杨应斌
- 作品数：8 被引量：33H指数：3
- 供职机构：西南大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学社会学更多>>
- 一种用于梗死心肌修复与血管重建的细胞移植组合物
- 本发明的目的是提供一种用于梗死心肌修复与血管重建的细胞移植组合物，该组合物包括移植辅助细胞，以及体外制备心肌前体细胞的基因工程载体。移植辅助细胞具有植入到心梗区瘢痕组织后，可以促进心梗区血管的生成，同时提高心肌前体细胞移...
- 杨应斌蔡绍皙杨力蔡绍晖于淑惠李军华
- 文献传递
- 蛋白精氨酸N-甲基转移酶4上调八聚体结合转录因子4表达促进胃癌细胞的干性被引量：2
- 2018年
- 目的探讨蛋白精氨酸N-甲基转移酶(protein arginine N-methyltransferase,PRMTs)调控八聚体结合转录因子4(octamer-binding transcription factor4,Oct4)的表达及其对胃癌细胞"干性"的影响。方法以pc DNA3.1载体构建PRMT4过表达质粒,转染至人胃腺癌MKN45细胞;倒置相差显微镜下观察肿瘤细胞成球能力的变化;qRT-PCR和Western blot检测胃癌干细胞标志物CD44、Lgr5及"干性"维持分子Nanog、Oct4的改变;继而构建含Oct4基因启动子荧光素酶报告载体,分析PRMT4对Oct4启动子活性的影响;最后采用染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation,Ch IP)实验证实PRMT4与Oct4基因启动子结合情况。结果 MKN45细胞转染蛋白精氨酸N-甲基转移酶-4基因过表达载体后,形成肿瘤干细胞球的能力显著增强;随后qRT-PCR及Western blot检测结果显示胃癌干细胞标志物CD44、Lgr5的mRNA及蛋白水平上调;此外,过表达PRMT4可明显增加"干性"维持分子Oct4的mRNA及蛋白水平,而对Nanog则无明显影响;双荧光素酶实验结果显示,与对照组相比,PRMT4过表达组Oct4的启动子活性明显增强(P<0.05);染色质免疫共沉淀实验结果证实,PRMT4可与Oct4启动子结合。结论 PRMT4可结合至Oct4基因启动子上,通过增加启动子活性,从而促进Oct4转录及表达,进而增强胃癌细胞的干性。
- 吴玉云杨泓莹覃勇汪苏敏张亚丽刘胜伟杨仕明杨应斌
- 关键词：肿瘤干细胞转录调控
- hTERT启动子介导自杀基因在肿瘤细胞中的靶向表达被引量：3
- 2007年
- 肿瘤的基因治疗中，如何保证自杀基因只在特异性组织或细胞中表达而不在人正常组织细胞中表达是一个亟待解决的问题。与特异性组织来源的启动子如CEA启动子、AFP启动子、Tyr启动子等启动子相比，运用hTERT启动子能够驱动自杀基因在端粒酶阳性的肿瘤细胞中靶向表达，更具广谱性，因此在肿瘤治疗中成为一个有广阔前景的新方法。
- 李军蔡绍皙杨应斌
- 关键词：HTERT启动子肿瘤细胞自杀基因靶向表达介导AFP启动子
- 分子生物学创新实验教学模式的探索被引量：24
- 2009年
- 分子生物学是一门实践性很强的学科。分子生物学实验复杂而细腻,技术性很强,是理论和实践相结合的典型课程。如何改进实验体系,提高学生实验动手能力、设计能力、分析能力和创新能力是分子生物学实验教学中重要的研究课题。文中通过优化实验教学内容、建立开放性实验和改进实验成绩考核方式和内容等方面着手进行改革,从而提高分子生物学实验教学质量,培养学生综合素质。
- 蒋曹德廖志华杨应斌曾令江杨春贤李娟
- 关键词：分子生物学实验教学改革
- 基于信息熵的蛋白质二级结构预测算法的准确性研究
- 2008年
- 通过分析信息熵的概念内涵,提出基于信息熵的蛋白质二级结构预测算法的准确性评价方法,与现有方法相比,这种方法更全面,不仅能确定假阳性率,假阴性率,还能确定预测值与实际值之间的不确定性的减少量即预测值与实际值之间的互信息.
- 于淑惠杨应斌
- 关键词：性能评价信息熵相对熵互信息蛋白质二级结构
- 人骨髓干细胞源性恶性转化细胞的靶向清除
- 背景:人类骨髓干细胞(human bone marrow stem cells, hBMSC)移植给许多病人带来了希望的同时也带来了风险。干细胞治疗所带来的所有风险中,最严重而且最引人注目的是干细胞植入体内后发生恶性转化...
