李红霞 作品数:24 被引量:78 H指数:6 供职机构: 珠海市疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 珠海市软科学研究计划项目 广东省医学科学技术研究基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
氟致培养大鼠大脑皮层星形胶质细胞凋亡 目的探讨NaF诱导体外培养大鼠大脑皮层星形胶质细胞凋亡机制。方法体外分离纯化培养获得纯度达98%以上的大鼠大脑皮层星形胶质细胞(特异性抗GFAP免疫化学鉴定),分别用浓度为1、2、5mmol/L NaF对星形胶质细胞染毒... 李红霞 黄厚今关键词:氟 星形胶质细胞 细胞周期 细胞凋亡 文献传递 珠海市2007-2008年乙型流感病毒基因特性分析 被引量:10 2010年 目的了解珠海市近两年乙型流感病毒的基因变异情况。方法采集珠海市流感样病例样本进行流感病毒的分离和鉴定,并对分离到的乙型流感病毒进行核酸的提取,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增病毒基因后进行病毒血凝素HA1基因核苷酸序列测定,用Mega、DNA Star、GeneDoc软件对测序结果进行分析处理,并与WHO推荐的疫苗株基因序列进行比对。结果 2007-2008年分离的乙型流感毒株分属于Yamagata系和Victoria系两个谱系,谱系内毒株间距离很近。Yamagata系毒株与B/Brisbane/3/2007的核苷酸同源性极高,在99.4%~99.7%之间;Victoria系乙型流感病毒株与B/Malasia/2506/2004的核苷酸同源性亦很高,在98.6%~99.1%之间。与疫苗株和其它流行株相比,本次分离的两个谱系毒株均未发现核苷酸的丢失和插入,但均增加一个潜在的糖基化位点。结论珠海市人群交替流行着Yamagata系和Victoria系两个抗原性不同的进化系的乙型流感病毒,病毒的基因发生了变异。2007-2008两年WHO推荐的乙型流感疫苗株与我地区当年流行株为不同谱系毒株,预防保护效果不好。 张丽荣 林毅雄 李红霞 魏泉德 张静涛 方艳梅 周兰兰 郑予柯关键词:乙型流感病毒 血凝素基因 核苷酸序列 2013年广东省珠海市手足口病病原学研究 被引量:7 2015年 目的了解2013年珠海市手足口病病原构成和流行病学规律。方法收集2013年珠海市手足口病临床诊断病例粪便标本215份,采用荧光RT-PCR和巢式RT-PCR进行病原学检测。结果 215份病例中,183例肠道病毒阳性,其中EV71阳性45例(24.59%)、Cox A16阳性8例(4.37%)、非EV71/非Cox A16的其他肠道病毒阳性130例(71.04%)。130例其他肠道病毒阳性标本中,113例的序列测定结果 Cox A6有93例(50.82%),Cox A10有9例(4.92%),Cox A2、Cox A5、Cox A4、Cox A20、Cox A14和Echo9各有少部分病例。8个血清型与各原型株之间的遗传距离较远,但每个型别的毒株都有高度相似的国内株存在。Cox A6和EV71检出高峰分别在9月和5月;Cox A6和EV71病例间平均年龄差异有统计学意义(P<0.05);Cox A6、EV71、Cox A10和Cox A16病例间男女比例差异无统计学意义(P=0.54)。结论 2013年珠海市手足口病前4位病原体依次为Cox A6、EV71、Cox A10和Cox A16。Cox A6和EV71发病有较明显的季节性,Cox A6组的平均年龄 周兰兰 魏泉德 张丽荣 林毅雄 李红霞 郑予柯关键词:手足口病 病原学 分子分型 流行病学 2007年-2008年珠海地区H3N2亚型流感病毒HA1基因特性研究 被引量:5 2010年 目的:了解珠海市2007年-2008年H3N2亚型流感病毒流行情况及血凝素基因变异情况。方法:按照时间顺序,随机选取12株2007年-2008年珠海市分离的H3N2亚型流感病毒株进行血凝素HA1序列测定并推导出其氨基酸序列进行分析。结果:H3N2亚型流感病毒在2007年为优势株,2008年成为弱势株。2007年分离株与该年疫苗株比较多数增加了1个糖基化位点,抗原决定簇有4个氨基酸位点发生了替换,并导致其抗原性发生漂移。2008年分离株氨基酸序列与该年疫苗株比较未发生明显变异。