杨占山
- 作品数：71 被引量：150H指数：7
- 供职机构：苏州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国防基础科研计划江苏省高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学核科学技术理学更多>>
- 原核pprI基因活体转染对BALB/c小鼠急性放射损伤保护作用的研究被引量：3
- 2015年
- 目的 研究耐辐射奇球菌pprI基因活体转染对小鼠急性放射损伤的防护作用.方法 采用SPF级纯品系BALB/c雄性小鼠,应用活体电转染技术,将pEGFP-c1空载质粒及pEGFP-c1-pprI基因重组质粒转入小鼠股前肌肉.应用60Coγ射线进行全身照射,死亡率观察组吸收剂量为6 Gy,观察照后30 d内小鼠死亡率的变化;放射效应观察组吸收剂量为4 Gy,于照后1、7、14、28和35 d观察小鼠外周血象、胸腺、脾脏和骨髓细胞的凋亡率,并于照后第7和28天观察小鼠肺脏和睾丸组织的病理变化.结果 质粒注射剂量为50 μg/50μl,电场强度为200 V/cm时转染肌细胞的效率最高.pEGFP-c1-pprI基因重组质粒转染组小鼠急性辐射死亡率为30％,显著低于单纯照射组（60.0％）和空载体组（63.3％）（x2=4.90、6.24,P＜0.05）.与单纯照射组、空载体组比较,pEGFP-c1-pprI基因重组质粒转染组小鼠的外周血白细胞计数在照后1、7、14和28 d显著增高（F=16.26、8.10、6.37、10.74,P＜0.05）,血小板计数在照后第7和14天显著增高（F=7.36、5.71,P＜0.05）,淋巴细胞百分率在照后7d显著增高（F=18.43,P＜0.05）;胸腺和骨髓细胞凋亡率均在照后第1、7、14、28和35天显著降低（F=3.88、14.91、14.14、39.86、5.65,P＜0.05;F=53.70、11.75、21.78、41.40、4.54,P＜0.05）;脾脏细胞凋亡率在照后第1、7、14和28天显著降低（F=97.95、56.61、33.55、14.71,P＜0.05）.pEGFP-c1-pprI基因重组质粒转染组小鼠肺脏和睾丸的放射病理损伤较轻并且恢复较快.结论 耐辐射奇球菌pprI基因活体电转染对BALB/c小鼠急性放射损伤具有显著的保护作用,为进一步临床应用奠定了实验基础.
- 施怡文玲任丽丽杨占山
- 关键词：耐辐射奇球菌BALB/C小鼠急性放射损伤
- 一种高吸液速率的高吸水性树脂及其制备方法
- 一种高吸液速率的高吸水性树脂及其制备方法，按照质量百分比计，由2～10wt%PVA、18～26wt%PAAS和3～9wt%AMPS组成聚合物和单体的水溶液，加热溶解，应用电子束辐射交联和接枝合成共聚物凝胶，然后经浸洗液溶...
- 杨占山卢祖坤李莉岳凌杨淑琴朱南康
- 文献传递
- 抗辐射菌pprI基因活体转染对小鼠辐射损伤的作用及其机理研究
- 目的：抗辐射球菌中的PPfI基因是一个能够促进细菌体内recA、 pprA等直接参与DNA损伤修复基因表达的开关基因,在抗辐射球菌的极端抗性中起重要作用.该基因对中子辐射损伤的防护作用已被证实.然而,该基因对哺乳动物γ射...
- 杨占山陈婷婷连利霞牟英
- 一种含有原核基因pprI的真核重组质粒及其用途
- 本发明公开了一种含有原核基因pprI的真核重组质粒，所述重组载体为pCMV－HA－pprI，所述重组质粒可以通过活体电转染进入动物体内，表达pprI基因蛋白，对动物急性重度放射损伤具有显著的抗放和救治作用，并且半寿期长，...
- 杨占山李娜王天昶
- 文献传递
- 抗辐射球菌pprI基因活体电转染救治小鼠γ射线损伤的实验研究被引量：8
- 2010年
- 为研究抗辐射球菌pprI基因活体电转染对哺乳动物急性放射损伤的影响,探讨一种新的救治放射损伤的转基因技术。将自行构建的pCMV-HA-pprI质粒注入接受γ射线照射的小鼠肌肉内,采用活体基因电转导技术将该基因导入细胞内,观察照后第1、7、14、28和35天小鼠死亡率、血细胞计数以及骨髓细胞、脾脏和胸腺淋巴细胞凋亡的变化。结果显示,6Gyγ射线可引起小鼠急性致死性放射损伤,转基因组小鼠死亡率(1/10)明显低于单纯照射组小鼠死亡率(4/10)。与单纯照射组和空载体转染组比较,pprI基因转染组小鼠外周血白细胞总数及红细胞总数于照后第7天显著增高(p<0.05);血小板数于第7、14天显著增高(p<0.05);血淋巴细胞百分率于照后35天恢复正常;pprI基因转染组脾细胞凋亡率于第7、14、28天显著降低(p<0.05);胸腺细胞凋亡率于第1、7、14、35天显著降低(p<0.05);骨髓细胞凋亡率于第1、7、14和28天显著降低(p<0.05),并且胸腺细胞和骨髓细胞凋亡率均于照后28天恢复正常。结果表明,抗辐射菌pprI基因活体电转染对动物急性致死性放射损伤具有明显的防治作用。
- 陈婷婷连利霞牟英杨占山
- 关键词：PPRI转基因
- 一种DNA分子及毕赤酵母重组质粒和高效表达耐辐射球菌PprI蛋白的毕赤酵母重组菌
- 本发明涉及生物技术领域，公开了包含SEQ ID NO:1所示序列的DNA分子，以及插入所述DNA分子的毕赤酵母重组质粒和转化所述毕赤酵母重组质粒到毕赤酵母感受态细胞并高效表达耐辐射球菌PprI蛋白的毕赤酵母重组菌。本发明...