- 杨应斌
- 关键词：恶性转化骨髓干细胞
- 文献传递
- 端粒酶hTERT亚单位启动子靶向性慢病毒对肿瘤活体实时显像的实验研究被引量：3
- 2010年
- 目的构建一种含优化型人端粒酶催化亚单位(hTERT)启动子的慢病毒,结合小动物活体光学成像系统,研究该启动子对端粒酶阳性肿瘤的特异性活体成像作用。方法将文献报道的优化型hTERT启动子克隆到pGL-Basic质粒,对优化型hTERT启动子进行功能检测。确定其驱动活性之后,构建一种含该启动子和GFP的第3代慢病毒表达系统,以含CMV启动子的慢病毒作为对照。采用小动物荧光成像系统体内外研究优化型hTERT启动子在肿瘤实时诊断中的作用。结果启动子功能检测发现hTERT启动子具有严格的端粒酶阳性肿瘤细胞特异性,并且具有很高的报告基因报答水平。第3代慢病毒包装系统获得了高滴度的病毒颗粒并且能高效整合报告基因之宿主细胞。体外研究表明,含有优化型hTERT启动子的慢病毒体外感染细胞后,能够在端粒酶阳性肿瘤细胞内特异表达GFP,并且能维持长达40d的报告基因表达时间。体内实验发现,感染含优化型hTERT启动子的慢病毒之后24h,端粒酶阳性活体肿瘤能够被特异性的实时观察到,并且肿瘤内的GFP信号在存活裸鼠体内维持30d,随肿瘤增大而增强。结论优化后hTERT启动子对报告基因的调控具有严格的端粒酶特异性,第3代慢病毒系统可将该启动子和报告基因整合至细胞基因组,并实现在端粒酶阳性肿瘤细胞内的特异表达。结合小动物活体光学成像系统,荷瘤裸鼠内的端粒酶阳性肿瘤能够被无创的、实时的、特异性的成像,为肿瘤的特异性早期诊断提供新的实验理论基础。
- 余松涛杨应斌史春梦陈陵汤旭东黎川师红磊李长珠李宁王国珍吴玉云房殿春杨仕明
- 关键词：分子显像慢病毒
- E-box元件修饰端粒酶核心启动子序列及体外转录活性分析(英文)被引量：1
- 2009年
- 人类端粒酶启动子(hTERT启动子)在肿瘤基因治疗中的有效性已经得到了证实.然而,hTERT启动子有限的肿瘤靶向转录活性困扰着它的临床应用.早期研究已经揭示,核心hTERT启动子上的-34位E-box元件与该启动子的肿瘤靶向转录活性有关.为进一步探索核心hTERT启动子序列3′端富余E-box元件是否能提高启动子的肿瘤靶向转录能力,用化学合成方法在野生型hTERT(WT-hTERT)核心启动子片段(编码蛋白起始子ATG上游-268bp～-10bp)的3′端接入3个E-box序列,构建成修饰型hTERT(Mod-hTERT)启动子.然后,分别用WT-hTERT和Mod-hTERT启动子去调控增强型绿色荧光蛋白(EGFP)及荧光素酶报告基因在293FT、HepGⅡ、SGC7901、U2OS、以及原代培养人成纤维细胞(PHF)中表达.结果表明,在Mod-hTERT启动子的各实验组细胞中,能够在端粒酶阳性的293FT、HepGⅡ及SGC7901细胞组中观测到EGFP的表达,而在端粒酶阴性的U2OS及PHF细胞组中没有观测到EGFP的表达;在端粒酶阳性的293FT、HepGⅡ和SGC7901细胞株中,Mod-hTERT启动子调控下的荧光素酶活性要高于WT-hTERT启动子组(P<0.01);而在端粒酶阴性的U2OS细胞组中,Mod-hTERT启动子调控下的荧光素酶活性则低于WT-hTERT启动子组(P<0.01);在PHF细胞组中,Mod-hTERT启动子组与WT-hTERT启动子组的荧光素酶活性差异不显著(P>0.05).研究提示,在3′端增加E-box元件可以提高核心hTERT启动子序列的肿瘤靶向转录活性.
- 杨应斌蔡绍皙于淑惠杨力李军余松涛戴小珍王星星晏小清辛鑫宋国立
- 关键词：E-BOX荧光素酶增强型绿色荧光蛋白肿瘤靶向性
