张海英
- 作品数：5 被引量：14H指数：3
- 供职机构：四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：四川省应用基础研究计划项目教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 气单胞菌几丁质酶的产酶条件优化研究被引量：1
- 2007年
- [目的]为了进行气单胞菌几丁质酶产酶条件的研究。[方法]从自然死亡家蚕中肠围食膜中分离的气单胞菌进行产酶优化试验。其优化条件为:粉状几丁质1.2%,K2HPO4 0.12%,乙酸铵0.02%,发酵72 h,温度为30℃,起始pH值为8.0,培养基装量为15%。[结果]结果表明:该菌株所产几丁质酶的最适反应温度为25℃,pH值5.5,耐温性较差,但pH值5.0～9.0的酶活力较稳定(>88%)。[结论]该研究提供了提高几丁质酶产量的途径,但对该菌株进行基因改造或诱变育种,充分发掘其产酶潜力,对其几丁质酶基因进行克隆、表达等仍需进一步研究。
- 张莉杨土凤陈晓梅张海英徐敏刘世贵龙章富
- 关键词：发酵优化几丁质酶
- 胞内表达猪生长激素基因的重组酵母菌构建与鉴定被引量：3
- 2007年
- 将猪生长激素(pGH)cDNA定向插入毕赤酵母胞内表达载体pPIC 3.5k质粒,重组构建了pPIC 3.5k-pGH/GS115酵母表达系统,其表达产物的SDS-PAGE和Western blot结果表明,pGH蛋白在胞内获得正确表达,表达量达378 mg/L.
- 付若彬刘海华张海英张莉刘世贵龙章富
- 关键词：猪生长激素基因毕赤酵母真核表达
- 牛蛙生长激素基因cDNA克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：1
- 2007年
- 以成体牛蛙脑垂体总RNA为模板进行RT-PCR,克隆到牛蛙生长激素基因(bullfroggrowth hormone,bfGH)cDNA编码序列,其长度为651 bp,编码的前体GH蛋白序列经BLAST分析,与已报道的牛蛙GH蛋白质序列AAB24792、AAB19428、CAA31038的同源性分别为98.1%、96.3%、95.3%,其在Genbank的登录号为AY251538;将bfGH亚克隆到原核表达载体pGEX1-λt构建成牛蛙GH原核表达载体VGBfGH,转化BL21(DE3)E.coli得到重组菌,0.01 mol/L的IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE分析,bfGH表达率达到29.3%,融合蛋白的分子量为51 kDa.回收BfGH融合蛋白注射免疫家兔获得兔抗血清,以其为一抗,经ELISA-RA检测分析表明回收的重组蛋白能与牛蛙肝膜受体蛋白结合.
- 张海英喻麟刘海华刘崑刘世贵龙章富
- 关键词：牛蛙生长激素克隆原核表达
- 矮牵牛花香基因BSMT3的cDNA克隆与表达特征分析被引量：3
- 2007年
- 以矮牵牛花瓣总RNA为模板,RT-PCR方法克隆得到其BSMTcDNA,全长1100bp,编码357aa,与已有报道phBSMT1(GenBank No.AA0501)和phBSMT2(AAO45013)的同源性分别达到97.76%和98.6%,该序列在Gen-Bank登录号为DQ494491,命名为phBSMT3.构建的BSMT3 cDNA的原核表达质粒pGBSMT转化BL21(DE3)E.coli,获得的重组菌株经0.01mol/LIPTG诱导后得到正确表达的GST-BSMT融合蛋白带,以纯化的重组表达蛋白免疫家兔获得其兔抗免疫血清.免疫组化研究结果证实,矮牵牛花香基因BSMT在花瓣、花管中的表达量较其它组织的表达量高.
- 喻麟淳泽张海英杨涛王立洪刘世贵龙章富
- 关键词：矮牵牛CDNA克隆花香基因花瓣
- 草鱼生长激素基因在毕赤酵母中的表达被引量：6
- 2006年
- 将草鱼生长激素基因(cGH)的cDNA亚克隆到酵母表达载体pPIC9K中,经电击转化导入毕赤巴斯德酵母GS115菌株,获得转化子。菌落PCR技术筛选证实cGH已经整合到了酵母染色体上。对重组酵母进行诱导表达,SDS-PAGE和Western印迹分析,结果表明cGH在毕赤巴斯德酵母GS115菌株中获得了高效表达。
- 孟亚鹏徐敏代焕梅丁秀琼张海英殷雪刘世贵龙章富
- 关键词：草鱼生长激素基因毕赤酵母
