免疫毒素CEA PE38 KDEL对表达CEA抗原的肿瘤细胞具有良好的结合和杀伤活性。; 杨慧何丹晁开林晴游松黄华樑; 关键词：重组免疫毒素蛋白复性体外杀伤活性

抗癌胚抗原免疫毒素的生物学活性研究: 目的:研究抗肿瘤免疫毒素对肿瘤细胞的结合、内化、促肿瘤细胞凋亡和杀伤肿瘤细胞的活性。方法:基于假单胞菌外毒素(Pseudomonas exotoxin A,PE)和抗癌胚抗原(Carcinoembryonic antig...; 何丹杨慧晁开林晴黄华樑; 文献传递

氟伐曲坦及其类似物的合成与活性研究: 该论文系统地介绍了偏头痛的发病机理以及5-羟色胺样受体激动剂的抗偏头痛作用,详细阐述了第二代5-HT<,1B/1D>受体激动剂氟伐曲坦的药理作用和特点,并对其合成工艺进行了考察,确定了较好的反应条件,五步反应总收率达23...; 杨慧; 关键词：抗偏头痛; 文献传递

从噬菌体抗体库中筛选出抗原结合活性相近、表达水平不同的单链抗体被引量：1: 2003年; 从抗人膀胱癌改形噬菌体抗体库中筛选出一组相对亲和力常数和细胞结合活性相近的单链抗体 ,而它们的结合活性均明显高于起始的鼠源单链抗体。在亲和力淘选的过程中 ,这一组抗体的表达量存在显著差异 ,这在一定程度上影响到筛选过程中ELISA鉴定的结果 ,使整个筛选过程并不仅仅是对高亲和力抗体的筛选 ,也同时得到了高表达量的抗体。; 何丹晁开杨慧林晴黄华; 关键词：噬菌体抗体库单链抗体肿瘤治疗结合活性

抗膀胱癌重组免疫毒素的可溶性表达及其抗肿瘤活性被引量：5: 2004年; 目的 :构建抗膀胱癌重组免疫毒素BDI 1 PE38/KDEL的可溶性表达载体 ,并表达、纯化具有抗肿瘤活性的可溶性蛋白。方法 :将抗膀胱癌重组免疫毒素BDI 1 PE38/KDEL的基因片段 ,插入含有大肠杆菌脯氨酰顺反异构酶FkpA基因的共表达载体pTMFK中 ,构建重组共表达载体pTMFK IT。以重组质粒转化大肠杆菌BL2 1(DE3) Star,共表达目的蛋白与FkpA。表达产物以镍离子金属螯合层析柱及抗PE抗体亲和柱层析进行纯化。用ELISA检测免疫毒素的抗原结合活性 ,用噻唑蓝(MTT)法进行体外细胞杀伤实验。结果 :成功地构建了抗膀胱癌免疫毒素基因与FkpA基因的共表达载体 ,并获得纯度较高的目的表达产物。纯化后的表达产物与BIU 87膀胱癌细胞膜抗原具有良好的特异性结合活性 ,对BIU 87膀胱癌细胞有明显的体外特异性杀伤作用。结论 :获得了对膀胱癌细胞具有显著特异性杀伤活性的免疫毒素。; 晁开何丹杨慧张众林晴郭蔼光黄华樑; 关键词：免疫毒素膀胱癌可溶性表达细胞毒性

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杨慧