李娟
- 作品数：22 被引量：23H指数：3
- 供职机构：南京农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 虚拟仿真实验在动物科学专业教学中的运用被引量：1
- 2024年
- 随着科技的快速发展,虚拟仿真技术已经在许多领域取得了显著成果。在高校新农科旗帜下的动物科学专业教学中,存在着周期长、成本高、实习场所缺乏等问题,而虚拟仿真技术正是其最优解,因此在实验课程教学中运用也日益增多。从理论与实践的角度,对虚拟仿真在动物科学专业教学中的运用进行了探讨,以期为动物科学领域的研究与教学提供参考。
- 张金璧徐世永潘增祥李娟
- 关键词：动物科学实验教学
- Lipin1在胚胎发育过程中对脂滴代谢的作用
- 引言/目的猪的卵母细胞和胚胎有着丰富的脂滴,但是在胚胎发育过程中脂滴代谢的机制并不是很清楚。Lipin1蛋白调控甘油三脂的合成,同时对脂代谢相关基因的表达有关键的调控作用。因此,通过对猪胚胎中Lipin1基因和蛋白表达的...
- 曾亚琼汪成飞牛英杰迟大明徐明珠李娟
- 小型猪克隆胚胎体外培养阶段的优化被引量：2
- 2014年
- 本试验从卵母细胞卵丘多少和初次卵裂时间早晚2个方面进行研究，旨在改善小型猪克隆方案的体外培养环节，提高克隆效率。将卵母细胞按卵丘多少分成3组，比较卵母细胞的成熟效果，取成熟效果好的卵母细胞进行后续试验；PA和SCNT试验均按初次卵裂时间早晚分成3组，在体外培养条件下，比较胚胎的卵裂率和囊胚率。结果表明，卵丘多的卯母细胞体外成熟39～40 h和卵丘少的卵母细胞体外成熟41～42 h，比不区分卵丘多少的卵母细胞体外成熟39～42 h的成熟效果要好；初次卵裂时间发生在26 h以前的胚胎比26 h之后的胚胎在数量和质量上都明显优越，前者胚胎的卯裂率和囊胚率显著高于后者，此结果在孤雌激活（parthenogenetic，PA）胚胎和体细胞核移植（somatic cell nucleartransfer，SCNT）胚胎的体外试验中均得到验证。本研究完善了小型猪克隆方案的体外培养环节，为器官异种移植提供相关技术参考。
- 杨希祥李智方龙川冯冲储明星潘登科李娟
- 关键词：小型猪异种移植体细胞核移植
- 高浓度葡萄糖对猪卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育的影响被引量：4
- 2021年
- 试验旨在探究高浓度葡萄糖对猪卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育能力的影响。取体外分离处于生发泡期的猪卵丘卵母细胞复合体(COCs),分为3个处理组。分别用含葡萄糖浓度为5.6 mmol/L(C组)、10 mmol/L(G-1组)、15 mmol/L(G-2组)的培养液,进行体外成熟(IVM)处理,42 h后观察,并统计卵丘细胞扩散情况和第一极体排出率;对体外成熟42 h后的卵母细胞孤雌激活,统计2-细胞、4-细胞和第7天囊胚发育。结果发现,G-1组和G-2组卵丘细胞扩散度显著低于C组(P<0.05);G-1组和G-2组的MII期卵母细胞死亡率和存活率与C组相比无显著差异(P>0.05),但G-1组极体率显著降低(P<0.05),G-2组极体率极显著低于C组(P<0.01)。孤雌激活后,与C组相比,G-1组和G-2组的2-细胞分裂率显著降低(P<0.05),4-细胞分裂率以及囊胚发育率均极显著降低(P<0.01),但G-1、G-2组囊胚细胞数量与C组相比无显著性差异(P>0.05)。进一步线粒体染色发现,G-1组和G-2组的线粒体与C组相比分布不均。与C组相比,荧光结果显示G-1组和G-2组不仅活性氧(ROS)水平极显著升高(P<0.01),而且G-1组与G-2组谷胱甘肽(GSH)含量显著降低(P<0.05),虽然G-1组丙二醛(MDA)无显著性差异(P>0.05),但G-2组丙二醛(MDA)含量显著升高(P<0.05)。研究结果表明,葡萄糖浓度高会影响猪卵母细胞线粒体分布,氧化应激水平升高,成熟效率降低,损害早期胚胎的发育潜能。
- 张童桐司莉南许红霞程文秀陶瑞鑫李娟
- 关键词：葡萄糖卵母细胞体外成熟胚胎发育
- 不同脂肪含量胚胎构建及其线粒体和脂滴的互作分析
- 猪卵母细胞内脂滴丰富,脂解生成的脂肪酸氧化产生大量的ATP,为卵母细胞体外成熟及胚胎发育提供能量。但是过多的脂滴严重影响了猪卵母细胞与早期胚胎的冷冻存活率。离心去脂虽然有效提高了冷冻效率,但脂滴去除后胚胎中剩余的脂滴和活...
