李赞
- 作品数：2 被引量：68H指数：1
- 供职机构：中山大学更多>>
- 相关领域：经济管理医药卫生更多>>
- 货物贸易与服务贸易互补性的实证分析——兼论中美贸易不平衡的实质被引量：67
- 2000年
- 加拿大Waterloo大学James R.Melvin 1989提出,当开展要素服务商品贸易时,出口服务的国家必然将在货物贸易上存在逆差。服务出口国在货物贸易上出现逆差,反映了服务部门的比较优势。这一实证结论说明现阶段中美两国政府及企业都不可能从根本上改变中美贸易不平衡的局面。并且,改变这种局面既不利于中国,也同样不利于美国经济的稳定发展。中国加入世贸组织后,中国政府开放本国服务市场应充分考虑到货物贸易与服务贸易的这个互补性特征,开放本国服务市场应当与货物贸易的开放力度相互协调。
- 谢康李赞
- 关键词：货物贸易服务贸易实证分析中美贸易
- 塔城病毒1重组核蛋白的原核表达和纯化被引量：1
- 2021年
- 目的通过原核表达系统表达可溶性塔城病毒1(Tacheng tick virus 1,TcTV-1)重组融合核蛋白(nucleoprotein, NP)并纯化获得纯度高和均一度好的目的蛋白。方法利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)从经密码子优化的重组质粒中扩增TcTV-1核蛋白的编码基因,构建带有小分子泛素样修饰蛋白(small ubiquitin-like modifier, SUMO)融合标签的重组质粒pET-21a-TcTV-1-NP,转化入表达菌株BL21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside, IPTG)诱导高表达量菌株。采用镍离子金属鳌合亲和层析介质(Ni-NTA)亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析提纯目的蛋白。结果经PCR扩增的目的基因TcTV-1核蛋白和质粒载体pET-21a进行重组质粒构建,电泳结果显示,在约6 000 bp处可见条带,与重组质粒pET-21a-TcTV-1-NP大小相一致;重组质粒转入大肠埃希菌BL21(DE3),在16℃,0.2 mmol/L IPTG诱导下表达出大量可溶性蛋白,收集并重悬菌体后,经低温高压和超声破碎后,细菌上清液经Ni-NTA亲和层析纯化,在250 mmol/L咪唑洗脱液中获得目的蛋白;去除融合标签后,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE)结果显示在相对分子质量为50 000附近处出现明显条带,与目的蛋白相对分子质量为48 800相一致;目的蛋白通过阳离子交换层析,得到1个蛋白洗脱峰;经凝胶过滤层析再次纯化,收集相应的蛋白洗脱峰,经SDS-PAGE结果显示目的蛋白大小正确,纯度较高。结论 TcTV-1重组融合核蛋白在大肠埃希菌内以可溶性形式成功表达,为进一步研究TcTV-1核蛋白的作用机制和相应血清学检测方法的开发提供了重要的基础。
- 李赞杜珊王伟佳孙力涛
- 关键词：布尼亚病毒核蛋白蛋白纯化