结论:2007年根据WHO疫苗推荐株生产的疫苗对该年我市H3N2亚型流感预防效果不好,以致于H3亚型在我市该年度成为优势株,引起广泛流行。2008年H3N2亚型流感病毒为该年度流感流行的弱势株,其HA1基因序列与该年度疫苗株相比未发生明显变异,对人群的保护效果较好。 张丽荣 林毅雄 魏泉德 李红霞关键词:血凝素 基因分析 2008-2009年珠海市乙型流感病毒HA1基因特性分析 被引量:1 2010年 目的了解珠海市2008-2009年乙型流感病毒HA1基因变异情况。方法按照采样时间,选取珠海市2008-2009年每月用狗肾传代细胞(MDCK)培养分离到的第1、2株乙型流感毒株共25株,没分离到毒株的月份不选,提取病毒RNA,RT-PCR扩增HA1基因片段,产物纯化测序,推导氨基酸序列,进行基因进化特性分析。结果 2008年珠海市乙型流感毒株在8月达到分离高峰,晚于A型流感毒株分离高峰时间7月,2009年其在4月达分离高峰,早于A型流感毒株分离高峰时间5月。2008-2009年珠海市流行的乙型流感病毒优势株为Victoria系病毒。与北半球国际疫苗株B/Florida/4/2006 like-virus(GenBank序列号CY033876.1)相比,2008-2009年珠海市流行的Yamagata系乙型流感病毒HA1片段有7个氨基酸位点发生替换:分别是103 K→R,212D→N,其中08-1267、09-0233和09-0240毒株的218N→S,08-190毒株的123P→A、245S→G、270P→S,除08-190外另5株毒株的181N→Y、245S→D,氨基酸同源性高于97%。其中有2个参与构成抗原决定簇的氨基酸位点发生替换,没有发生病毒抗原漂移。Victoria系毒株与疫苗代表株的同源性低于89%。结论 2008-2009年珠海市流行的Yamagata系乙型流感病毒与疫苗代表株同源性极高,本年度的流感疫苗株对珠海市乙型流感病毒流行的防治起了一定作用。2008-2009年珠海市流行的乙型流感病毒优势株属Victoria系,故本年度的流感疫苗株不能对珠海地区流行的乙型流感提供最佳保护。珠海市2008年乙型流感病毒流行时间较长,2009年流行高峰提前可能与此有关。 李红霞 魏泉德 张丽荣 张静涛 林毅雄 周兰兰 方艳梅 郑予柯关键词:乙型流感病毒 基因特性 2008~2009年珠海市H3N2亚型流感病毒HA1基因特性分析 被引量:4 2011年 为了解20082009年珠海市H3N2亚型流感病毒HA1基因变异情况,选择珠海市20082009年期间不同时间点的经狗肾传代细胞(MDCK)培养分离的H3N2亚型流感毒株20株,提取病毒RNA,通过RT-PCR扩增HA1基因片段,将产物纯化并测序,推导氨基酸序列,进行基因进化特性分析。与同时期的疫苗株比较,2008年珠海市流行的H3N2亚型流感毒株HA1区抗原决定簇的氨基酸位点变异数少于4个;2009年珠海市流行的H3N2亚型流感毒株除09-0056外,HA1区存在5个位于抗原决定簇内的变异氨基酸位点。2008年H3N2亚型流感毒株的HA1区的糖基化位点与疫苗株一致;2009年H3N2亚型流感毒株HA1区丢失第144位糖基化位点。20082009年H3N2亚型流感毒株RBS氨基酸序列未见明显变异。与2008年H3N2亚型流感毒株比较,2009年H3N2亚型流感毒株HA1区抗原决定簇内存在多个位点的氨基酸替换。这些说明2008年珠海市流行的H3N2亚型流感病毒不是新变种;2009年流行的H3N2亚型流感病毒为新的变异株,这可能是H3N2亚型流感病毒在2009年6-9月为珠海地区季节性流感流行优势株的原因。 李红霞 魏泉德 张丽荣 张静涛 林毅雄 方艳梅 郑予柯关键词:H3N2亚型流感病毒 HA1基因 2005-2007年珠海市流感监测分析 被引量:6 2008年 目的分析珠海市2005-2007年流感流行特征。方法采集监测医院和疑似流感疫情的流感样病例咽拭子标本,用狗肾传代细胞(MDCK)进行流感病毒分离培养,采用血凝抑制试验(HI)进行流感病毒型别鉴定。结果2005-2007年共检测疑似流感样病例标本2446份,分离到流感病毒311株,分离率为12.7%,其中H1N1亚型108株、H3N2亚型117株、B型86株,分别占34.7%、37.6%和27.7%。