曹军卫
- 作品数:66 被引量:191H指数:7
- 供职机构:武汉东湖学院生命科学与化学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金武汉大学科技创新基金湖北省教育科学“十二五”规划课题更多>>
- 相关领域:生物学化学工程轻工技术与工程文化科学更多>>
- 细菌视紫质分子L-B膜制备及膜的有序性测定
- 曹军卫陈淑员
- 关键词:视紫质光敏化分子生物膜L-B膜
- 枯草芽孢杆菌突变株proBA基因植物表达载体的构建及转基因拟南芥的耐盐性能初探被引量:1
- 2005年
- 从枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)抗脯氨酸结构类似物突变株中克隆得到脯氨酸合成途径中的关键酶基因proB(编码γ-谷氨酰胺激酶)和proA(编码谷氨酰胺-γ-半醛脱氢酶),同时设计引物从拟南芥基因组中扩增得到吡咯啉-5-羧酸合成酶B基因(p5csB)的第一个内含子序列,将其分别与proB和proA基因通过PCR拼接后,酶切连接构建得到植物双元表达载体pBI121pro。以LBA4404为介导,采用真空抽滤的方法转化得到转proBA基因拟南芥;第三代的纯合子(T3)通过半巢式PCR的方法验证外源基因已整合到拟南芥基因组中,GUS活性分析表明外源基因在叶片中表达最强,茎部其次,根部最弱;对600mmol.L-1致死浓度NaCl耐受能力的分析表明,转基因拟南芥的平均存活时间(37.8min)明显高于野生型拟南芥(26min)。
- 曾永辉陈喜涵苗丽霞曹军卫
- 关键词:拟南芥转基因枯草芽孢杆菌耐盐
- 架桥前后汤逊湖水体水质富营养化状况对比被引量:1
- 2011年
- 在武汉市江夏区文化路段汤逊湖大桥建成后,于2010年12月至2011年3月间对汤逊湖的11个点采取水样,测定了各采样点水的pH、透明度、总磷、总氮、细菌总量、CODMn、叶绿素a的含量,与架桥前2007年12月至2008年3月相同采样点各指标数据进行对比。通过数据检测结果表明:架桥后透明度、总磷、总氮、细菌总量等各项指标整体低于架桥前的水平,汤逊湖目前水体为轻度富营养化。说明架桥对汤逊湖水质没有大的影响,且目前汤逊湖水质综合状况好于架桥前,水质相对于架桥前有一定改善。
- 杨书香王延枝潘祖亭曹军卫邓丽娟金卫华唐红枫涂毅张慧冯倩倩穆婷蒋怀方董翠
- 关键词:水质检测富营养化
- 嗜碱芽孢杆菌NTT89启动子的克隆及其表达
- 2000年
- 报导了以启动子探测质粒 p KK2 32 - 8为载体克隆嗜碱芽孢杆菌 NTT89启动子的研究 .用限制性内切酶 Hind 分别消化嗜碱芽孢杆菌 NTT89染色体 DNA和质粒 p KK2 32 - 8,在体外重组 ,转化大肠杆菌 DH5 α感受态细胞 ,在含氨苄青霉素和氯霉素的选择性平板上筛选转化子 ,结果从 NTT89染色体 DNA中克隆到一系列带有启动子活性的 DNA片段 ,并在大肠杆菌中得到表达 ,这些转化子抗氯霉素水平在 34~ 5 0 0 mg/ L 不等 ,随机挑选10个转化子 ,提取其重组质粒进行限制性酶切 ,表明转化子中的重组质粒外源片段插入的效率很高 ,插入片段大小在 5 0 0~ 5 5 0 0 bp之间 ,通过地高辛标记的点杂交和 Southern杂交均证明重组质粒上插入的具启动子功能的 DNA片段来自于嗜碱芽孢杆菌的染色体 DNA.
- 王玲燕曹军卫刘同明张小青
- 关键词:启动子克隆基因表达
- 高渗环境对枯草芽孢杆菌和粘质沙雷氏菌胞内自由氨基酸库含量和组成的影响被引量:7
- 1998年
- 在基本培养基中96h培养下,4%NaCl可完全抑制粘质沙雷氏菌(AB90025)生长,而枯草芽孢杆菌(93151和93215)则可耐受高达8%NaCl.与无NaCl条件下相比,粘质沙雷氏菌在2%NaCl浓度下,胞内谷氨酸、丙氨酸和苯丙氨酸含量分别增加615%,1357%和1270%,为该菌的主要渗透调节物质.枯草芽孢杆菌在无NaCl条件下,胞内未测出脯氨酸,而在8%NaCl浓度下脯氨酸成为胞内含量最高的氨基酸,在每克干细胞中含量高达33.3mg,是枯草芽孢杆菌体内合成的主要相容溶质.