- 杨占山吴伟乔惠萍文玲施怡任丽丽于冬
- 文献传递
- 以人为本提高放射毒理学教学质量
- 2006年
- 在教学过程中,贯彻以人为本的理念,从提高教师素质、运用多种教学方法、激发学生的实验兴趣及营造学习自由的良好氛围等几方面着手,提高放射毒理学教学质量。
- 崔凤梅涂彧杨占山
- 关键词：以人为本放射毒理学教学质量
- 一种水凝胶药物缓释膜的制备及其性能研究被引量：10
- 2009年
- 研制一种能加速伤口愈合的水凝胶药物缓释膜。应用冷冻-解冻法制备了含(或不含)药物的水凝胶膜,研究其理化性能及药物体外释放规律;应用扩散法研究了冷冻-解冻过程对庆大霉素效价的影响。结果显示,冷冻4 h形成的水凝胶溶胀度为841.21%,凝胶分数、抗张强度和断裂伸长率分别为96.10%、0.222 MPa和673.50%;冷冻4 h的冻融过程对硫酸庆大霉素的效价无影响(p>0.05);掺加药物的水凝胶膜在6 h内药物快速释放达高峰,累计释放率为59.57%,而后缓慢释放,持续到第5天,其释放规律符合Higuchi方程,释药原理属骨架型扩散释放机制。结果表明,该法制备的水凝胶膜具有良好的理化性能和抗生素缓释功能。
- 岳凌杨占山杨淑琴李清华
- 关键词：缓释性能药物释放
- 耐辐射球菌pprI基因真核表达载体的构建及其抗辐射作用被引量：2
- 2014年
- 目的 研究耐辐射球菌pprI原核基因的真核表达载体的构建及其转染对离体真核细胞急性放射损伤的防护作用.方法 应用DNA重组技术构建pEGFP-c1-pprI质粒;采用脂质体转染技术分别将空载体质粒pEGFP-c1和重组质粒pEGFP-c1-pprI转入人肺上皮细胞系Beas-2B细胞,筛选稳定转染细胞系;应用集落形成实验检测受照转染细胞的生存能力;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率的变化;荧光显微镜观察受照细胞ROS荧光强度;免疫荧光实验观察受照细胞不同时间γ-H2AX焦点数目.结果 成功地构建了pprI原核基因的真核表达载体,并在Beas-2B细胞中表达了PprI融合蛋白,建立了稳定转染细胞系.与空白对照组和空载体组相比,细胞克隆生存曲线显示转染了pprI基因的Beas-2B细胞经不同剂量辐射,其存活分数SF增加,该曲线参数D0、Dq、N增高;转染了pprI基因的Beas-2B细胞受照后的ROS的荧光强度和不同时间（1、2、4 h） γ-H2AX的焦点数均显著减低（F=16.73、19.47、6.94,P＜0.05）;此外,该细胞G2期阻滞（F=139.73、237.92,P＜0.05）和凋亡率显著减低（F=626.02、2 052,P＜0.05）.结论 耐辐射球菌pprI原核基因可在离体真核细胞中稳定表达,并且显著提高受照真核细胞的辐射抗性.
- 文玲施怡任丽丽丛瑛杨占山
- 关键词：耐辐射球菌急性放射损伤辐射抗性
- 中子辐射诱发人外周血染色体畸变、微核HPRT基因突变的比较研究被引量：4
- 2009年
- 目的研究中子辐射诱发离体人外周血淋巴细胞染色体畸变率、微核率和HPRT基因突变率作为中子辐射的生物剂量计的可能性。方法采用14MeV中子等剂量率照射离体人外周血,吸收剂量范围0~1Gy,秋水仙素阻断法检测染色体畸变率,CB细胞法和常规培养法检测微核率,多核细胞法检测HPRT基因突变率,建立相应的剂量效应曲线,比较各指标间的相关性。结果在该剂量范围内,各指标与剂量关系符合现行平方模型,染色体畸变、微核呈过离散分布,三者有线性相关性。染色体畸变率灵敏度最高,其次是CB细胞法微核率,再次是常规培养法微核率,HPRT基因突变率最低。结论中子辐射事故可采用准确灵敏的染色体畸变率和CB细胞法微核率作为生物剂量计进行辐射种类判定和生物剂量估算。
- 唐大川杨占山杨淑琴
- 关键词：染色体畸变率微核率