2005年、2006年流感病毒的分离率均高于2007年流感病毒的分离率(均P<0.01);2005年、2006年为H1N1、H3N2和B型同时流行;2007年未分离到HlN1亚型,为H3N2与B型同时流行。结论珠海市2005年和2006年流感病毒较活跃,2007年较平稳;2007年的流行优势毒株由2006年的H1N1亚型变为H3N2亚型。3-7月份为流感疫情高发期,应加强此期的流感监测。 张丽荣 李红霞 魏泉德 杨春晓 黄利群 叶中文关键词:正粘病毒科 带病原状态 金黄色葡萄球菌肠毒素A、B、C、E快速分型检测 2015年 目的 建立能在同一PCR反应条件下同时检测SEA、SEB、SEC、SEE的PCR快速检测方法,以用于金黄色葡萄球菌引起的食源性疾病的快速诊断。方法根据GenBank公布的SEA、SEB、SEC、SEE基因的保守序列,利用Vector NTI suite 8软件设计SEA/SEE、SEB/SEC通用PCR引物来特异性扩增相应的基因片段,通过优化反应条件,建立在同一PCR反应条件下同时检测SEs各型的PCR检测方法,同时进行常见食源性致病菌的特异性分析及灵敏度分析,扩增产物进行测序鉴定。结果金黄色葡萄球菌肠毒素SEA、SEE引物扩增后电泳片段位于目的片段330 bp处,SEB、SEC片段位于目的片段258 bp处,SEA、SEB、SEC和SEE基因PCR产物的电泳片段位于目的片段的579、602、601和125 bp处,结果均显示引物扩增和PCR扩增产物均有预期大小的目的DNA片段。本方法中的基因引物的PCR扩增金黄色葡萄球菌、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、伤寒沙门菌、痢疾志贺菌、大肠杆菌O157:H 7、副溶血性弧菌、奇异变形杆菌、福氏志贺菌、肠毒素型大肠埃希菌、肠侵袭型大肠埃希菌、肠致病型大肠埃希菌、肠出血型大肠埃希菌均未出现预期大小的目的条带。本方法敏感性达80~100 CFU/mL。结论本检测方法所建立的PCR可用于金黄色葡萄球菌肠毒素A、B、C、E型别食物中毒的快速诊断和分型检测。 黄辉涛 魏泉德 林毅雄 李红霞关键词:聚合酶链反应 葡萄球菌 金黄色 肠毒素类 2008年珠海肠道病毒71型分子流行病学研究 被引量:9 2009年 目的通过扩增VP1节段的核苷酸序列,对2008年珠海暴发流行的EV 71进行种系进化分析。方法选取10例手足口病暴发流行中的EV71阳性病例标本用一对特异引物进行VP1全基因核苷酸序列扩增,由生物技术公司在ABI3730型自动测序仪上测序,序列结果用Claxter、DNA Star、Mega软件进行分析。结果本文的10株病毒与C基因型代表株比较接近,核苷酸同源性在88.2%~99.2%之间,氨基酸同源性在98.7%~99.7%之间;尤其与C4基因型最为相近,与C4基因型相比较核苷酸同源性在97.6%~99.2%之间,氨基酸同源性在99.3%~99.7%之间;而与A、B基因型代表株比较差异较大,核苷酸同源性只在81.8%~84.4%之间,氨基酸同源性在94.6%~98.0%之间;说明本文的10株病毒皆属于EV71病毒C基因型、C4亚型。结论珠海和新会的病毒株可能与阜阳和浙江分离的EV71病毒有相同的起源,均属于C4亚型,并且C4亚型病毒在中国大陆可能有较广泛的分布和传播,因此加强各地流行的EV71病毒基因特征分析,进而探索EV71病毒的可能进化途径,对于肠道病毒的基础研究和防范EV71在中国的大规模暴发与流行具有重要意义。 张丽荣 林毅雄 李红霞 魏泉德 方艳梅 郑予柯 张静涛关键词:肠道病毒71型 VP1 分子流行病学 珠海市2008年H1N1亚型流感病毒血凝素HA1基因特征分析 被引量:2 2010年 目的了解2008年珠海地区流行的H1N1亚型流感病毒血凝素重链区HA1基因特征。方法按照时间不同选取7株2008年珠海市分离到的H1N1亚型流感毒株,选取的毒株进行血凝素HA1片段序列测定并推导出其氨基酸序列进行基因进化特性分析。结果H1N1亚型流感毒株为珠海市2008年的优势株,与该年WHO推荐疫苗株比较有多个氨基酸发生了替换,造成抗原性发生一定的变化。结论2008年根据WHO疫苗推荐株生产的疫苗对该年珠海市H1N1亚型流感预防效果并不理想,导致2008年珠海市H1N1亚型的流行强度增加。 林毅雄 张丽荣 魏泉德 张静涛 李红霞 周兰兰 郑予柯 方艳梅关键词:血凝素 基因分析