- 杨清香曹军卫
- 关键词:氨基酸枯草芽孢杆菌粘质沙雷氏菌
- 黄芪水提物中微量铅对小鼠急性毒性和骨髓嗜多染红细胞微核试验的影响被引量:7
- 2002年
- 目的 :研究中药黄芪水提取物中微量铅的毒性及致突变性作用。方法 :以铅含量为 2 .71μg·g- 1 黄芪水提物混悬液(0 .76g·ml- 1 )灌胃给药进行了急性毒性试验及小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验。结果 :急性毒性试验最大耐受量为 3 0g·kg- 1 (铅摄入量为 81.3 μg·kg- 1 )相当药材 10 5g·kg- 1 ,约相当于临床用高剂量的 2 10倍。小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验 ,给药组与阴性对照组结果比较 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,阳性对照组与阴性对照组结果比较 ,差异具有极显著性 (P <0 .0 1)。结论 :急性毒性试验结果表明 ,该黄芪水提物属实际无毒。小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果为阴性 ,表明无致突变性作用 ,为临床安全用药提供了客观的科学依据。
- 谷鸣叶晓川吴巍邓芬宋跃进曹军卫
- 关键词:黄芪水提物铅毒性微核
- 嗜碱细菌NTT36嗜碱基因的亚克隆及其在大肠杆菌和农杆菌中的表达
- 1999年
- 将大肠杆菌HB101嗜碱转化子中质粒pGCA所携带的嗜碱基因亚克隆至双元载体pBI121质粒中,构建了植物表达载体pLGC重组质粒。用其转化大肠杆菌HB101获得了能在碱性和卡那霉素抗性平板上生长的转化子,再通过三亲交配法将亚克隆质粒pLGC转化进农杆菌LBA4404,又获得能在碱性平板和卡那霉素及利福平双抗平板上生长的转化子,Southern杂交结果表明HB101转化子亚克隆质粒pLGC是由来自于嗜碱芽孢杆菌NTT36染色体DNA和双元载体pBI121组成,且农杆菌LBA4404转化子含有来自大肠杆菌亚克隆转化子的pLGC质粒。
- 刘同明曹军卫王玲燕刘阳俞雁寻
- 关键词:嗜碱芽孢杆菌农杆菌亚克隆植物表达载体
- 嗜盐嗜碱芽孢杆菌NTT76启动子和信号肽序列的克隆及表达被引量:1
- 2001年
- 利用启动子信号肽探测型质粒 p GPB14 ,从嗜盐嗜碱芽孢杆菌 NTT76的总基因组中克隆具有启动子和信号肽功能的 DNA片段 .共得到 4 1个转化子 ,其氨苄青霉素抗性水平在 10 0 0~ 12 0 0 0 m g/ L之间 .从 3个不同抗性水平的转化子中提取重组质粒 ,酶切显示 ,外源插入片段在 10 0~ 5 0 0 bp之间 .将重组质粒转化枯草芽孢杆菌 ,也同样使枯草芽孢杆菌具有分泌β-内酰胺酶的功能 .β-内酰胺酶活力测定表明 ,大肠杆菌产生的酶主要积累在周质空间 ,而枯草芽孢杆菌产生的酶主要分泌在胞外 .对外源插入片段进行序列测定发现 ,所有片段中均含有启动子区、核糖体结合位点和信号肽编码区域 .
- 陈建军曹军卫苏莉
- 关键词:启动子信号肽基因工程
- 碱性果胶裂解酶基因pelA在E.coli中的表达和酶学性质研究被引量:2
- 2001年
- 根据核苷酸序列分析结果设计引物 ,通过 PCR的方法 ,在嗜碱芽孢杆菌 NTT3 3的总 DNA和 p13 5 0中分别扩增到预计大小的片段 ,证明 p13 5 0中的外源 DNA片段来自于嗜碱芽孢杆菌 NTT3 3 .同时也获得了含有pel A完整 ORF的 DNA片段 .经计算 ,该基因表达的成熟蛋白质的分子量为 3 4 .76× 10 3.构建表达载体 p BV2 2 0 -pel,在 E.coli DH5α中进行表达 .SDS- PAGE检测发现 ,表达的蛋白质分子的大小约为 3 5× 10 3,与预测的相符 .初步研究其酶学性质发现 ,该酶在 p H 9.0~ p H10 .0 ,4 5°C的条件下有较高的活性 ,而且必需 Ca2 + 参与反应 .
- 翟超曹军卫
- 关键词:嗜碱芽孢杆菌DNA片段酶活性
- 枯草芽孢杆菌耐盐突变株proA全基因克隆及proBA基因渗透压调节功能研究
- 利用TaKaRa LA PCR试剂盒扩增枯草芽孢杆菌93151耐盐突变株proA基因的未知下游序列。根据测序结果,设计引物,克隆出发菌株和突变株全长proBA基因。序列分析表明,突变株proA基因有三个碱基发生了突变(从...
- 刘瑞杰曹军卫苗丽霞