徐敏
- 作品数：15 被引量：98H指数：5
- 供职机构：江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 产胶期溶氧水平对土壤杆菌ATCC31749发酵产热凝胶流变性质的影响被引量：2
- 2013年
- 热凝胶是由土壤杆菌在氮源限制条件下生产的水不溶性胞外多糖。通过在线实时调节通气量建立了恒定溶氧控制策略,并将产胶期溶氧分别恒定控制在饱和溶氧浓度DO 5%、25%、50%和75%水平。然后,考察了产胶期溶氧浓度对土壤杆菌(Agrobacterium.sp.ATCC 31749)发酵过程及热凝胶流变性质的影响。结果表明,低溶氧(DO 5%)造成热凝胶生产强度显著下降,而溶氧水平高于DO 25%后,热凝胶比生成速率基本恒定。同时,热凝胶-碱溶液的流变行为符合假塑性流体特征,随着产胶期发酵时间增加,热凝胶溶液粘度迅速升高,且非牛顿流体特征逐渐显著。相同发酵时间时,适度溶氧(DO 25%)热凝胶溶液具有最大粘度,而溶氧限制(DO 5%)和高溶氧时(DO 75%)粘度均较低。控制发酵溶氧水平可以获得具有不同流变性质的热凝胶产品。
- 李晶徐敏朱莉郑志永詹晓北
- 关键词：土壤杆菌热凝胶假塑性流体粘度
- 转化木质纤维素水解液为燃料乙醇的新型重组菌
- 农林生物质是最重要的可再生资源,其中的木质纤维素占世界上生物质的50%左右(100～500亿吨),是燃料乙醇生产的重要潜在原料。木质纤维素主要由三种成分组成即:纤维素(占干重的30～50%)、半纤维素(占干重的20～40...
- 孙金凤徐敏王晨霞王正祥
- 文献传递
- 两阶段pH和搅拌控制策略提高哈茨木霉产β-1,3-葡聚糖内切酶被引量：1
- 2015年
- 为提高哈茨木霉（Trichoderma harzianum GIM 3.442）发酵生产β-1,3-葡聚糖内切酶的酶活Eendo及其内切酶酶活在总酶活中所占的比例Eendo/Etotal,在7 L发酵罐水平考察了不同pH和搅拌转速对菌体和产酶的影响。结果表明,单一pH或搅拌转速的优化不能使菌体生长和产物合成同时达到最优效果。通过分析不同pH和转速下发酵曲线和动力学参数,提出了两阶段pH和搅拌转速控制策略：在发酵前期（0-24 h）控制pH 7.0,搅拌转速100 r/min,发酵后期（24-168 h）控制pH 5.0,搅拌转速200 r/min。β-1,3-葡聚糖内切酶（Eendo）、酶合成生产强度（QE,endo）和Eendo/Etotal分别达到了407.8 U/mL、3.09 U/（m L·h）和0.71,比优化前分别提高了320.0%、398.4%和65.1%。
- 李珊詹晓北郑志永朱莉李晶徐敏
- 关键词：哈茨木霉PH搅拌转速
- 哈茨木霉产β-1,3-葡聚糖内切酶的发酵工艺条件研究被引量：2
- 2015年
- 对哈茨木霉(Trichoderma harzianum GIM 3.442)产β-1,3-葡聚糖内切酶的液体发酵条件进行了单因素优化实验,确定了最佳培养基成分和培养条件,在此基础上通过正交试验设计对复合碳源(葡萄糖、茯苓多糖)、胰蛋白胨、Na NO3和磷酸盐进行了L9(34)试验,研究了4种因素对哈茨木霉产酶的影响,确定了最佳培养条件:葡萄糖42.0 g/L,茯苓多糖18.0 g/L,胰蛋白胨15.0 g/L,Na NO35.0 g/L,初始p H 6.0,接种量8%,28℃,110 r/min培养6 d。优化后总酶活Etotal和β-1,3-葡聚糖内切酶Eendo活力达到了471.6 U/m L和327.4 U/m L,比优化前分别提高了7.3倍和23倍,且内切酶占总酶活的比例Eendo/Etotal由0.24增加到0.71,效果显著。
- 李珊詹晓北郑志永朱莉李晶徐敏
- 关键词：哈茨木霉发酵优化正交试验
- 凝乳酶的基因克隆、序列分析及初步表达被引量：11
- 2005年
- PCR扩增得到微小毛霉凝乳酶结构基因并测定其核苷酸序列,用DNAman软件分析其核苷酸序列及推衍得到的多肽序列,结果表明扩增得到的片段为凝乳酶基因。构建了重组菌Pichia pastoris KM71/PIC9K-mcp,通过G418抗性筛选得到具有多拷贝基因的整合重组菌MK3。用甲醇诱导进行初步发酵试验,测得重组菌MK3酶活为5.4U/ml。
- 邱重晏徐敏王正祥
- 关键词：凝乳酶克隆重组菌
- 利用木糖和葡萄糖合成乙醇的新型重组大肠杆菌的研究被引量：24
