朱彦博
- 作品数：6 被引量：9H指数：2
- 供职机构：中山大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种改进的荧光定量PCR标准曲线法的建立被引量：2
- 2008年
- 目的对常规实时荧光定量PCR（RT-PCR）的标准曲线法进行改进，以建立一种更为准确的RT-PCR的标准曲线定量法。方法通过构建β-actin、KLK11的质粒DNA标准品，以β-actin质粒DNA为正常对照，制作内参基因和目的基因的标准曲线，获得各自的扩增曲线。RT-PCR检测两种基因在恶性前列腺组织细胞LNCAP中的表达，并将改进的标准曲线法与常规的标准曲线法分别对B—actin／KLK11实时定量PCR的结果进行分析，分析两种方法的差异，以衡量新方法的准确性。结果所得β-actin和KLK11的标准曲线线性相关性良好（β-actinR^2=0．991，KLK11R^2=0．992），但两种基因的扩增效率有差异（β-actin 123％，KLK11 99％）。两种不同的标准曲线法处理后得到不同的结果：常用标准曲线法结果显示KLK11在LNCAP中有表达下调，而改进的标准曲线法得出KLK11在LNCAP中上调4．46倍。目的基因与内参基因的扩增效率差异有统计学意义（t=4．829，P〈0．05）。结论与常规的绝对定量法比较，改进的标准曲线法避免了因默认目的基因与内参基因有相同的扩增效率而导致的错误，是一种更为准确的荧光定量PCR分析方法。
- 彭瑾瑜吴丁兰钟惟德付艳艳朱彦博常弘
- 关键词：聚合酶链反应核酸扩增技术荧光光度测定法荧光染料信使
- 职业性三氯乙烯药疹样皮炎CXCR2和CXCR3基因的表达被引量：1
- 2009年
- 目的:建立荧光定量PCR检测三氯乙烯药疹样皮炎(DMLT)患者外周血淋巴细胞CXCR2和CXCR3mRNA表达的方法。方法:利用SYBRGreen荧光定量PCR分别检测24例DMLT患者、26例正常人外周血淋巴细胞CXCR2和CXCR3基因mRNA表达情况,以β2微球蛋白基因作为内参,根据相对定量公式(2-△△CT)计算DMLT患者与正常人CX-CR2和CXCR3基因表达差异倍数。结果:24例患者外周血淋巴细胞荧光定量PCR均检出CXCR2和CXCR3mRNA表达,其中CXCR2表达情况有两种:表达上升14例(58.3%)和表达下降10例(41.7%),与正常人CXCR2mRNA相比表达倍数分别为16.76±7.01、0.54±0.30;CXCR3表达显著升高(△CT=6.3±2.8,11.4±1.9;P<0.01),与正常人CX-CR3mRNA相比表达倍数为33.37±31.61。结论:成功建立了DMLT患者外周血淋巴细胞CXCR2和CXCR3mRNA表达的荧光定量PCR方法。
- 朱彦博张国萍杨志前党华常弘刘薇薇李森华
- 关键词：荧光实时定量PCR三氯乙烯药疹样皮炎
- 二氯乙酸对淋巴细胞的毒性和CXCR2／3表达的作用被引量：1
- 2010年
- 目的探讨三氯乙烯及其代谢产物对淋巴细胞增殖的影响以及二氯乙酸在三氯乙烯药疹样皮炎发病过程中的作用。方法抽取健康人外周静脉血，分离淋巴细胞，分别在2h和4h检测0．020．05、0．10、0．20、0．50、1．00、2．00、5．00、10．00、20．00、30．00mmol／L共12个浓度二氯乙酸、三氯乙烯、三氯乙酸刺激培养的淋巴细胞增殖能力；通过中性红试验找到二氯乙酸的半数致死量（NR50），依据NR50检测细胞在不同浓度二氯乙酸刺激下乳酸脱氢酶（LDH）和超氧化物歧化酶（SOD）活力；采用实时荧光定量技术检测二氯乙酸刺激下体外培养的淋巴细胞CXCR2和CXCR3基因mRNA的表达情况。结果细胞增殖能力检测结果显示，20．00mmol／L二氯乙酸刺激时的细胞活力为50％，而30．