- 牛英杰汪成飞迟大明曾亚琼李娟
- 关键词：去脂重构胚脂滴线粒体
- 克隆胚中的供核细胞源线粒体
- 引言/目的在目前的哺乳动物克隆研究中,研究人员观察到了供核细胞线粒体从克隆胚中消失的现象,而该现象的具体机制并不明晰。事实上在大多数动物正常受精时,尽管精源线粒体随着受精的进程进入到卵母细胞胞质中,但它们的线粒体DNA(...
- 迟大明曾亚琼牛英杰汪成飞李娟
- PGC7在猪卵母细胞成熟过程中的功能研究
- <正>引言:起初,PGC7作为一种主要在原始生殖细胞中表达的基因被报道,对于早期胚胎发育而言,PGC7是一个必要的母源效应基因,具有保护母源和父源印记基因免受主动去甲基化的作用。有报道指出雌性动物生殖细胞发育过程中,全基...
- 徐明珠司莉南曲啸李娟
- 文献传递
- 猪克隆胚早期发育过程中供体线粒体的动态变化及胞吐样排出对其清除的影响被引量：1
- 2017年
- 为观察猪克隆胚早期发育过程中供体线粒体的动态变化,并初步探究2细胞时期卵裂球间胞质排出对供体线粒体清除的特异性,以孤雌胚为对照,并使用预先标记线粒体的供核体细胞生产克隆胚。分别收集特定时期的胚胎进行共聚焦显微镜以及透射电镜的观察。结果显示:电击活后0~4 h,供体线粒体逐渐从核周扩散到胞质中。与孤雌胚相比,4 h克隆胚中的线粒体具有更多异常的形态。在2细胞(28 h)以及4细胞(52 h)阶段,根据在各个卵裂球中存在的数量,我们分别观察到3种供体线粒体的分布形式。其中在2细胞阶段,以三种形式存在供体线粒体的胚胎的比例分别为51.22%(All)、26.83%(Half)以及21.95%(No)。而在克隆囊胚中,仍可观察到少量红色荧光。此外,在多数2细胞克隆胚(87.93%)卵裂球间有胞质排出,并且在部分胚胎排出的胞质中可以观察到供体线粒体的存在。5μg/mL细胞松弛素B(cytochalasin B,CB)的添加没有明显改变携带供体线粒体的2细胞克隆胚的比例。同时2细胞孤雌胚中也存在相似的胞质排出现象,并且排出区域也可以观察到母源线粒体的存在。结果提示:供体线粒体在2细胞以及4细胞克隆胚中存在不均等分布、并于部分2细胞克隆胚两个卵裂球间随胞质排出的现象,而这种排出对于克隆胚中供体线粒体的清除不具有特异性。
- 迟大明曾亚琼徐明珠汪成飞牛英杰刘红林李娟
- 关键词：克隆胚
- 徒手克隆过程中的技术环节对体细胞克隆效率的影响被引量：4
- 2014年
- 随着体细胞核移植技术的发展,如何快速高效的获取克隆后代已然成为科研工作者们关注的重点。本文针对受体母猪受胎率和单胎产仔数较低的问题,以本实验室徒手克隆技术平台为出发点结合多年的实验经验及实验结果,从卵巢采集、徒手克隆过程、受体母猪准备、胚胎移植和受体母猪饲养管理等方面归纳总结克隆猪各个技术环节的要点。系统的介绍了影响猪体细胞核移植效率的因素及改善和优化措施,从而在胚胎移植过程中可稳定、高效的获得克隆小猪。为克隆技术的推广和应用提供技术支持。
- 熊强董宜春牛英杰潘登科刘红林李娟
- 关键词：核移植胚胎移植卵巢体外培养
- 手工克隆生产猪胚胎关键技术的改进研究被引量：1
- 2021年
- 手工克隆(handmade cloning,HMC)是在传统克隆技术的基础上发展出的一种体细胞核移植技术,作为纯手工操作技术,每一步骤的操作细节都影响着HMC的效率及重构胚胎发育能力。本试验针对HMC生产克隆猪胚胎的3个关键步骤:透明带消化、手工切割去核与无透明带重构胚的体外培养展开研究。结果显示,猪卵母细胞透明带以3.3 mg/mL链酶蛋白酶适度消化(10~15 s),在切割去核时卵母细胞死亡率显著低于透明带的过度(高于15 s)消化,死亡率分别为(3.22±1.08)%和(31.45±2.10)%;当透明带消化时间不足(少于10 s),不能被切割去核的猪卵母细胞显著升高,不可切割率分别为(18.25±4.22)%和(0.57±0.40)%。另外,"铡刀式"操作更适用于手工切割去核,其操作要点对成功获得无核半卵及其胞质含量非常重要。HMC无透明带重构胚体外培养时,孔深约250μm、孔径约300μm的微孔技术(well of wells,WOWs)有利于克隆胚胎发育。本研究优化了HMC操作的关键步骤,为提高生产克隆猪胚胎效率奠定了基础。
- 陶瑞鑫贾超武恩在李娟
- 关键词：体细胞核移植技术透明带