- 2004年
- 利用PCR方法从运动发酵单孢菌染色体DNA扩增出乙醇合成途径的关键酶基因pdc、adhB ,分别用tac启动子控制表达 ,构建了可以在EscherichiacoliJM10 9中表达的重组质粒pKK_PA、pEtac_PA。初步的乙醇发酵结果表明 ,在E .coli中只引入adhB基因不能拓宽其中的产乙醇途径 ,引入pdc基因可以与宿主自身的ADH酶协同作用 ,使碳流有效导向产乙醇方向。同时引入pdc、adhB基因可以在宿主E .coli中成功建立产乙醇途径。
- 孙金凤徐敏张峰王正祥
- 关键词：重组大肠杆菌乙醇发酵
- 地衣芽孢杆菌α-淀粉酶基因的克隆和及其启动子功能鉴定被引量：23
- 2006年
- 根据已知α-淀粉酶编码基因保守区核苷酸序列,通过PCR和反向PCR技术克隆出Bacillus licheniformisCICIM B0204α-淀粉酶编码基因amyL全长序列及其上下游序列。B.licheniformisCICIM B0204amyL由1539bp组成,其上游180bp为启动子序列,下游160bp为终止子序列;成熟肽由512个氨基酸残基组成,氨基端的29个氨基酸残基为α-淀粉酶的信号肽。通过基因及其氨基酸序列比对发现,amyL及其编码产物与芽孢杆菌来源的α-淀粉酶具有高度相似性。将amyL的结构基因在PT7介导下于大肠杆菌中诱导表达,获得具有α-淀粉酶活性的表达产物。将amyL的启动子序列和信号肽序列与B.licheniformisCICIM B2004的β-甘露聚糖酶结构基因进行读框内重组,在大肠杆菌中获得了β-甘露聚糖酶的分泌表达,重组大肠杆菌表达295U/mL的β-甘露聚糖酶酶活。
- 牛丹丹徐敏马骏双王正祥
- 关键词：地衣芽孢杆菌Α-淀粉酶Β-甘露聚糖酶基因克隆启动子信号肽
- 琥珀酸放线杆菌的耐高浓度钠离子菌株选育被引量：5
- 2008年
- 以琥珀酸放线杆菌Actinobacillus succinogenes CGMCC 1593为出发菌,经过紫外线和甲基磺酸乙酯(EMS)诱变处理,选育出一株耐高浓度钠离子菌株SE-6。该菌株在5 L发酵罐中进行分批发酵,单独使用Na2CO3控制发酵过程pH,发酵48 h琥珀酸产量达到35.8 g/L,较出发菌(26.0 g/L)提高了37.7%;若采用MgCO3和Na2CO3共同调控发酵过程pH,发酵48 h琥珀酸产量达到45.0 g/L,较出发菌(37.4 g/L)提高了20.4%。
- 徐敏郑璞倪晔孙志浩
- 关键词：琥珀酸诱变突变株
- 哈茨木霉产水解热凝胶的内切β-1,3-葡聚糖酶的分离纯化被引量：5
- 2014年
- 结合多种分离方法,从哈茨木霉(Trichoderma harzianum Rifai ACCC30371)的发酵产物中分离得到一种对不溶性多糖热凝胶具有较高水解活性的内切β-1,3-葡聚糖酶。结果表明,哈茨木霉发酵液经50%饱和度硫酸铵沉淀预处理后,依次经过HiPrep 26/10 desalting层析柱脱盐、QFF阴离子交换层析柱去除杂质蛋白,最终经Superdex 75凝胶柱纯化获得纯度较高的内切β-1,3-葡聚糖酶。最终酶活回收率为6.63%,内切酶比酶活由6.86U/mg提高到133.01U/mg,纯化倍数达到19.39倍。MALDI-TOF-TOF鉴定结果表明,该内切酶与产自绿色木霉的endoglucanase存在较高的同源性。
- 徐敏李晶郑志永朱莉詹晓北李珊张洪涛
- 关键词：哈茨木霉热凝胶分离纯化
- 定量薄层层析法用于内切β-1,3-葡聚糖酶筛选纯化过程中酶活力测定被引量：1
- 2013年
- 根据寡糖与显色剂反应后的呈色物质在540nm处吸光值强度,建立了一种用于分析水解液中寡糖浓度的定量薄层层析法。应用阴离子交换层析结合两步分子筛层析技术在β-葡聚糖酶样品(来源于Trichoderma reesei)中纯化得到一种内切β-葡聚糖酶(EndoG,23.6ku),内切酶纯化44.5倍,酶活回收率12.4%。底物特异性及水解产物分析表明该酶属于内切β-1,3-葡聚糖酶,初步分类为EC3.2.1.39。经测定,EndoG降解热凝胶主要生成昆布二糖和昆布三糖,最适反应条件为pH5.0,50℃。由于EndoG对水不溶性底物热凝胶具有较高的水解活性,对该酶的深入研究可以为提高热凝胶利用率和应用范围提供帮助。
- 李晶朱莉詹晓北徐敏郑志永
- 关键词：热凝胶纯化