00mmol／L三氯乙烯和三氯乙酸刺激的细胞活力仍保持在60％以上。与对照组相比，染毒4h时各剂量二氯乙酸刺激时SOD活力均明显降低，并且酶活力随剂量的升高呈下降趋势，差异均有统计学意义（P〈0．05）。第4h在0．88、1．75、3．50、7．00mmol／L二氯乙酸刺激时的LDH活力与第1h比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。在0．5、10．0mmol／L二氯乙酸刺激培养48h下，CXCR2和CXCR3基因mRNA的表达分别是对照细胞表达量的10．34、5．66倍和19．43、8．75倍，差异均有统计学意义（P〈O．01）。结论二氯乙酸对体外培养的淋巴细胞具有较强的毒性作用，可能是三氯乙烯药疹样皮炎的主要诱导剂。
- 朱彦博常弘杨志前张国萍吴丁兰李森华
- 关键词：二氯乙酸盐三氯乙烯淋巴细胞细胞毒性
- 三氯乙烯药疹样皮炎患者外周血淋巴细胞趋化因子受体基因表达被引量：6
- 2008年
- 目的探讨三氯乙烯药疹样皮炎(DMLT)患者外周血淋巴细胞内趋化因子受体(CXCR2)基因的表达水平,同时研究外周静脉血代替皮肤组织作为研究样本的可行性。方法取DMLT患者的新鲜抗凝外周静脉血,用淋巴细胞分离液分离得到淋巴细胞,加TRIzol用氯仿、异戊醇抽提得到RNA,反转录为cDNA,通过聚合酶链反应扩增目的基因,电泳后以吸光度法检测25例DMLT患者、30例三氯乙烯接触者和30例正常人血液中CXCR2的表达水平。结果以β-actin作为内参照,病例组中,25例DMLT患者CXCR2表达水平明显高于对照组,分别为0.670±0.472、0.267±0.157(P<0.02)。结论CXCR2在DMLT患者体内表达水平显著上调,推测该基因在DMLT发病过程中的某些相关环节起了作用,趋化炎症细胞到炎症发生区域发生反应。
- 李森华付艳艳黄汉林彭瑾瑜朱彦博吴丁兰杨爱初常弘
- 关键词：三氯乙烯药疹样皮炎反转录聚合酶链反应
- 三氯乙烯药疹样皮炎CXCR2/3基因表达水平及二氯乙酸对其发病机理的研究
- 三氯乙烯(1，1，2-trichloroethylene[TCE]，CAS79-01-6)是一种无色、无味、易燃的有机溶剂，广泛应用于金属部件的脱脂。少数接触TCE的工人会发生严重的皮肤损伤，以严重皮疹、发热、肝损害和浅...
- 朱彦博
- 关键词：药疹样皮炎基因表达三氯乙烯二氯乙酸
- 文献传递
- 注意缺陷多动障碍与突触体联系蛋白25基因的关联研究
- 2008年
- 目的探讨中国汉族人群中注意缺陷多动障碍（ADHD）与突触体联系蛋白25（SNAP-25）基因微卫星（STR）和单核苷酸多态性（SNP）的关系。方法本组100例，均为学龄期的ADHD患儿，通过唾液取样获取他们及其父母的DNA样本。同时选取符合年龄段的正常儿童97名作为对照组，DNA样本从血液中提取。检测100个ADHD核心家系和97个对照的SNAP-25基因STR，同时对rs363006和rs362549两段SNP进行基因分型，并进行病例对照的关联分析和传递不平衡检验（TDT）。结果STR病例对照分析结果显示ADHD组和对照组（TAAA）n的等位基因频率和基因型频率差异无统计学意义（P均〉0．05）；rs363006和rs362549两段SNP的家系TDT研究表明，SNAP-25基因和ADHD之间不存在关联（P均〉0．05）。按照亚型分组后，rs362549在注意缺陷型中有优先传递等位基因A的趋势（χ^2=8．00，P〈0．01），而在混合型中有优先传递等位基因G的趋势（χ^2=4．122，P〈0．05）。结论SNAP-25基因STR和上述两段SNP和ADHD之间也许不存在关联，但rs362549这段SNP的多态性和ADHD亚型可能存在关联，尚需扩大样本进一步验证才能得出确切结论。
- 张红宇朱彦博常弘陈嘉昌
- 关键词：注意力缺陷障碍伴多动
